探針DNA克隆的篩選也可采用血清學(xué)方法，所不同的是所建DNA文庫(kù)為可表達(dá)性，克隆菌落或噬斑經(jīng)裂解后釋放出表達(dá)抗原，然后用來(lái)源細(xì)菌的多克隆抗血清篩選陽(yáng)性克隆，所得到多個(gè)陽(yáng)性克隆再經(jīng)其它細(xì)菌的抗血清篩選，***只與本細(xì)菌抗血清反應(yīng)的表達(dá)克隆即含有此細(xì)菌的特異性基因片段，它所編碼的蛋白是該菌種所特有的。用這種表達(dá)文庫(kù)篩選得到的顯然只是特定基因探針。對(duì)于基因探針的克隆尚有更快捷的途徑。這也是許多重要蛋白質(zhì)的編碼基因的克隆方法。該方法的第一步是分離純化蛋白質(zhì)，然后測(cè)定該蛋白的氨基或羥基末端的部分氨基酸序列，然后根據(jù)這一序列合成一套寡核苷酸探針。對(duì)于任意一個(gè)給定的入射角θ有一個(gè)確定的波長(zhǎng)λ滿足衍射條件。嘉定區(qū)質(zhì)量探針按需定制

早期采用的RNA探針是細(xì)胞mRNA探針和病毒RNA探針，這些RNA是在細(xì)胞基因轉(zhuǎn)錄或病毒復(fù)制過(guò)程中得到標(biāo)記的，標(biāo)記效率往往不高，且受到多種因素的制約。這類RNA探針主要用于研究目的，而不是用于檢測(cè)。例如，在篩選逆轉(zhuǎn)錄病毒人類免疫缺陷病毒（HIV）的基因組DNA克隆時(shí)，因無(wú)DNA探針可利用，就利用HIV的全套標(biāo)記mRNA作為探針，成功地篩選到多株HIV基因組DNA克隆。又如進(jìn)行中的轉(zhuǎn)錄分析（nuclearrunontranscrip－tionassay）時(shí)，在體外將細(xì)胞核分離出來(lái)，然后在α-32P-ATP的存在下進(jìn)行轉(zhuǎn)錄，所合成mR－NA均摻入同位素而得到標(biāo)記，此混合mRNA與固定于硝酸纖維素濾膜上的某一特定的基因的DNA進(jìn)行雜交，便可反映出該基因的轉(zhuǎn)錄狀態(tài)，這是一種反向探針實(shí)驗(yàn)技術(shù)。嘉定區(qū)質(zhì)量探針按需定制能兼作透射電鏡、能進(jìn)行電子衍射、能作電子熒光觀察等。

為了確定探針是否與相應(yīng)的基因組DNA雜交，有必要對(duì)探針加以標(biāo)記，以便在結(jié)合部位獲得可識(shí)別的信號(hào),通常采用放射性同位素32P標(biāo)記探針的某種核苷酸α磷酸基。但近年來(lái)已發(fā)展了一些用非同位素如生物素-親合素系統(tǒng)、地高辛配體等作為標(biāo)記物的方法。非同位素標(biāo)記的優(yōu)點(diǎn)是保存時(shí)間較長(zhǎng),而且避免了同位素的污染。**常用的探針標(biāo)記法是缺口平移法(nick translation)。首先用適當(dāng)濃度的DNA酶Ⅰ（DNAseⅠ）在探針DNA雙鏈上造成缺口，然后再借助于DNA聚合酶Ⅰ（DNa poly merasⅠ）的5’→3’的外切酶活性，切去帶有5’磷酸的核苷酸；同時(shí)又利用該酶的5’→3’聚酶活性，使32P標(biāo)記的互補(bǔ)核苷酸補(bǔ)入缺口，DNA聚合酶Ⅰ的這兩種活性的交替作用，使缺口不斷向3’的方向移動(dòng)，同時(shí)DNA鏈上的核苷酸不斷為32P標(biāo)記的核苷酸所取代。

2）X射線能譜分析法。無(wú)須分析晶體，而直接將探測(cè)器接收的訊號(hào)加以放大，進(jìn)行脈沖幅度分析，通過(guò)選擇不同的脈沖幅度來(lái)確定入射x射線的能量，從而區(qū)分不同的特征X射線。計(jì)算時(shí)應(yīng)用布拉格方程：nλ=2dsinθ。 [2]1、能進(jìn)行微區(qū)分析?？煞治鰯?shù)個(gè)μm3內(nèi)元素的成分。2、能進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)分析。無(wú)需把分析對(duì)象從樣品中取出，可直接對(duì)大塊試樣中的微小區(qū)域進(jìn)行分析。把電子顯微鏡和電子探針結(jié)合，可把在顯微鏡下觀察到的顯微組織和元素成分聯(lián)系起來(lái)。3、分析范圍廣。Z>4其中，波譜：Be~U，能譜：Na~U。通過(guò)鑒別其特征波長(zhǎng)或特征能量就可以確定所分析的元素。

血凝素與生物素有非常高的親和性，當(dāng)血凝素標(biāo)記上過(guò)氧化物酶或堿性磷酸酶，經(jīng)雜交反應(yīng)**終形成探針-生物素-血凝素酶復(fù)合物（ABC法），酶催化底物顯色，觀察結(jié)果。ABC法底物顯色生成不溶物，以便觀測(cè)結(jié)果。酶標(biāo)記法復(fù)雜、重復(fù)性差，成本高，但便于運(yùn)輸、保存，靈敏度與放射物標(biāo)記法相當(dāng)。探針標(biāo)記方法①缺口平移標(biāo)記法。利用的是DNA聚合酶I能修復(fù)DNA鏈的功能。該法先由DNaseI在DNA雙鏈上隨機(jī)切出切口，然后DNA聚合酶I沿缺口水解5´端核苷酸，同時(shí)在3´端修復(fù)加入被標(biāo)記核苷酸，切口平行推移。缺口平移法快速、簡(jiǎn)便、成本相對(duì)較低、比活性相對(duì)較高、標(biāo)記均勻，多用于大分子DNA標(biāo)記，(>1000bp比較好)，但單鏈DNA、RNA不能用該法標(biāo)記。分析對(duì)象是固體物質(zhì)表面細(xì)小顆?；蛭⑿^(qū)域，小范圍直徑為1μm。嘉定區(qū)質(zhì)量探針按需定制

電子探針又稱微區(qū)X射線光譜分析儀、X射線顯微分析儀。嘉定區(qū)質(zhì)量探針按需定制

電子探針X射線顯微分析儀（簡(jiǎn)稱電子探針）利用約1Pm的細(xì)焦電子束，在樣品表層微區(qū)內(nèi)激發(fā)元素的特征X射線，根據(jù)特征X射線的波長(zhǎng)和強(qiáng)度，進(jìn)行微區(qū)化學(xué)成分定性或定量分析。電子探針的光學(xué)系統(tǒng)、真空系統(tǒng)等部分與掃描電鏡基本相同，通常也配有二次電子和背散射電子信號(hào)檢測(cè)器，同時(shí)兼有組織形貌和微區(qū)成分分析兩方面的功能。電子探針的構(gòu)成除了與掃描電鏡結(jié)構(gòu)相似的主機(jī)系統(tǒng)以外，還主要包括分光系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)等部分。電子探針主要由電子光學(xué)系統(tǒng)（鏡筒），X射線譜儀和信息記錄顯示系統(tǒng)組成。電子探針和掃描電鏡在電子光學(xué)系統(tǒng)的構(gòu)造基本相同，它們常常組合成單一的儀器。嘉定區(qū)質(zhì)量探針按需定制

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