dNTP/dUTP Mixture是一種特殊的核苷酸混合物,包含四種脫氧核苷三磷酸(dATP、dCTP、dTTP、dGTP)和脫氧尿苷三磷酸(dUTP),其中每種dNTP濃度為2.5 mM,dUTP濃度為5 mM。這種獨(dú)特的配方使其在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值,尤其是在需要結(jié)合傳統(tǒng)DNA合成與尿嘧啶標(biāo)記的場(chǎng)景中。產(chǎn)品特點(diǎn)dNTP/dUTP Mixture結(jié)合了傳統(tǒng)dNTP和dUTP的優(yōu)勢(shì),提供了一種多功能的DNA合成試劑。其配方中dNTP濃度為2.5 mM,dUTP濃度為5 mM,能夠滿足常規(guī)PCR、DNA標(biāo)記、基因編輯等多種實(shí)驗(yàn)需求。這種混合物經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制,確保純度和穩(wěn)定性,能夠?yàn)镈NA合成提供高質(zhì)量的原料保障。此外,dUTP的存在為實(shí)驗(yàn)提供了額外的功能,例如通過(guò)尿嘧啶標(biāo)記實(shí)現(xiàn)DNA的特異性檢測(cè)或后續(xù)處理。這種混合物的高濃度設(shè)計(jì)減少了實(shí)驗(yàn)中試劑的添加量,降低了污染風(fēng)險(xiǎn),同時(shí)便于實(shí)驗(yàn)人員根據(jù)具體需求進(jìn)行稀釋和使用。應(yīng)用場(chǎng)景dNTP/dUTP Mixture廣應(yīng)用于以下領(lǐng)域:PCR反應(yīng):在常規(guī)PCR中,dNTP/dUTP Mixture可用于DNA擴(kuò)增,同時(shí)引入dUTP標(biāo)記,便于后續(xù)的DNA檢測(cè)或熱啟動(dòng)應(yīng)用。
50× ROX Reference Dye:實(shí)時(shí)定量PCR中的關(guān)鍵校正試劑50× ROX Reference Dye 是一種用于實(shí)時(shí)定量PCR(qPCR)的熒光校正染料,廣泛應(yīng)用于ABI、Stratagene等品牌的實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀。其主要作用是校正由于加樣誤差、孔間差異或儀器光學(xué)系統(tǒng)不一致導(dǎo)致的熒光信號(hào)偏差,從而提高qPCR實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。產(chǎn)品特點(diǎn)高濃度設(shè)計(jì):50× ROX Reference Dye 的濃度為25 μM,使用時(shí)需根據(jù)儀器型號(hào)和反應(yīng)體系進(jìn)行稀釋。適用機(jī)型廣:適用于多種ABI和Stratagene品牌的qPCR儀器,如ABI 5700、7900HT Fast、StepOne、StepOne Plus等。保存條件:常溫運(yùn)輸,-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期可達(dá)2年。應(yīng)用場(chǎng)景校正孔間誤差:在qPCR實(shí)驗(yàn)中,由于加樣量、孔位置、試管壁厚度或管蓋透光性差異,可能導(dǎo)致熒光信號(hào)的偏差。ROX染料通過(guò)提供穩(wěn)定的熒光背景,校正這些差異,提高數(shù)據(jù)的可靠性。標(biāo)準(zhǔn)化熒光信號(hào):ROX染料可對(duì)報(bào)告染料(如SYBR Green I或TaqMan探針)的熒光強(qiáng)度進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理,為多重定量PCR提供穩(wěn)定的基線。總之,50× ROX Reference Dye 是實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn)中不可或缺的校正試劑,能夠提高實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和重復(fù)性,是分子生物學(xué)研究和臨床檢測(cè)中的重要工具。
在分子生物學(xué)研究中,核酸染色是檢測(cè)DNA和RNA的關(guān)鍵步驟,而溴化乙錠(EthidiumBromide,EB)作為一種經(jīng)典的熒光染料,因其高效性和靈敏性被廣泛應(yīng)用于核酸電泳、熒光分析等領(lǐng)域。產(chǎn)品特點(diǎn)高靈敏度與特異性EB是一種多環(huán)芳烴熒光小分子,能夠特異性地嵌入雙鏈DNA和RNA中。結(jié)合后,其熒光強(qiáng)度增強(qiáng),雙鏈RNA和雙鏈DNA的熒光強(qiáng)度分別可增強(qiáng)21倍和25倍。這種特性使得EB能夠檢測(cè)到低至10ng的DNA條帶,非常適合用于微量核酸的檢測(cè)。多種應(yīng)用EB不僅用于瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳中的核酸染色,還可以作為DNA聚合酶抑制劑,用于核酸的熒光分析實(shí)驗(yàn)。此外,EB還可與吖啶橙聯(lián)合使用,用于區(qū)分活細(xì)胞、凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞。便捷的使用方法10mg/ml的EB溶液是一種預(yù)制的儲(chǔ)存液,使用時(shí)只需稀釋至工作濃度(通常為0.5μg/ml),即可用于電泳前或電泳后的染色。例如,在瓊脂糖凝膠制備時(shí),每100mL膠液中加入2-5μL的10mg/mlEB溶液即可。穩(wěn)定的儲(chǔ)存條件10mg/ml的EB溶液在室溫下避光保存即可,有效期可達(dá)1-2年。這種儲(chǔ)存條件使得EB溶液在實(shí)驗(yàn)室中易于保存和管理。
10× DNA Loading Buffer 是一種高濃度的即用型試劑,廣泛應(yīng)用于DNA凝膠電泳實(shí)驗(yàn)中。它通過(guò)添加特定的染料和高密度成分(如甘油或蔗糖),使DNA樣品在電泳過(guò)程中更容易沉降并被觀察,是DNA分析實(shí)驗(yàn)中不可或缺的工具。產(chǎn)品特點(diǎn)高密度與染料標(biāo)記:10× DNA Loading Buffer 含有高濃度的甘油或蔗糖,能夠使DNA樣品在電泳時(shí)沉降于凝膠孔底部,避免漂浮。同時(shí),其中的染料(如溴酚藍(lán)或二甲苯藍(lán))可以指示DNA遷移的位置,便于實(shí)時(shí)觀察電泳進(jìn)程。即用型設(shè)計(jì):無(wú)需額外配制,直接與DNA樣品混合即可使用,簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作。兼容性強(qiáng):適用于多種類型的DNA樣品,包括PCR產(chǎn)物、質(zhì)粒DNA、基因組DNA片段等,也兼容瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠電泳。穩(wěn)定保存:常溫保存,穩(wěn)定性高,無(wú)需特殊處理。應(yīng)用場(chǎng)景DNA片段分離:在瓊脂糖凝膠電泳中,用于分離和分析DNA片段,如PCR產(chǎn)物、質(zhì)粒DNA、限制性酶切片段等。電泳指示:染料的遷移速率可以作為DNA片段大小的參考,幫助判斷目標(biāo)片段的位置。DNA回收:在DNA回收實(shí)驗(yàn)中,幫助定位目標(biāo)條帶,便于后續(xù)的切膠回收操作。T4 DNA 聚合酶相對(duì)不耐熱,在 70℃加熱 10 分鐘可使 T4 DNA 聚合酶失活,因此在實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中需要注意溫度。
在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,而Hot-Start Taq Master Mix (2×) (With Dye) 則是提升PCR特異性和便捷性的理想選擇。這種預(yù)混液結(jié)合了熱啟動(dòng)技術(shù)和熒光染料,為效率、準(zhǔn)確的基因擴(kuò)增提供了強(qiáng)大的支持。Hot-Start Taq Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,包含Hot-Start Taq DNA聚合酶、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液、dNTPs、增強(qiáng)劑以及熒光染料。其優(yōu)點(diǎn)在于熱啟動(dòng)技術(shù)的應(yīng)用。通過(guò)在常溫下抑制Taq酶活性,該預(yù)混液有效避免了非特異性擴(kuò)增和引物二聚體的形成,從而提高了PCR反應(yīng)的特異性和靈敏度。這種特性尤其適用于復(fù)雜模板(如高GC含量或低豐度基因)的擴(kuò)增,以及對(duì)特異性要求較高的實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景。熒光染料的加入是該預(yù)混液的另一大亮點(diǎn)。這種染料在PCR過(guò)程中能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)DNA的擴(kuò)增情況,通過(guò)熒光信號(hào)的強(qiáng)度變化反映目標(biāo)基因的擴(kuò)增程度。這種“即用型”預(yù)混液不僅節(jié)省了實(shí)驗(yàn)時(shí)間,還減少了人為操作帶來(lái)的污染風(fēng)險(xiǎn),尤其適合高通量的基因檢測(cè)和定量分析。此外,該預(yù)混液的2倍濃度設(shè)計(jì)進(jìn)一步簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作。實(shí)驗(yàn)人員只需加入模板DNA和引物,即可直接進(jìn)行反應(yīng),減少了手動(dòng)配制反應(yīng)體系的步驟和可能出現(xiàn)的誤差。盡管Ultra-Long Master Mix設(shè)計(jì)用于長(zhǎng)片段擴(kuò)增,但在某些情況下,可能出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增,需要通過(guò)優(yōu)化引物。Recombinant Human M-CSF R/CSF1R/CD115 Protein
Pfu酶能夠在高溫條件下保持活性,在95℃孵育1小時(shí)后,仍能保持90%以上的活性特性使其在PCR反應(yīng)中表現(xiàn)出色。Recombinant Cynomolgus AMIGO2 Protein,His Tag
Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(5U/μl):高效除PCR污染的關(guān)鍵酶在分子生物學(xué)研究中,PCR技術(shù)的應(yīng)用極為廣,但PCR產(chǎn)物的交叉污染問(wèn)題一直是影響實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性和可靠性的關(guān)鍵因素之一。Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(UDG)作為一種高效的酶工具,憑借其獨(dú)特的性能和廣的應(yīng)用,已成為解決這一問(wèn)題的理想選擇。一、產(chǎn)品特點(diǎn)高效水解尿嘧啶Uracil-DNAGlycosylase(UDG)能夠特異性地催化DNA中尿嘧啶(dU)堿基與脫氧核糖之間的N-糖苷鍵水解,釋放游離尿嘧啶。這種酶對(duì)單鏈和雙鏈DNA均有效,但對(duì)RNA或長(zhǎng)度不超過(guò)6個(gè)堿基的DNA寡核苷酸無(wú)活性。防止PCR產(chǎn)物污染UDG的主要應(yīng)用之一是防止PCR產(chǎn)物的交叉污染。通過(guò)在PCR反應(yīng)中使用dUTP替代dTTP,生成含有dU的PCR產(chǎn)物,UDG可以特異性地切割這些含有dU的DNA,從而防止其在后續(xù)反應(yīng)中作為模板被擴(kuò)增。反應(yīng)條件兼容性UDG在pH8.0左右表現(xiàn)出活性,且不需要二價(jià)陽(yáng)離子,可在較寬的pH范圍內(nèi)工作。它對(duì)高離子強(qiáng)度(>200mM)敏感,因此在使用時(shí)需注意反應(yīng)體系的離子濃度。Recombinant Cynomolgus AMIGO2 Protein,His Tag