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來源: 發(fā)布時間:2025-06-12

NA基因擴增子測序及分析,研究菌群分布。參考文獻2:·樣本類型:***種子?!颖痉鬯椋好抗?0粒種子,電動組織研磨器配合研磨杵,研磨5min?!颖綝NA提取:FastDNA Spin Kit for Soil提取?!は掠螌嶒灒杭毦?6S rDNA基因擴增子測序及分析,研究菌群分布。 相關文獻:1.Campisano A ,Antonielli L , Pancher M , et al. Bacterial Endophytic Communities in theGrapevine Depend on Pest Management【J】. Plos One, 2014, 9.2.Chen X , Krug L ,Yang H , et a上海益啟生物賣的土壤DNA提取是正規(guī)產(chǎn)品嗎?松江區(qū)FastDNA Spin Kit土壤DNA提取銷售

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les using SPINeasy DNA Kit for Soil:M: 1kb plus DNA ladder、Lane 1: Organic soil、Lane 2: Paddy soil、Lane 3: Flowerbed soil、Lane 4: Saline soil 、L ane 5: Desert soil。結(jié)論:采用SPINeasy DNA Kit for Soil提取多種類型土壤基因組DNA,電泳條帶清晰,無彌散。3.提取不同類型土壤基因組DNA進行PCR結(jié)果。Figure 2: PCR amplification of 16S rRNA gene from different soil samples using SPINeasy DNA Kit for Soil:Lane 1: Organic soil、Lane 2: Paddy soil、M: 1kb plus DN

l. Nicotiana tabacum seed endophytic communities share a commoncore structure and genotype-specific signatures in diverging cultivars【J】.Computational and Structural Biotechnology Journal, 2020, 18。本發(fā)明屬于核酸提取純化技術領域,具體涉及一種土壤尿液DNA提取試劑盒及方法。 背景技術: 二氧化硅能在鹽和特定pH值條件下可逆的結(jié)合DNA,這也是硅珠法、磁珠法、硅膠膜法提取DNA的理論基礎;在高濃度離液鹽和低pH值條件下,二氧化硅能通過氫鍵與DNA結(jié)合,而蛋白質(zhì)、脂類、糖類等雜質(zhì)因不能被結(jié)合從而被去除,去除離液鹽、提高pH值之后,DNA與二氧化硅之間的相互作用力減弱,DNA從二氧化硅表面釋放,從而獲得純化的DNA;在線詢價MP土壤DNA提取。

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12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,12000rpm離心3分鐘,將離心柱轉(zhuǎn)移至新的離心管中,70℃加熱3分鐘;加入20 ul洗脫液,70℃加熱3分鐘;12000rpm離心1分鐘,丟棄離心柱,離心管中液體即為DNA溶液。 2)PCR擴增及電泳 PCR擴增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴增程序為,95℃,11分鐘;94℃,20 秒,59℃,3分鐘,30個循環(huán);60℃,10分鐘;4℃保存;電泳在ABI 3500XL儀器中進行;電泳上樣體系為,1 μl PCR產(chǎn)物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 實施例4 以石英膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤,烘干,上海益啟,采購土壤DNA提取的放心之選。松江區(qū)FastDNA Spin Kit土壤DNA提取銷售

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取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘; b.最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,加入800 ul結(jié)合液,混勻; c.將上一步的混合液轉(zhuǎn)移至硅基DNA吸附材料,分離液體和硅基DNA吸附材料; d.用漂洗液漂洗硅基DNA吸附材料; e.用洗脫液洗脫硅基吸附材料中的DNA; 2)PCR擴增及電泳 將上步純化的DNA進行PCR擴增,在電泳儀中檢測DNA。 本發(fā)明具有以下有益效果: 本發(fā)明的土壤尿液DNA提取試劑盒及方法,配制好土壤裂解液、結(jié)合液、漂洗液、洗脫液,利用特殊成分的土壤裂解液,在加入結(jié)合液之前,樣品土壤來源的二氧化硅不與DNA結(jié)合,離心分離固體顆粒和溶解了DNA的上清液,上清液中加入結(jié)合液,混合后轉(zhuǎn)入含有硅基DNA吸附材料中,分離液體和硅基DNA吸附材料,漂洗硅基DNA吸附材料,洗脫獲得純化DNA;松江區(qū)FastDNA Spin Kit土壤DNA提取銷售