南京正揚(yáng)生物科技有限公司自主研發(fā)生產(chǎn)的RCL基因拷貝數(shù)檢測(cè)試劑盒（RT-PCR熒光探針?lè)ǎ?、RCR基因拷貝數(shù)檢測(cè)試劑盒（RT-PCR熒光探針?lè)ǎ?、rcAAV-5/N檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ┘冗m用于基于細(xì)胞培養(yǎng)法對(duì)復(fù)制型病毒的qPCR法的檢測(cè)，也適用于對(duì)無(wú)細(xì)胞基質(zhì)的病毒收獲液（上清液）等樣品的復(fù)制型病毒檢測(cè)。試劑盒進(jìn)行了多面的性能驗(yàn)證，靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好、符合法規(guī)要求。南京正揚(yáng)生物科技有限公司自主研發(fā)生產(chǎn)的RCL基因拷貝數(shù)檢測(cè)試劑盒（RT-PCR熒光探針?lè)ǎ?、RCR基因拷貝數(shù)檢測(cè)試劑盒（RT-PCR熒光探針?lè)ǎcAAV-5/N檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ┘冗m用于基于細(xì)胞培養(yǎng)法對(duì)復(fù)制型病毒的qPCR法的檢測(cè)，也適用于對(duì)無(wú)細(xì)胞基質(zhì)的病毒收獲液（上清液）等樣品的復(fù)制型病毒檢測(cè)。試劑盒進(jìn)行了多面的性能驗(yàn)證，靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好、符合法規(guī)要求。復(fù)制型病毒檢測(cè)試劑盒。上海RCL病毒檢測(cè)服務(wù)

qPCR法RCL/RCR病毒檢測(cè)：目前許多CAR-T企業(yè)采用Q-PCR方法直接測(cè)定CAR-T終產(chǎn)品中的VSV-G序列或psi-gag序列，因考慮到CAR-T細(xì)胞種產(chǎn)品一般需要新鮮輸注的特殊情況，基于細(xì)胞培養(yǎng)法的RCL/RCR檢測(cè)方法周期較長(zhǎng)，建議在細(xì)胞產(chǎn)品制備過(guò)程中進(jìn)行多面控制(如對(duì)慢病毒載體及生產(chǎn)終末細(xì)胞采用基于細(xì)胞培養(yǎng)方法測(cè)定RCL/RCR，以確保生產(chǎn)工藝過(guò)程中不存在RCL的風(fēng)險(xiǎn))，細(xì)胞終產(chǎn)品階段可采用qPCR檢測(cè)法快速放行。qPCR法RCL/RCR病毒檢測(cè)：目前許多CAR-T企業(yè)采用Q-PCR方法直接測(cè)定CAR-T終產(chǎn)品中的VSV-G序列或psi-gag序列，因考慮到CAR-T細(xì)胞種產(chǎn)品一般需要新鮮輸注的特殊情況，基于細(xì)胞培養(yǎng)法的RCL/RCR檢測(cè)方法周期較長(zhǎng)，建議在細(xì)胞產(chǎn)品制備過(guò)程中進(jìn)行多面控制(如對(duì)慢病毒載體及生產(chǎn)終末細(xì)胞采用基于細(xì)胞培養(yǎng)方法測(cè)定RCL/RCR，以確保生產(chǎn)工藝過(guò)程中不存在RCL的風(fēng)險(xiǎn))，細(xì)胞終產(chǎn)品階段可采用qPCR檢測(cè)法快速放行。。杭州qPCR法病毒檢測(cè)服務(wù)如何用qPCR法做復(fù)制型慢性毒檢測(cè)？

用qPCR法進(jìn)行rcAAV復(fù)制型腺相關(guān)病毒檢測(cè)時(shí)，出現(xiàn)擴(kuò)增曲線異常的可能原因是什么？①如出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增現(xiàn)象：反應(yīng)管未蓋緊或密閉性差引起溶液蒸發(fā)而造成。上機(jī)前確保管蓋密閉，反應(yīng)結(jié)束后查看八聯(lián)管或96孔板各管液面是否一致。與設(shè)備硬件相關(guān)，需咨詢硬件供應(yīng)商解決。②如出現(xiàn)擴(kuò)增曲線不平滑現(xiàn)象：可能與ROX加入量不足相關(guān)，個(gè)別設(shè)備有ROX校正功能，不同型號(hào)設(shè)備對(duì)ROX的需求量會(huì)有差異，需設(shè)置實(shí)驗(yàn)摸索合適的ROX加入量。歡迎了解正揚(yáng)

用qPCR進(jìn)行rcAAV復(fù)制型腺相關(guān)病毒檢測(cè)時(shí)，哪些因素會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性和方法靈敏度存在較大影響？參考品DNA量值溯源及質(zhì)量保證：參考品DNA的量值準(zhǔn)確與否，直接關(guān)系到樣品檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，因此需制定完善的參考品量值溯源程序，確保結(jié)果準(zhǔn)確可靠。參考品DNA的質(zhì)量要求可從條帶大小、完整性、純度、濃度等方面做多面評(píng)估，細(xì)胞來(lái)源的參考品應(yīng)考察支原體污染，質(zhì)粒參考品應(yīng)考察質(zhì)粒宿主E.coli基因組DNA殘留情況等，盡量排除干擾確保結(jié)果準(zhǔn)確可靠。為什么要做復(fù)制型病毒檢測(cè)？

基于細(xì)胞培養(yǎng)法的rcAAV復(fù)制型腺相關(guān)病毒檢測(cè)方法，該方法的原理是通過(guò)不斷的細(xì)胞傳代使得rcAAV實(shí)現(xiàn)擴(kuò)增，之后再利用qPCR或Southern-blot的方法對(duì)rcAAV進(jìn)行檢測(cè)，能保證檢測(cè)到的rcAAV都具有復(fù)制能力，是目前常用的檢測(cè)方法。然而，其檢測(cè)敏感性依賴于rcAAV對(duì)靶細(xì)胞的感   染效率，相較于AAV2型來(lái)說(shuō)許多其他AAV血清型（1、3、5、6、7）在培養(yǎng)過(guò)程中不能有效地感   染靶細(xì)胞（例如HEK293/293T細(xì)胞），導(dǎo)致檢測(cè)靈敏度降低，因此其檢測(cè)值有可能會(huì)低于實(shí)際值。復(fù)制型逆轉(zhuǎn)錄病毒檢測(cè)方法有哪些？杭州RT-PCR法病毒檢測(cè)常見(jiàn)問(wèn)題

重組腺相關(guān)病毒檢測(cè)要求有哪些？上海RCL病毒檢測(cè)服務(wù)

病毒作為基因載體已普遍用于基因和細(xì)胞醫(yī)治產(chǎn)品。目前常見(jiàn)的病毒載體包括慢病毒（Lentiviral）、逆轉(zhuǎn)錄病毒（Retrovirus）、腺病毒（Adenovirus）、腺相關(guān)病毒（AAV）等。在生產(chǎn)過(guò)程中，如果被有復(fù)制能力的病毒污染，或載體發(fā)生重組，病毒載體中可能會(huì)混雜有復(fù)制型病毒。復(fù)制型慢病毒/逆轉(zhuǎn)錄病毒（RCL/RCR）可將病毒基因組整合到細(xì)胞基因組中，存在激   活原ai基因、破壞抑ai基因造成二次中瘤的風(fēng)險(xiǎn)；同時(shí)因其具有復(fù)制性，且用水泡性口炎病毒糖蛋白（VSV-G）替代了env編碼的包膜糖蛋白，提高了病毒的嗜性范圍，增加RCR/RCL帶來(lái)的潛在風(fēng)險(xiǎn)；而如果出現(xiàn)復(fù)制型腺相關(guān)病毒（rcAAV），其則會(huì)在被感   染的細(xì)胞中表達(dá)cap或rep基因，容易導(dǎo)致意外的免疫反應(yīng)。因此，各國(guó)法規(guī)對(duì)復(fù)制性   病毒檢測(cè)都提出了明確要求。上海RCL病毒檢測(cè)服務(wù)