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中山獼猴原代肝細(xì)胞貼壁

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-12-17

原代肝細(xì)胞也可以用于Organ-on-a-chip的構(gòu)建。Organ-on-a-chip是一項(xiàng)創(chuàng)新性的科技成果,它在載玻片大小的芯片上構(gòu)建了一個(gè)完整的生理組織微系統(tǒng),其中包含有原代肝細(xì)胞、肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞、生物流體和機(jī)械力所需微環(huán)境的關(guān)鍵要素。這個(gè)微型肝臟模型可以在體外模擬人體肝臟的主要結(jié)構(gòu)功能特征和復(fù)雜的組織間聯(lián)系,為藥物藥效評(píng)價(jià)、藥物安全性評(píng)價(jià)、化妝品安全性評(píng)價(jià)、食品安全性評(píng)價(jià)、環(huán)境保護(hù)評(píng)價(jià)等提供了一種全新的方法和手段。 這個(gè)微型肝臟模型的研發(fā),是在對(duì)傳統(tǒng)的肝臟模型進(jìn)行改進(jìn)和創(chuàng)新的基礎(chǔ)上實(shí)現(xiàn)的。傳統(tǒng)的肝臟模型通常是基于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)或體外細(xì)胞培養(yǎng)的方法,但這些方法存在著很多的局限性和缺陷。例如,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)不僅存在著倫理和道德問題,而且還存在著種屬差異、生理反應(yīng)差異等問題;而體外細(xì)胞培養(yǎng)則存在著細(xì)胞失活、細(xì)胞分化等問題。因此,Organ-on-a-chip的出現(xiàn),填補(bǔ)了這些傳統(tǒng)方法的空白,為科學(xué)研究和工業(yè)應(yīng)用提供了更加可靠和有效的手段。原代肝細(xì)胞可以用于研究肝臟的再生和修復(fù),可以幫助人們更好地了解肝臟移植和liver cance。中山獼猴原代肝細(xì)胞貼壁

貼壁培養(yǎng)是一種常用的細(xì)胞培養(yǎng)方法,可以使原代肝細(xì)胞在培養(yǎng)皿表面附著生長(zhǎng),形成單層細(xì)胞群落。原代肝細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)需要注意以下幾點(diǎn): 1. 分離和準(zhǔn)備細(xì)胞:從新鮮的動(dòng)物肝臟中分離出原代肝細(xì)胞后,需要進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和質(zhì)量檢測(cè),確保細(xì)胞數(shù)量和質(zhì)量符合要求。 2. 培養(yǎng)基的選擇:原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)基需要選擇適合其生長(zhǎng)和代謝的培養(yǎng)基,常用的培養(yǎng)基包括DMEM、RPMI-1640等。 3. 培養(yǎng)皿的涂層:為了使原代肝細(xì)胞能夠附著生長(zhǎng),需要在培養(yǎng)皿表面涂層一定濃度的膠原蛋白、明膠或者其他細(xì)胞黏附因子。 4. 細(xì)胞接種和培養(yǎng):將準(zhǔn)備好的原代肝細(xì)胞接種到涂層好的培養(yǎng)皿中,加入適量的培養(yǎng)基,放入恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。需要注意的是,原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)時(shí)間較短,一般在3-5天左右,因此需要及時(shí)更換培養(yǎng)基和進(jìn)行細(xì)胞觀察。 原代肝細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)可以通過在培養(yǎng)皿上加一定的的吸附涂層來達(dá)到讓原代肝細(xì)胞快速貼壁的效果。天津鮭魚原代肝細(xì)胞提取原代肝細(xì)胞是一種從新鮮肝臟組織中分離出來的細(xì)胞,具有高度的生物學(xué)活性和生理功能。

原代肝細(xì)胞的體外培養(yǎng)一直是困擾學(xué)者們開展肝病研究的難題。為了研究肝臟的生理和病理過程,學(xué)者們一直在努力開發(fā)體外培養(yǎng)原代肝細(xì)胞的方法。 一般來說,原代肝細(xì)胞體外培養(yǎng)可以維持7-14天左右,7天以后細(xì)胞的狀態(tài)和活率會(huì)逐漸開始下降。 為了克服這些局限性,科學(xué)家們開始嘗試將肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞和肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞共同培養(yǎng)。根據(jù)鄧宏魁教授的5C文章,將肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞和肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞共同培養(yǎng)時(shí),肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞和肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞可以相互作用,形成更加復(fù)雜的細(xì)胞群體,從而更好地模擬肝臟的生理和病理過程,通過這種方法可以將原代肝細(xì)胞體外培養(yǎng)128天。 當(dāng)然,共同培養(yǎng)方法也存在一些局限性,比如如何控制細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化、如何保持細(xì)胞的穩(wěn)定性等。但是,隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步,相信這種方法將會(huì)越來越成熟,為研究肝臟生理和病理提供更加有效的手段。

在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)過程中,如何避免污染?在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)過程中,避免污染是非常重要的,以下是一些避免污染的方法:1.嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作:在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)前,需要對(duì)所有設(shè)備和材料進(jìn)行嚴(yán)格的無菌處理,并在操作過程中嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范,避免細(xì)菌和其他微生物的污染。2.使用無菌技術(shù):在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),需要使用無菌技術(shù),例如使用無菌培養(yǎng)皿、無菌吸管、無菌手套等,以避免污染。3.保持培養(yǎng)環(huán)境清潔:培養(yǎng)環(huán)境的清潔度對(duì)原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)非常重要。需要定期清潔培養(yǎng)室和培養(yǎng)設(shè)備,并保持室內(nèi)通風(fēng)良好。4.控制人員流動(dòng):在培養(yǎng)過程中,需要控制人員流動(dòng),盡量減少人員進(jìn)出培養(yǎng)室,以避免污染。5.使用無菌培養(yǎng)基:使用無菌培養(yǎng)基可以避免培養(yǎng)基中的細(xì)菌和其他微生物的污染。6.定期檢查:定期檢查培養(yǎng)物的生長(zhǎng)情況和污染情況,及時(shí)發(fā)現(xiàn)和處理污染。立沃生物的原代肝細(xì)胞可以配套提供多種細(xì)胞凍存設(shè)備支持,包括程序降溫儀,低溫液氮罐等。

原代肝細(xì)胞的融合度是影響其生長(zhǎng)和增值能力的重要因素之一。當(dāng)融合度達(dá)到70%以上時(shí),細(xì)胞開始進(jìn)入高度同步狀態(tài),細(xì)胞之間的相互作用也得到了有效的發(fā)揮,從而促進(jìn)了細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。但是,如果融合度低于70%,細(xì)胞之間的相互作用就會(huì)受到限制,導(dǎo)致細(xì)胞的增值能力受到限制,無法達(dá)到100%。 此外,細(xì)胞之間的距離也是影響細(xì)胞生長(zhǎng)和增值能力的重要因素之一。當(dāng)細(xì)胞之間的距離剛好是黃金分割點(diǎn)時(shí),細(xì)胞開始進(jìn)入高度同步狀態(tài),細(xì)胞之間的相互作用也得到了有效的發(fā)揮,從而促進(jìn)了細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。但是,如果細(xì)胞之間的距離超過了黃金分割點(diǎn),細(xì)胞就無法進(jìn)入高度同步狀態(tài),從而導(dǎo)致細(xì)胞的增值能力受到限制。 細(xì)胞的培養(yǎng)密度也是影響細(xì)胞生長(zhǎng)和增值能力的重要因素之一。低密度培養(yǎng)雖然可以保持細(xì)胞的功能,但是細(xì)胞的增值能力會(huì)很快丟失。而高密度培養(yǎng)可以維持細(xì)胞的功能一段時(shí)間,但是也會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞之間的相互作用受到限制,從而影響細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。因此,在進(jìn)行原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)時(shí),需要根據(jù)實(shí)際情況選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)密度,以保證細(xì)胞的生長(zhǎng)和增值能力得到正常的發(fā)揮。立沃生物的原代肝細(xì)胞配套有多種細(xì)胞培養(yǎng)耗材,包括細(xì)胞培養(yǎng)濾器、細(xì)胞培養(yǎng)板皿瓶等。江蘇小鼠原代肝細(xì)胞分離培養(yǎng)

立沃生物的原代肝細(xì)胞來源于不同的動(dòng)物品系,以滿足客戶的個(gè)性化需求。中山獼猴原代肝細(xì)胞貼壁

原代肝細(xì)胞是藥物的毒性研究的重要組成部分。藥物通過肝臟代謝后,大多數(shù)藥物的毒性被消除,但同時(shí)也有一些無毒或低毒的物質(zhì)通過生物轉(zhuǎn)化后轉(zhuǎn)變成有毒甚至毒性更大的物質(zhì),因此肝臟便必然成為研究藥物毒性的重要target organ。原代肝細(xì)胞即為一個(gè)較好的篩選模型,尤其是在檢測(cè)結(jié)構(gòu)相關(guān)化合物時(shí),原代肝細(xì)胞的角色更為重要。 人原代肝細(xì)胞是重要的體外模型。人原代肝細(xì)胞在較大程度上保留了細(xì)胞在體內(nèi)organ里的功能,各種物質(zhì)代謝功能和酶活性與體內(nèi)的肝細(xì)胞極其相似,是較為接近臨床的一種標(biāo)準(zhǔn)體外短期培養(yǎng)模型。人原代肝細(xì)胞通常從肝或肝組織中獲得,一般在肝切除手術(shù)中或者肝移植后排斥的肝組織中獲取,隨后即時(shí)進(jìn)行研究或者凍存待用。 原代肝細(xì)胞是肝臟疾病的研究以及相應(yīng)藥物的開發(fā)的重要載體。比如一些對(duì)于乙肝病毒的研究需要對(duì)肝細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng);一些嚴(yán)重肝臟疾病的細(xì)胞移植研究也要涉及到對(duì)原代肝細(xì)胞進(jìn)行大量擴(kuò)增。因此,原代肝細(xì)胞的體外培養(yǎng)和研究是一直以來科學(xué)家們關(guān)注的熱點(diǎn)。中山獼猴原代肝細(xì)胞貼壁