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北京雞原代肝細胞分離

來源: 發(fā)布時間:2023-12-16

原代肝細胞的體外培養(yǎng)一直是困擾學者們開展肝病研究的難題。為了研究肝臟的生理和病理過程,學者們一直在努力開發(fā)體外培養(yǎng)原代肝細胞的方法。 一般來說,原代肝細胞體外培養(yǎng)可以維持7-14天左右,7天以后細胞的狀態(tài)和活率會逐漸開始下降。 為了克服這些局限性,科學家們開始嘗試將肝實質(zhì)細胞和肝非實質(zhì)細胞共同培養(yǎng)。根據(jù)鄧宏魁教授的5C文章,將肝實質(zhì)細胞和肝非實質(zhì)細胞共同培養(yǎng)時,肝實質(zhì)細胞和肝非實質(zhì)細胞可以相互作用,形成更加復雜的細胞群體,從而更好地模擬肝臟的生理和病理過程,通過這種方法可以將原代肝細胞體外培養(yǎng)128天。 當然,共同培養(yǎng)方法也存在一些局限性,比如如何控制細胞的生長和分化、如何保持細胞的穩(wěn)定性等。但是,隨著技術(shù)的不斷進步,相信這種方法將會越來越成熟,為研究肝臟生理和病理提供更加有效的手段。立沃生物科技有限公司的原代肝細胞是一種擁有肝臟組織特點與特性的的細胞產(chǎn)品,具有不錯的應(yīng)用前景。北京雞原代肝細胞分離

    如何提高原代肝細胞的存活率?原代肝細胞是指直接從生物體肝臟中分離出來的肝細胞,其存活率的提高可以通過以下方法實現(xiàn):1.選擇合適的分離方法:選擇合適的分離方法可以提高原代肝細胞的存活率。例如,可以使用膠原酶消化法或機械分離法等方法分離肝細胞。2.控制培養(yǎng)條件:原代肝細胞的培養(yǎng)條件對其存活率有很大影響。例如,培養(yǎng)溫度、濕度、氧氣含量、培養(yǎng)基成分等都需要嚴格控制。3.使用合適的培養(yǎng)基:選擇合適的培養(yǎng)基可以提高原代肝細胞的存活率。例如,可以使用含有肝細胞生長因子、胰島素等成分的培養(yǎng)基。4.控制細胞密度:原代肝細胞的密度對其存活率也有很大影響。如果細胞密度過高,會導致細胞缺氧和營養(yǎng)不足,從而降低存活率。因此,需要控制細胞密度,使其保持在適當?shù)姆秶鷥?nèi)。5.添加細胞保護劑:添加細胞保護劑可以提高原代肝細胞的存活率。例如,可以添加谷胱甘肽、維生素E等抗氧化劑,以減少細胞氧化損傷。6.定期更換培養(yǎng)基:定期更換培養(yǎng)基可以防止細胞代謝產(chǎn)物積累和營養(yǎng)不足,從而提高原代肝細胞的存活率??傊?,提高原代肝細胞的存活率需要綜合考慮多種因素,包括分離方法、培養(yǎng)條件、培養(yǎng)基、細胞密度、細胞保護劑等。 汕頭雞原代肝細胞純化肝原代細胞執(zhí)行著許多重要的功能,如毒物的分解、尿素的合成、制造血漿中的的大多數(shù)血漿蛋白質(zhì)等。

原代肝細胞培養(yǎng)中去除endotoxin是十分重要的。原代肝細胞培養(yǎng)是一種常用的實驗方法,但在培養(yǎng)過程中,細胞可能會受到endotoxin的污染,這會影響實驗結(jié)果的準確性。 endotoxin是一種由細菌產(chǎn)生的有毒物質(zhì),可以引起炎癥反應(yīng)和細胞損傷。在原代肝細胞培養(yǎng)中,endotoxin可能來自于培養(yǎng)基、細胞培養(yǎng)器具或細胞本身。因此,需要采取一些措施來去除endotoxin。 一種常用的方法是使用endotoxin去除劑,例如聚陽離子樹脂(Polyclonal Cationic Resin,PCR)或聚乙烯醇(Polyvinyl Alcohol,PVA)。這些去除劑可以吸附endotoxin,從而減少其對細胞的影響。使用endotoxin去除劑的方法比較簡單,只需要將其加入培養(yǎng)基中,然后將細胞培養(yǎng)在其中即可。 可以使用endotoxin檢測試劑盒來檢測培養(yǎng)基中的endotoxin含量。如果檢測結(jié)果顯示endotoxin含量較高,可以考慮更換培養(yǎng)基或使用endotoxin去除劑。 除了使用去除劑和檢測試劑盒外,還可以采取一些預防措施來減少endotoxin的污染。例如,使用無菌技術(shù)操作、定期更換培養(yǎng)器具和培養(yǎng)基、避免過度攪拌和振蕩等。 去除endotoxin是原代肝細胞培養(yǎng)中必須注意的問題。采取適當?shù)拇胧┛梢詼p少endotoxin的污染,保證實驗結(jié)果的準確性。

原代肝細胞可以用于乙肝病毒的對照試驗。為探究不同類型肝細胞對乙型肝炎病毒(HBV)的影響,以及不同藥物和生物學處理對HBV的影響,可以選擇了人原代肝細胞(PHH)樹鼩原代肝細胞(PTH)、hNTCP穩(wěn)定表達豬肝細胞(PPH-hNTCP)和hNTCP穩(wěn)定表達liver cancer細胞系(Huh7D-hNTCP)作為研究對象。 采用HBV模型,將不同類型肝細胞融合HBV,并進行藥物處理和生物學處理。藥物處理包括小分子化合物和中藥提取物等,生物學處理包括過表達、敲除siRNA和shRNA等。通過對處理后的細胞進行評價,可以了解不同藥物和生物學處理對HBV的影響。 這種研究方法的意義在于探究不同類型肝細胞對HBV的影響,為研究HBV的機制提供重要的實驗數(shù)據(jù)。同時,本研究還可以為開發(fā)新型抗HBV藥物提供參考,為臨床克服乙型肝炎提供新的思路和方法。立沃生物原代肝細胞提供動物源肝細胞供體數(shù)定制服務(wù),滿足客戶在不同實驗用途和不同實驗場景下的需求。

貼壁培養(yǎng)的原代肝細胞是酶誘導研究的重要模型。這種模型可以通過倍數(shù)變化方法來評估藥物是否為酶的誘導劑。具體來說,研究人員可以使用已知的陽性和陰性對照藥物來校準體外系統(tǒng),然后將研究藥物與細胞共孵育,測定孵育后CYP酶的mRNA表達水平倍數(shù)變化,以評估藥物是否為酶的誘導劑。這種方法可以幫助研究人員更好地了解藥物相互作用的機制,從而更好地指導臨床用藥。 酶誘導是一種藥物相互作用的現(xiàn)象,指某些化合物能夠提高肝臟藥物代謝酶的活性,從而導致合用的藥物代謝速率加快,使得原藥的血藥濃度下降,進而使其療效降低或喪失。這種現(xiàn)象在臨床上非常常見,因為許多藥物都需要通過肝臟代謝酶來進行代謝,而酶誘導會影響這些代謝酶的活性,從而影響藥物的代謝。 酶誘導的機制是通過影響肝臟細胞內(nèi)的CYP酶的表達和活性來實現(xiàn)的。CYP酶是肝臟細胞內(nèi)重要的藥物代謝酶之一,它能夠代謝許多藥物和毒物,從而使它們被代謝出體外。當某些化合物進入體內(nèi)后,它們會與CYP酶結(jié)合并使它們的特異性表達,從而使得CYP酶能夠更快地代謝藥物和毒物,使其被代謝出體外。 原代肝細胞依舊是目前理想的體外模型,是藥物代謝研究的重要組成部分。立沃生物的原代肝細胞配套提供多種細胞培養(yǎng)技術(shù)支持,包括細胞培養(yǎng)技巧、細胞培養(yǎng)實驗設(shè)計等。湛江人原代肝細胞種類

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如何提升原代肝細胞的活率一直是個很大的挑戰(zhàn)。由于原代肝細胞的特殊性質(zhì),它們的活率和得率往往比一般細胞低,這給研究工作帶來了很大的挑戰(zhàn)。為了提高原代肝細胞的活率和得率,我們可以采取以下措施: 1.優(yōu)化細胞培養(yǎng)條件:原代肝細胞對培養(yǎng)條件非常敏感,因此我們需要針對不同的細胞類型和實驗目的,優(yōu)化培養(yǎng)條件,包括培養(yǎng)基配方、培養(yǎng)溫度、CO2濃度等。 2.選擇合適的細胞來源:原代肝細胞可以從不同的來源獲得,如人體肝臟組織、動物肝臟組織等,我們需要根據(jù)實驗需要選擇合適的細胞來源。 3. 優(yōu)化細胞分離方法:原代肝細胞的分離方法也會影響細胞的活率和得率。我們可以采用不同的分離方法,如機械分離、酶消化等,選擇適合的方法來分離細胞。 4. 使用適當?shù)募毎囵B(yǎng)基:不同的細胞類型需要不同的培養(yǎng)基,我們需要根據(jù)實驗需要選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)基。同時,我們還可以添加一些生長因子和細胞因子來促進細胞的生長和增殖。 5. 保持細胞的穩(wěn)定性:定期更換培養(yǎng)基、避免過度培養(yǎng)等。 提高原代肝細胞的活率和得率需要我們綜合考慮多個因素,包括細胞培養(yǎng)條件、細胞來源、細胞分離方法、培養(yǎng)基配方等。北京雞原代肝細胞分離