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甲苯胺藍(lán)染色效果

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2025-05-17

TTC(2,3,5-三苯基四氮唑氯化物)染色是一種常用的組織學(xué)染色方法,主要用于檢測(cè)組織中的活性心肌細(xì)胞和腦組織的缺血性損傷。TTC染色在實(shí)驗(yàn)研究中特別有用,尤其是在評(píng)估心肌梗死和腦卒中模型中的缺血區(qū)域。TTC染色的基本原理TTC是一種無(wú)色的水溶性化合物,在活細(xì)胞中通過(guò)線粒體內(nèi)的脫氫酶的作用被還原成紅色的不溶性產(chǎn)物——甲臜(formazan)。這種紅色產(chǎn)物只在有代謝活性的細(xì)胞中形成,而在壞死或缺血的細(xì)胞中則不會(huì)被還原,因此這些區(qū)域保持無(wú)色或白色。應(yīng)用領(lǐng)域1. 心肌梗死模型:?在心肌梗死的研究中,TTC染色用于區(qū)分正常的心肌組織和梗死區(qū)域。正常的心肌組織會(huì)被染成紅色,而梗死區(qū)域則呈現(xiàn)白色。?通過(guò)測(cè)量梗死區(qū)域與總心肌面積的比例,可以定量分析心肌梗死的程度。Picrosirius紅染色用于顯示心臟和腎臟中的膠原纖維。甲苯胺藍(lán)染色效果

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?病理染色流程之組織脫水:樣品經(jīng)過(guò)固定后,將通過(guò)一系列的酒精梯度逐步脫水,然后用二甲苯透明化,***浸入石蠟中。這一系列步驟旨在去除組織中的水分,使其變得堅(jiān)硬并易于切片。?石蠟包埋區(qū):脫水后的組織被包裹在石蠟中,形成一個(gè)堅(jiān)硬的塊狀物,便于后續(xù)的切片操作。?切片制作區(qū):使用石蠟切片機(jī)(如Leica HistoCore MULTICUT)將包埋好的組織切成薄片(通常為4-5微米厚),以便于進(jìn)一步的染色和觀察。

英瀚斯專(zhuān)業(yè)病理實(shí)驗(yàn)平臺(tái),從取材固定包埋脫水切片染色拍照分析,一站式完成。 南京六胺銀染色哪家好常規(guī)染色包括:HE, Masson、免疫組化、免疫熒光染色等。

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病理實(shí)驗(yàn)外包常見(jiàn)染色介紹:天狼星紅染色(Sirius Red Staining)天狼星紅染色是一種廣泛應(yīng)用于組織學(xué)研究中的染色方法,特別適用于顯示膠原纖維的分布和結(jié)構(gòu)。該染色技術(shù)利用了天狼星紅染料對(duì)膠原纖維的高度親和力,在偏振光下可以觀察到不同類(lèi)型的膠原纖維呈現(xiàn)出不同的顏色。染色原理:?染料特性:天狼星紅是一種陽(yáng)離子染料,它能夠與膠原纖維中的負(fù)電荷基團(tuán)結(jié)合,從而產(chǎn)生強(qiáng)烈的紅色染色效果。?偏振光下的表現(xiàn):在偏振光顯微鏡下,I型膠原纖維呈現(xiàn)亮黃色或橙紅色,而III型膠原纖維則呈現(xiàn)綠色或黃色。這種顏色差異使得天狼星紅染色成為區(qū)分不同類(lèi)型膠原纖維的有效手段。?其他成分:除了膠原纖維外,細(xì)胞核通常被染成藍(lán)黑色或淡藍(lán)色,而肌肉和其他非膠原組織則保持無(wú)色或淡粉色。應(yīng)用范圍:?心肌梗死模型:天狼星紅染色可以用于檢測(cè)心肌梗死后的心臟組織中膠原纖維的沉積情況,評(píng)估心肌修復(fù)和纖維化的程度。?肺纖維化:通過(guò)天狼星紅染色,研究人員可以定量分析肺組織中的膠原纖維含量,評(píng)估肺纖維化的嚴(yán)重程度。?肝纖維化:在肝臟疾病的研究中,天狼星紅染色常用來(lái)顯示肝組織中的膠原纖維沉積,幫助診斷和評(píng)估肝纖維化的進(jìn)展。

相較于IHC染色是針對(duì)「蛋白質(zhì)」抗原,化學(xué)染色法則是針對(duì)組織的化學(xué)及物理特性進(jìn)行染色。??免疫組織化學(xué)染色(IHC):針對(duì)要觀察的蛋白質(zhì)「抗原」,選擇具專(zhuān)一性的「抗體」來(lái)進(jìn)行標(biāo)定。具有高度專(zhuān)一性的特點(diǎn),但會(huì)受檢體固定及保存品質(zhì)極大的影響。??原位雜合試驗(yàn)(ISH):使用核酸探針(probe)來(lái)標(biāo)定組織中的特定核酸片段。相較于IHC用于分析蛋白質(zhì),ISH則是用以分析核酸在組織中的分布。在缺乏專(zhuān)一性抗體可以使用的情形下,ISH可藉由偵測(cè)相關(guān)核酸片段,達(dá)到直接或間接檢測(cè)特定病原或蛋白質(zhì)前趨物的作用。病理染色是診斷模型是否造模成功的重要工具。

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TUNEL染色能夠特異性地標(biāo)記DNA斷裂的末端,因此具有很高的特異性。?靈敏度高:即使在早期凋亡階段,TUNEL染色也能檢測(cè)到少量的DNA斷裂。?適用范圍廣:適用于多種類(lèi)型的組織和細(xì)胞樣本。注意事項(xiàng)?對(duì)照設(shè)置:為了確保結(jié)果的準(zhǔn)確性,應(yīng)設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照(已知的凋亡細(xì)胞)和陰性對(duì)照(無(wú)TdT酶的對(duì)照組)。?背景信號(hào):有時(shí)會(huì)出現(xiàn)非特異性的背景信號(hào),需要注意優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件以減少背景噪聲。?固定和通透性:正確的固定和通透處理對(duì)于獲得良好的染色結(jié)果至關(guān)重要??偨Y(jié)TUNEL染色是一種強(qiáng)大的工具,用于檢測(cè)和定位細(xì)胞凋亡過(guò)程中的DNA斷裂。它在細(xì)胞生物學(xué)、病理學(xué)和藥物研發(fā)等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用。通過(guò)TUNEL染色,研究人員可以獲得關(guān)于細(xì)胞凋亡的詳細(xì)信息,從而更好地理解疾病的發(fā)病機(jī)制和藥物的作用效果。內(nèi)容由AI生成Alcian藍(lán)染色用于檢測(cè)酸性粘液物質(zhì)。南京鍍銀染色結(jié)果分析

染色切片是病理層面診斷模型的重要工具。甲苯胺藍(lán)染色效果

TUNEL染色的染色步驟1. 樣品準(zhǔn)備:?將組織切片或細(xì)胞固定在載玻片上,通常使用4%多聚甲醛或其他固定劑。?進(jìn)行蛋白酶K處理,以增加細(xì)胞膜的通透性,使TdT能夠進(jìn)入細(xì)胞并接觸DNA。2. TUNEL反應(yīng):?準(zhǔn)備TUNEL反應(yīng)混合液,包括TdT酶和標(biāo)記的dUTP(如熒光素或生物素標(biāo)記的dUTP)。?將反應(yīng)混合液滴加到樣品上,在適當(dāng)?shù)臏囟认路跤欢〞r(shí)間(通常為1小時(shí)左右)。3. 洗滌:?用PBS緩沖液或其他適當(dāng)?shù)南礈煲呵逑礃悠罚コ唇Y(jié)合的dUTP。4. 信號(hào)檢測(cè):?如果使用的是熒光素標(biāo)記的dUTP,可以直接在熒光顯微鏡下觀察。?如果使用的是生物素標(biāo)記的dUTP,則需要進(jìn)一步與鏈霉親和素-熒光素復(fù)合物或其他顯色試劑結(jié)合,然后在顯微鏡下觀察。甲苯胺藍(lán)染色效果