外泌體分離方法之基于聚合物的沉淀法：基于聚合物的沉淀技術(shù)通常包括將生物流體與含聚合物的沉淀溶液混合、4℃孵育和低速離心。用于基于聚合物的沉淀的較常見(jiàn)聚合物之一是聚乙二醇(PEG)。這種聚合物的沉淀可以對(duì)分離的外泌體產(chǎn)生溫和影響而且可以產(chǎn)生中性的pH值。由此，出現(xiàn)了幾種常見(jiàn)的外泌體試劑盒：比如：SystemBiosciences,MountainView,CA,ExoQuick等。研究表明，使用ExoQuick方法可以快速執(zhí)行，無(wú)需額外設(shè)備，只需用高速離心機(jī)進(jìn)行超速離心可以獲得高產(chǎn)量的外泌體。但是此方法的缺點(diǎn)是：非外泌體材料對(duì)外泌體分離物的污染仍然是基于聚合物的分離方法的一個(gè)問(wèn)題。此外，分離物中的聚合物可能會(huì)干擾下游分析。外泌體的組成成分包括脂肪、糖、蛋白質(zhì)等，對(duì)其組成成分的分析有助于了解其生物學(xué)功能和生理調(diào)節(jié)作用。合肥血液外泌體分離生產(chǎn)商

外泌體分離方法之免疫學(xué)分離方法：免疫學(xué)分離法是利用受位于外泌體膜中的選定蛋白質(zhì)標(biāo)記物影響的抗體對(duì)外泌體進(jìn)行標(biāo)記。這些標(biāo)記的外泌體可以進(jìn)一步輕松處理和純化，例如，使用微芯片或磁珠。磁分離后，外泌體被純化，磁珠被溶解和去除。通過(guò)這種簡(jiǎn)單快速的方法，就可以獲得較高純度提取物，但不會(huì)分離出缺乏磁性標(biāo)記抗體識(shí)別的表面標(biāo)記的外泌體，這可能導(dǎo)致外泌體池表現(xiàn)效果不佳。這種方法雖然既省時(shí)又直接，輸出純度較高，但也需要較為昂貴的試劑。寧波快速提取外泌體企業(yè)外泌體不是干細(xì)胞，是干細(xì)胞較精華的部分。

分離外泌體的方法之過(guò)濾：過(guò)濾方法只取決于分子量或組分的大小，并有助于獲得較佳的外泌體產(chǎn)量。超濾、凝膠過(guò)濾和靜水透析包含在外泌體分離的過(guò)濾原理下。外泌體可以根據(jù)其定義的分子量或體積排阻限，使用標(biāo)準(zhǔn)膜過(guò)濾器從其他EV組分和細(xì)胞碎片中分離出來(lái)。市售的聚偏二乙烯碳酸酯膜過(guò)濾器具有各種孔徑范圍，用于滲透、納濾和微濾應(yīng)用。分離外泌體的方法之體積排阻色譜（SEC）：該方法主要有助于從分離的外泌體中去除蛋白質(zhì)和脂蛋白雜質(zhì)，它已被用于從尿液和血漿蛋白中分離外泌體。它被用作超速離心和超濾的后續(xù)分離方法。瓊脂糖2B/CL4B、qEV和瓊脂丙烯酸S-400是通常用于凝膠過(guò)濾色譜分離外泌體的色譜柱。SEC可以在低壓下進(jìn)行，這有助于分離具有完整完整性的外泌體。

外泌體的表征方法之光學(xué)方法：目前，光學(xué)方法是外泌體表征的主要方法，即動(dòng)態(tài)光散射(DLS)、多角度光散射(MALS)和納米粒子跟蹤分析(NTA)。這些方法允許對(duì)尺寸（DLS0.5–200nm；MALS10–500nm；NTA10–1000nm）、尺寸分布和濃度進(jìn)行高分辨率測(cè)量。DLS和MALS的結(jié)合增加了測(cè)量范圍(0.5–500nm)和精度。光學(xué)方法比較受歡迎的，但缺點(diǎn)是靈敏度低、試劑消耗高以及需要昂貴的設(shè)備。在使用納米粒子跟蹤分析NTA方法過(guò)程中，熒光染料的加入也提高了分辨率，并允許通過(guò)使用熒光標(biāo)記來(lái)表征表面免疫表型。從而確定標(biāo)記物存在。外泌體分離方法的優(yōu)化需要對(duì)比不同方法的純度和收率。

分離外泌體的方法之微流控分離：基于微流體的外泌體分離可以包括用于外泌體捕獲的免疫親和方法，納米多孔膜篩分方法或微柱上的納米線(xiàn)用于外泌體捕獲。所有三個(gè)系統(tǒng)都需要具有粘彈性分析和電操作的芯片才能進(jìn)行外泌體分離過(guò)程。外泌體的特異性很高，采用基于微流控芯片的免疫親和捕獲方法。尺寸范圍在40-100nm之間的外泌體被這種微流體芯片特異性地捕獲，在外泌體分離和定量方面的益處。篩分方法可用于通過(guò)壓力或通過(guò)電泳從全血中過(guò)濾外泌體，壓力的利用使分離時(shí)間更短，電場(chǎng)導(dǎo)致高外泌體純度。特異性、可重復(fù)性、低分離時(shí)間和更低的分離成本是基于微流體的外泌體分離的一些優(yōu)點(diǎn)。蛋白質(zhì)分離方法可以用于外泌體的分離和純化。杭州血液RNA外泌體穩(wěn)定性好

外泌體的分析需要根據(jù)不同來(lái)源的細(xì)胞選擇適宜的分離方法。合肥血液外泌體分離生產(chǎn)商

分離外泌體的方法之免疫親和相互作用：免疫親和法是利用外泌體表面蛋白（抗原）與其靶抗體或分離配體分子之間的免疫親和相互作用原理分離純外泌體的理想方法。它有助于根據(jù)其表面標(biāo)志物分離特定類(lèi)型的外泌體。基于微孔板的酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）是免疫親和分離試劑盒的一個(gè)例子，用于根據(jù)外泌體表面標(biāo)志物分離外泌體。Tetraspanin蛋白是這種分離方法的決定因素?？笴D9、抗CD63和抗CD81是免疫親和外泌體分離中使用的抗體的常見(jiàn)示例。免疫親和法可用于從結(jié)腸病細(xì)胞中分離外泌體，其效率高于超速離心和密度梯度分離。另外還有一種外泌體分離方法，該方法采用抗體包被的基于磁性顆粒的技術(shù)來(lái)分離外泌體。合肥血液外泌體分離生產(chǎn)商

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