免疫熒光技術(shù)是依據(jù)抗原抗體反應(yīng)的基本原理來(lái)實(shí)施的,即先把已知的抗原或抗體標(biāo)記上熒光素,從而制作成熒光抗體,接著再使用這種熒光抗體(或抗原)當(dāng)作探針去檢測(cè)組織或細(xì)胞內(nèi)相對(duì)應(yīng)的抗原(或抗體)。在組織或細(xì)胞內(nèi)所形成的抗原抗體復(fù)合物上含有被標(biāo)記的熒光素,通過(guò)利用熒光顯微鏡來(lái)觀察標(biāo)本,熒光素會(huì)在外來(lái)激發(fā)光的照射下而發(fā)出明亮的熒光(呈現(xiàn)出黃綠色或橘紅色),如此便能夠清晰地看到熒光所在的組織細(xì)胞,從而準(zhǔn)確地確定抗原或抗體的性質(zhì)、準(zhǔn)確定位,并且還能夠借助定量技術(shù)來(lái)測(cè)定其含量。例如,在對(duì)某些復(fù)雜的生物樣本進(jìn)行分析時(shí),免疫熒光檢測(cè)可以利用其定量熒光信號(hào)的能力,準(zhǔn)確地獲取樣本中特定抗原或抗體的含量信息,為深入研究提供有力的數(shù)據(jù)支持;而其復(fù)用能力則使得可以在一次實(shí)驗(yàn)中同時(shí)檢測(cè)多種目標(biāo)蛋白質(zhì),大幅提高了研究效率;同時(shí),熒光染料良好的光穩(wěn)定性保證了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性,即使在長(zhǎng)時(shí)間的檢測(cè)過(guò)程中也能保持穩(wěn)定的熒光信號(hào)。免疫細(xì)胞研究產(chǎn)品適用于細(xì)胞膜微管研究。C-FOS免疫熒光
在病毒***的研究中,這兩種技術(shù)有助于深入了解病毒與宿主細(xì)胞的相互作用。例如,在研究流感病毒***時(shí),我們可以用一種顏色的熒光標(biāo)記流感病毒的**白(NP),以確定病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)的定位;用另一種顏色標(biāo)記宿主細(xì)胞的受體分子,如唾液酸受體,觀察病毒是如何識(shí)別并結(jié)合受體進(jìn)入細(xì)胞的;再用第三種顏色標(biāo)記宿主細(xì)胞內(nèi)與抗病毒免疫相關(guān)的蛋白,如干擾素誘導(dǎo)蛋白。這樣,通過(guò)多色免疫熒光,我們可以在一個(gè)視野下***地看到病毒入侵的整個(gè)過(guò)程,包括病毒進(jìn)入細(xì)胞的位點(diǎn)、在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制位置以及宿主細(xì)胞的免疫反應(yīng)啟動(dòng)情況。在細(xì)菌***方面,多重免疫熒光也發(fā)揮著重要作用。以結(jié)核桿菌***為例,我們可以用不同顏色的熒光分別標(biāo)記結(jié)核桿菌本身、被***的巨噬細(xì)胞內(nèi)的溶酶體以及與炎癥反應(yīng)相關(guān)的細(xì)胞因子。通過(guò)這種方式,能夠觀察到結(jié)核桿菌在巨噬細(xì)胞內(nèi)的存活狀態(tài),是被溶酶體包裹還是逃逸了溶酶體的殺傷,同時(shí)也能看到***過(guò)程中巨噬細(xì)胞周圍炎癥反應(yīng)的強(qiáng)度和范圍,這對(duì)于深入研究結(jié)核桿菌的致病機(jī)制以及開發(fā)新的***策略具有重要價(jià)值。IL-10免疫熒光染色專注免疫細(xì)胞研究,探索生命的神秘密碼。
熒光免疫法按照反應(yīng)體系以及定量方法的不同,還能夠進(jìn)一步細(xì)分為若干不同的種類。與放射免疫法相比較,熒光免疫法具有明顯的優(yōu)勢(shì),它不存在放射性污染的問(wèn)題,而且大多數(shù)情況下操作簡(jiǎn)便,更易于推廣應(yīng)用。在國(guó)外生產(chǎn)的用于救治藥物監(jiān)測(cè)(TDM)的試劑盒中,有相當(dāng)大的一部分就屬于這種類型,并且還有專門用于 TDM 熒光偏振免疫分析的自動(dòng)分析儀被生產(chǎn)出來(lái)。不過(guò),由于在一般熒光測(cè)定中存在著本底較高等相關(guān)問(wèn)題,這使得免疫熒光技術(shù)在用于定量測(cè)定時(shí)面臨著一定的困難。為了解決這些問(wèn)題,新發(fā)展出了幾種特殊的熒光免疫測(cè)定方法,它們?nèi)缤该庖邷y(cè)定和放射免疫分析一樣,在臨床檢驗(yàn)中得到了廣泛的應(yīng)用。例如,在一些需要快速檢測(cè)和高特異性的場(chǎng)景中,免疫熒光技術(shù)的強(qiáng)特異性和高敏感性發(fā)揮著關(guān)鍵作用;而其速度快的特點(diǎn)在緊急情況下或大規(guī)模篩查中具有重要意義。盡管存在一些缺點(diǎn),但通過(guò)不斷地技術(shù)改進(jìn)和創(chuàng)新,免疫熒光技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)等領(lǐng)域的應(yīng)用前景依然十分廣闊。
免疫組化在寄生蟲病的診斷和研究中展現(xiàn)出獨(dú)特的應(yīng)用價(jià)值。寄生蟲***人體后,會(huì)在體內(nèi)引起一系列復(fù)雜的病理變化,準(zhǔn)確診斷寄生蟲病對(duì)于有效的***至關(guān)重要。以瘧疾為例,雖然傳統(tǒng)的血液涂片檢查可以發(fā)現(xiàn)瘧原蟲,但免疫組化能夠更特異性地標(biāo)記瘧原蟲在人體組織中的抗原。在一些瘧疾的并發(fā)癥研究中,如腦型瘧疾,免疫組化可以確定瘧原蟲在腦組織中的分布情況,了解瘧原蟲與腦組織細(xì)胞的相互作用機(jī)制。這有助于深入研究腦型瘧疾的發(fā)病機(jī)制,為開發(fā)新的***方法提供依據(jù)。在血吸蟲病的診斷方面,免疫組化可以檢測(cè)血吸蟲蟲卵或成蟲在人體肝臟、腸道等組織中的抗原。通過(guò)檢測(cè)血吸蟲抗原在組織中的分布情況,可以準(zhǔn)確判斷血吸蟲***的程度和范圍,為血吸蟲病的***提供更準(zhǔn)確的信息。提供多種熒光相關(guān)光譜標(biāo)記的免疫熒光試劑。
在腎移植的研究中,多重免疫組化是評(píng)估移植腎狀況的有力工具??梢詷?biāo)記供體和受體的組織相容性抗原(HLA),以監(jiān)測(cè)是否存在免疫排斥反應(yīng)。同時(shí)標(biāo)記腎組織中的免疫細(xì)胞,如CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等,觀察這些免疫細(xì)胞在移植腎中的浸潤(rùn)情況。如果發(fā)現(xiàn)CD8+T細(xì)胞大量浸潤(rùn),可能提示細(xì)胞性免疫排斥反應(yīng)正在發(fā)生。此外,還可以標(biāo)記與腎組織修復(fù)相關(guān)的分子,如上皮生長(zhǎng)因子(EGF),了解移植腎在應(yīng)對(duì)排斥反應(yīng)和自我修復(fù)過(guò)程中的機(jī)制。在腎臟纖維化的研究方面,多重免疫組化能夠標(biāo)記腎間質(zhì)中的成纖維細(xì)胞標(biāo)志物,如α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA),同時(shí)標(biāo)記細(xì)胞外基質(zhì)成分,如膠原蛋白I和膠原蛋白III。通過(guò)觀察這些標(biāo)志物在腎臟纖維化過(guò)程中的變化,包括成纖維細(xì)胞的活化、增殖以及細(xì)胞外基質(zhì)的合成和沉積情況,可以深入研究腎臟纖維化的發(fā)病機(jī)制,為開發(fā)抗腎臟纖維化的藥物提供靶點(diǎn)。提供多種細(xì)胞染色抗體孵育時(shí)間的免疫熒光染色。IL-10免疫熒光染色
我們的免疫熒光試劑適用于光遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)。C-FOS免疫熒光
免疫組化在皮膚疾病的診斷領(lǐng)域成為了一種新的有力工具。皮膚是人體比較大的***,皮膚疾病的種類繁多,病因復(fù)雜,從***性皮膚病到自身免疫性皮膚病等,免疫組化都能發(fā)揮重要作用。在自身免疫性皮膚病如紅斑狼瘡的診斷中,免疫組化可以檢測(cè)皮膚組織中免疫復(fù)合物的沉積情況,以及自身抗體與皮膚細(xì)胞的結(jié)合情況。例如,通過(guò)檢測(cè)抗核抗體(ANA)在皮膚細(xì)胞中的定位,可以輔助診斷紅斑狼瘡,并判斷疾病的活動(dòng)程度。在皮膚**的診斷方面,免疫組化可以區(qū)分良性和惡性皮膚**。例如,基底細(xì)胞*和鱗狀細(xì)胞*是常見的皮膚惡性**,免疫組化可以檢測(cè)細(xì)胞角蛋白等標(biāo)志物來(lái)確定**的類型。同時(shí),對(duì)于一些罕見的皮膚**,免疫組化也能通過(guò)檢測(cè)特定的標(biāo)志物來(lái)明確診斷,為***提供依據(jù)。C-FOS免疫熒光