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外泌體可以傳遞生物分子,例如蛋白質(zhì)、DNA、mRNA等,影響接收器細胞的表現(xiàn)型和生理活性。外泌體可通過特定的組裝和功能修飾,提高其對宿主細胞的選擇性靶向性。核酸是在外泌體中發(fā)現(xiàn)的另一組主要顆粒,即DNA和RNA,它們可以在細胞中發(fā)揮功能作用。在源自小鼠和人類肥大細胞的外泌體中發(fā)現(xiàn)了約1300種mRNA、121種miRNA和>100種小RNA,但未檢測到DNA和rRNA。在外泌體中發(fā)現(xiàn)的其他miRNA是lin-4和let-7,以及母乳中的miR-181a和miR-155。小鼠外泌體對人類細胞的刺激可以導致人類細胞中小鼠蛋白質(zhì)的合成。此外,外泌體和受體細胞的mRNA譜不同,表明mRNA被主動分選為MVB。發(fā)現(xiàn)外泌體轉(zhuǎn)移可能為疾病治著和預后提供新的治著策略。長沙血液RNA外泌體分離制造商
分離外泌體的方法之降水:它是一種基于生物體液中外泌體的電荷沉淀的方法。帶負電荷的外泌體可以與PEG35,000Da基質(zhì)中帶正電荷的魚精蛋白相互作用并形成沉淀。外泌體的回收和重懸比基于超速離心的分離更有效。聚合物沉淀法以更少的勞動力和昂貴的設(shè)備分離尿外泌體的潛在益處。該方法首先利用DL-二硫蘇糖醇溶液還原或去除Tamm-Horsfall蛋白的聚合網(wǎng)絡(luò),然后在25°C和30min下只用10,000×g的向心力即可實現(xiàn)外泌體的沉淀。還有利用聚合物沉淀方法并消除超速離心的商業(yè)試劑盒。ExoQuick?、Exo-spin?是來自Invitrogen?和miRCURY?的市售總外泌體分離試劑。長沙血液DNA外泌體分離報價表外泌體的構(gòu)成:外泌體富含膽固醇和鞘磷脂。
外泌體衍生物miRNA的重要應用:外泌體保護miRNA免于降解,使它們比游離miRNA更穩(wěn)定,并能被特定受體細胞有效整合。因此,在外泌體攜帶的貨物中,miRNA可以提供有關(guān)它們來源的細胞類型、靶標和細胞狀態(tài)的身份信息。越來越多的證據(jù)表明,疙瘩細胞來源的外泌體已成為通過傳遞病miRNA促進疙瘩細胞增殖、侵襲、血管生成、遠處轉(zhuǎn)移和疙瘩微環(huán)境重塑的主要候選者。血管生成對于惡性疙瘩的生長和轉(zhuǎn)移至關(guān)重要,因為新血管可以提供額外的氧氣和營養(yǎng)物質(zhì),還可以清理廢物。比如:病細胞釋放外泌體exo-miR-21、exo-miR-23;外-miR-29;exo-miR-103和exo-miR-210可以促進增殖、血管生成和疙瘩轉(zhuǎn)移。
當外泌體在1983年頭次被發(fā)現(xiàn)后,其被認為是細胞排泄廢物的一種方式,如今隨著大量對其生物來源、其物質(zhì)構(gòu)成及運輸、細胞間信號的傳導以及在體液中的分布的研究發(fā)現(xiàn)外泌體具有多種多樣的功能。外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型,其可參與到機體免疫應答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化、疙瘩侵襲等方方面面。有研究表明疙瘩來源的外泌體參與到疙瘩細胞與基底細胞的遺傳信息的交換,從而導致大量新生血管的生成,促進了疙瘩的生長與侵襲。外泌體攜帶的小分子物質(zhì)(如ATP、GTP等)參與細胞生命活動、代謝、細胞生長和分化等生物學進程。
外泌體是由正?;虿±項l件下的細胞所分泌,含有各種膜蛋白和胞質(zhì)蛋白。因此,外泌體蛋白也可以作為生物試劑潛在地用于蛋白診斷。外泌體中發(fā)現(xiàn)的十種蛋白質(zhì)主要包括熱休克蛋白8(HSPA8)、CD63抗原(CD63)、β肌動蛋白(ACTB)、甘油醛-3-磷酸脫氫酶、烯醇化酶1α、細胞溶質(zhì)熱休克蛋白90α(HSP90AA1)、CD9、CD81、酪氨酸3-單加氧酶/色氨酸5-單加氧酶打開蛋白、zeta多肽(YWHAZ)、肌肉酸激酶(PKM2)。外泌體蛋白屬于各種功能組,例如四跨膜蛋白(CD9、CD63和CD81)、熱休克蛋白(HSC70和HSC90)、膜轉(zhuǎn)運蛋白(GTPases)和脂質(zhì)結(jié)合蛋白。外泌體標記物及其在免疫組織化學、免疫細胞化學、流式細胞術(shù)和ELISA等抗體應用中的常用的單克隆抗體。外泌體分離和分析的標準化和規(guī)范化將有助于外泌體研究領(lǐng)域的進一步發(fā)展。杭州尿液外泌體分離報價表
外泌體在心血管系統(tǒng)中扮演著重要的調(diào)節(jié)作用,與各種疾病如心肌梗死、心衰等相關(guān)聯(lián)。長沙血液RNA外泌體分離制造商
細胞外泌體的來源和表征方法:細胞外泌體是直徑為30-150nm的血管外囊泡亞群。在過去的20年里,科學家已經(jīng)從包括正常細胞和病細胞在內(nèi)的許多細胞類型中分離出外泌體,并且研究了它們對其他細胞的影響。外泌體是由多種大分子組成,例如核酸、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)。細胞外泌體具有天然的特定細胞靶向特性,通常被設(shè)計用于靶向大分子(DNA和RNA)和藥物遞送系統(tǒng)(多柔比星、紫杉醇和紫杉醇)。目前常用細胞外泌體的分離方法主要是超速離心法、密度梯度離心法、超濾分離法、基于聚合物的沉淀法、親和沉淀分離法、免疫磁珠法和色譜法等。長沙血液RNA外泌體分離制造商
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