美國藥典USP40〈1223〉對NAT法支原體檢測產(chǎn)品有關(guān)性能驗證的要求，包括專屬性、檢測限（LOD）、耐用性、重現(xiàn)性。其中對于耐用性、重現(xiàn)性的定義如下：耐用性：一種方法不受方法參數(shù)(如試劑體積、孵育時間或環(huán)境溫度)微小但有意變化影響的能力，該方法在正常使用過程中可表明其可靠性。對耐用性的衡量不是對藥典方法和替代方法的比較；相反，它是備用方法驗證的必要組成部分，以便用戶了解該方法的操作參數(shù)的限制。重現(xiàn)性：在不同的典型測試條件下，如不同的分析儀(例如，三個)、儀器和試劑批次(演示方法可以遵循儀器或材料供應(yīng)商的建議，也可以完全基于測試方法制造商提供的數(shù)據(jù)),對相同樣品進(jìn)行分析得到的測試結(jié)果的精確程度。如何選擇正確的方法進(jìn)行細(xì)胞的支原體檢測？上?？谇恢гw檢測

常用的支原體檢測方法有傳統(tǒng)的分離培養(yǎng)法、指示細(xì)胞培養(yǎng)法（DNA染色法）、ELISA法、PCR法等。指示細(xì)胞培養(yǎng)法（DNA染色法）則靈敏度比較低，因背景熒光的存在，細(xì)胞輕度支原體污染不易檢出；細(xì)胞裂解死亡產(chǎn)生碎片也會被熒光染料染色被誤認(rèn)為是支原體染色所致造成假陽性；另外，熒光染色法一般要求培養(yǎng)無污染的指示細(xì)胞作為對照，增加了檢測的工作量。目前，PCR法為主流的支原體檢測手段，PCR法比傳統(tǒng)分離培養(yǎng)法檢測時間大縮短，且靈敏度高。南京豬鼻支原體檢測操作流程為什么要做支原體檢測？

日本藥典JPXVⅢ〈G3-14-170〉對NAT法支原體檢測產(chǎn)品有關(guān)性能驗證的要求，包括檢測限（LOD）、專屬性、耐用性、可比性。其中對于可比性的描述及要求如下：可比性研究主要包括核酸擴(kuò)增法與方法A和/或方法B的檢測限的對比。此外，專屬性(多種的支原體檢測，假定的假陽性結(jié)果)也應(yīng)該在對比中。檢測限的可接受標(biāo)準(zhǔn)如下：如果用于取代方法A(培養(yǎng)法),核酸擴(kuò)增系統(tǒng)應(yīng)能檢測到10CFU/ml。如果用于取代方法B(指示細(xì)胞培養(yǎng)法),核酸擴(kuò)增系統(tǒng)應(yīng)能檢測到100CFU/ml。針對這兩種情況，都應(yīng)使用合適的標(biāo)準(zhǔn)品以校準(zhǔn)CFU數(shù)，以確定能達(dá)到這些標(biāo)準(zhǔn)。

目前實驗室常用的支原體檢測方法有培養(yǎng)法、熒光指示細(xì)胞法、PCR法、掃描電子顯微鏡法，這些方法各有優(yōu)缺點。PCR法檢測支原體的方法蕞為快速、靈敏、取樣量少，既可做細(xì)胞本身，也可做細(xì)胞上清的檢測，同時可以檢測多種支原體的污染，是目前常用的檢測手段。PCR法是20世紀(jì)80年代中期建立起來的一種體外DNA擴(kuò)增實驗，其基本原理是酶促DNA合成反應(yīng)，即在DNA模板、引物和脫氧核糖核酸存在下，經(jīng)DNA聚合酶的作用，使DNA鏈擴(kuò)增延伸。該實驗具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、檢測快速的特點。歐洲藥典對支原體檢測的要求有哪些？

qPCR法支原體檢測程序中，陰性對照（NCS）和空白對照（BLK）的區(qū)別：陰性對照（NCS）：為樣品稀釋液經(jīng)核酸提取純化后所得，在提取純化前同待測樣品一樣需加入IC，NCS用于監(jiān)測提取環(huán)節(jié)是否存在紕漏，比如：操作問題、試劑性能異常、提取環(huán)節(jié)出現(xiàn)污染等情況；空白對照（BLK）：在PCR檢測環(huán)節(jié)加入的對照品，BLK為純水，不含IC/支原體核酸；BLK用于監(jiān)測檢測環(huán)節(jié)是否出現(xiàn)污染，如：檢測試劑盒污染、試劑配制間的環(huán)境污染等；南京正揚(yáng)生物科技有限公司自主研發(fā)生產(chǎn)的支原體檢測試劑盒利用Taqman熒光探針原理，定性檢測樣品中是否有支原體污染。本試劑盒涵蓋100多種支原體DNA序列，檢測快速，專一性強(qiáng)，靈敏度高，性能可靠，且能提供國際第三方檢測機(jī)構(gòu)出具的性能驗證報告，符合中、日、美國家的藥典要求。本公司還提供多樣化提取試劑盒，支持手工、自動化提取，自動化提取試劑盒又包括預(yù)分裝和非預(yù)分裝規(guī)格，客戶可根據(jù)實際情況進(jìn)行訂購。培養(yǎng)細(xì)胞支原體檢測。杭州PCR法支原體檢測優(yōu)點

支原體檢測的好處有哪些？上?？谇恢гw檢測

南京正揚(yáng)生物自主研發(fā)生產(chǎn)的支原體檢測試劑盒(熒光探針法)是基于NAT(nucleicacidamplificationtechniques)的一種快速定性檢測生產(chǎn)原料、細(xì)胞庫、病毒種子、病毒或細(xì)胞收獲液、治    療用細(xì)胞中潛在支原體污染的產(chǎn)品。該試劑盒采用多重PCR的方法，使用2種熒光探針，F(xiàn)AM和VIC，分別檢測目標(biāo)序列和內(nèi)參。可覆蓋100多種支原體DNA序列；并且嚴(yán)格按照EP2.6.7進(jìn)行專屬性、檢測限、耐用性驗證，檢測限滿足≤10CFU/mL的要求，具備靈敏度高、特異性好、安全性好等特點。上?？谇恢гw檢測