外泌體鑒定透射電鏡觀察能夠確認(rèn)外泌體的形態(tài)學(xué)特征,但無法體現(xiàn)樣本中所有外泌體顆粒的粒徑分布情況及整體濃度;流式細(xì)胞儀可測定的粒徑大小為150nm以上,并不適合檢測游離的外泌體顆粒。英瀚斯生物采用基于馬爾文Nanosight平臺的納米顆粒追蹤分析 (Nanoparticle Tracking Analysis, NTA) 技術(shù),快速、精細(xì)地分析外泌體粒徑分布濃度,為外泌體存在提供有力證據(jù)。目前外泌體的提取方法主要可歸納為以下六種:一是超速離心法;二是過濾離心;三是密度梯度離心法;四是免疫磁珠法;五是PS親和法;六是色譜法。外泌體檢測服務(wù)|外泌體檢測服務(wù)|科研課題外包|實驗外包服務(wù)。河南推薦的外泌體電鏡
外泌體研究界比較家喻戶曉的就是大牛Thery C了,想當(dāng)年一篇外泌體超速離心提取方法的文章已經(jīng)是成為了眾多外泌體研究者的“圣經(jīng)”了(Isolation and Characterization of Exosomes from Cell Culture Supernatants and Biological Fluids,2006)。據(jù)不完全統(tǒng)計,大牛Thery C實驗室已發(fā)表外泌體相關(guān)paper四五十篇,其中大多數(shù)為綜述性文章,實驗性文章有約12篇。英瀚斯生物,多年從事科研課題實驗服務(wù)工作,經(jīng)常設(shè)計外泌體相關(guān)實驗檢測項目,各類外泌體測序、檢測、電鏡等河南推薦的外泌體電鏡科研實驗的外泌體檢測服務(wù)介紹。
外泌體的產(chǎn)生過程為:細(xì)胞膜內(nèi)陷,形成內(nèi)體(endosome),再形成多泡體(multivesicularbodies,MVB),比較后分泌到胞外成為外泌體。外泌體中攜帶有母細(xì)胞的多種蛋白質(zhì)、脂類、DNA和RNA等重要信息。外泌體比較早見于1981年,EGTrams等在體外培養(yǎng)的綿羊紅細(xì)胞上清液中發(fā)現(xiàn)了有膜結(jié)構(gòu)的小囊泡,并命名為exosome。對于外泌體的作用,當(dāng)時推測為細(xì)胞排泄廢物的一種方式。1996年GRaposo等發(fā)現(xiàn)類似于B淋巴細(xì)胞的免疫細(xì)胞也會分泌抗原呈遞外泌體(antigenpresentingvesicle),所分泌的外泌體可以直接刺激效應(yīng)CD4+細(xì)胞的抗**反應(yīng)。2007年HValadi等進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)細(xì)胞之間可以通過外泌體中RNA交換遺傳物質(zhì)。隨著有關(guān)外泌體研究越來越多,研究者發(fā)現(xiàn)它普遍參與了機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原呈遞、細(xì)胞分化、**生長于侵襲等各種生物過程中。
外泌體的提取方法有多種:包括傳統(tǒng)的差速離心、密度梯度離心,以及后來發(fā)展的超濾法、聚合物沉淀法、免疫分離、隔離篩選法、體積排阻色譜法等。這些方法各有利弊。外泌體經(jīng)細(xì)胞分泌后存在于體液或者血液中,故檢測外泌體的樣本一般為血液(全血、血漿)、體液(尿液、唾液、腦脊液、羊水、唾液等)、細(xì)胞上清液。提取所需要樣本量血清:樣本量>5ml(全血10ml)。血漿:樣本量>5ml(全血10ml)。體液:樣本量>20ml。細(xì)胞培養(yǎng)上清液:樣本量>20ml。外泌體檢測服務(wù),動物模型 - 南京英瀚斯生物提供小鼠模型.**模型.外泌體檢測服務(wù)。
外泌體(exosome)*適用于通過特殊手段拿到的由胞內(nèi)體來源的釋放到細(xì)胞外的膜泡結(jié)構(gòu)。建議對細(xì)胞外囊泡進(jìn)行細(xì)分時使用物理上的界定如小細(xì)胞外囊泡(sEV)和中/大細(xì)胞外囊泡(m/lEV),或者高密度囊泡(high density)和低密度囊泡(low density)等,同時也建議使用表面蛋白來界定如CD63+CD81+細(xì)胞外囊泡等。當(dāng)使用exosomes等稱呼時應(yīng)當(dāng)進(jìn)行嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶嶒炞C明使用的“exosomes樣品”是由胞內(nèi)體途徑產(chǎn)生的。南京英瀚斯生物專業(yè)外泌體檢測相關(guān)儀器齊全。南京外泌體檢測服務(wù),優(yōu)先南京英瀚斯。安徽哪家做外泌體提取
外泌體提取,超離法是比較常用的外泌體純化手段。河南推薦的外泌體電鏡
外泌體在**、神經(jīng)退行性疾病、肝臟和腎臟疾病以及多種心肺疾病的預(yù)后和診斷中發(fā)揮著重要作用,比較近的研究表明,外泌體也是一種新型的***試劑。來自間充質(zhì)干細(xì)胞的外泌體已在各種疾病模型中進(jìn)行了測試,如呼吸系統(tǒng)、心血管、神經(jīng)系統(tǒng)、肌肉骨骼、肝臟、胃腸道、皮膚和腎臟疾病。MSC來源的外泌體通過抑制促炎細(xì)胞因子的表達(dá)來發(fā)揮***作用,并通過增強(qiáng)細(xì)胞外基質(zhì)重塑來促進(jìn)組織再生,同樣,由誘導(dǎo)的多能干細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞和心臟祖細(xì)胞分泌的外泌體具有類似于MCS來源的外泌體的***效果。河南推薦的外泌體電鏡