Tris-硼酸電泳緩沖液(5×TBE):高效、穩(wěn)定的DNA電泳選擇在分子生物學(xué)實驗中,瓊脂糖凝膠電泳是分析DNA片段大小和純度的關(guān)鍵技術(shù)之一。Tris-硼酸電泳緩沖液(5×TBE)作為一種廣使用的緩沖液,因其高效、穩(wěn)定和兼容性強的特點,成為實驗室中不可或缺的工具。產(chǎn)品特點與優(yōu)勢Tris-硼酸電泳緩沖液(5×TBE)的主要成分包括Tris(三羥甲基氨基甲烷)、硼酸和EDTA(乙二胺四乙酸)。這種配方能夠在電泳過程中提供穩(wěn)定的pH環(huán)境,確保DNA片段的清晰分離。高效分離:TBE緩沖液具有較高的離子強度,適合分離小分子量的DNA片段。它能夠在電泳過程中提供穩(wěn)定的電流,確保DNA條帶清晰、分辨率高。兼容性強:TBE緩沖液適用于多種類型的瓊脂糖凝膠電泳,兼容常見的核酸染料(如EB或GoldView),滿足不同實驗需求。經(jīng)濟實用:5×的高濃度設(shè)計使得該緩沖液在使用時可以根據(jù)實驗需求靈活稀釋,減少浪費,降低實驗成本。穩(wěn)定性高:液體形式的TBE緩沖液在保存和使用過程中更加穩(wěn)定,只需按照說明稀釋即可使用,無需額外配制。使用方法使用Tris-硼酸電泳緩沖液(5×TBE)時,需按照以下步驟操作:稀釋緩沖液:根據(jù)實驗需求,取適量的5×TBE緩沖液,加入去離子水稀釋至1×工作液。DNA Marker V的條帶清晰、亮度均勻,能夠為實驗人員提供準確的分子量參考。遼寧酶定向進化技術(shù)服務(wù)臨床前研究
除了CRISPR-Cas9技術(shù),還有其他幾種基因編輯技術(shù)可以用于金黃色葡萄球菌的研究:1.單堿基編輯技術(shù):這是一種新型的基因編輯技術(shù),可以在不切割DNA雙鏈的情況下實現(xiàn)基因的定點突變。季泉江教授課題組與中國科學(xué)院北京基因組所韓大力研究員課題組合作,在金黃色葡萄球菌中建立了單堿基編輯技術(shù),通過融合失活的Cas9蛋白(Cas9D10A)和胞嘧啶脫氨酶(APOBEC1),實現(xiàn)了高效單堿基編輯,有助于研究耐藥機制和開發(fā)新型手段。2.同源重組(HR)修復(fù)技術(shù):在某些細菌中,可以通過同源重組機制對CRISPR-Cas9系統(tǒng)產(chǎn)生的雙鏈DNA斷裂進行修復(fù),實現(xiàn)基因的精確編輯。例如,在谷氨酸棒桿菌中,利用CRISPR/Cas9技術(shù)結(jié)合同源重組修復(fù)模板,實現(xiàn)了高效的基因缺失和點突變。3.非同源末端連接(NHEJ)相關(guān)蛋白共表達:通過共表達Cas9蛋白和NHEJ相關(guān)蛋白,如連接酶LigD,可以在鏈霉菌中實現(xiàn)有效的基因組編輯,這種方法不依賴于同源重組,可以應(yīng)用于那些同源重組效率較低的細菌。4.CRISPR干擾技術(shù)(CRISPRi):利用失活的Cas9蛋白(dCas9)阻斷基因的轉(zhuǎn)錄,從而抑制特定基因的表達。這種技術(shù)可以用于研究基因功能和調(diào)控基因表達,已經(jīng)在多種細菌中得到應(yīng)用。安徽重組蛋白表達服務(wù)技術(shù)服務(wù)開發(fā)Ultra-Long Master Mix (2×)(With Dye)在配方中加入了保護劑,使其在反復(fù)凍融后仍能保持穩(wěn)定的活性。
關(guān)于粘質(zhì)沙雷氏菌(Serratiamarcescens)的基因組編輯,雖然搜索結(jié)果中沒有直接提到具體的基因編輯技術(shù)或方法,但提供了一些與該細菌相關(guān)的研究信息,這些信息可能對理解其基因組特性和潛在的基因編輯應(yīng)用有所幫助。1.粘質(zhì)沙雷氏菌是一種機會性的病原體,同時也能染多種宿主,包括昆蟲和植物,并且對植物具有致病性或促進生長的作用。2.研究表明,粘質(zhì)沙雷氏菌的全基因組富含輔助成分,被認為是開放的,并且通過全基因組關(guān)聯(lián)方法(pan-GWAS)預(yù)測了與人類、昆蟲和植物三個宿主群體正相關(guān)的基因簇。3.粘質(zhì)沙雷氏菌的某些菌株具有拮抗植物病原的活性,例如FS14菌株在全基因組測序分析中發(fā)現(xiàn)了與拮抗特性相關(guān)的基因,如幾丁質(zhì)酶和蛋白酶等。4.粘質(zhì)沙雷氏菌的基因組研究還包括對其進化分析的探討,以及與其他沙雷氏菌種的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系研究。盡管上述信息并未直接涉及基因編輯技術(shù),但它們?yōu)槔斫庹迟|(zhì)沙雷氏菌的基因組背景提供了基礎(chǔ),這對于未來開發(fā)針對該細菌的基因編輯策略可能是有用的。例如,通過基因組測序和分析確定的關(guān)鍵基因簇可能成為基因編輯的潛在靶點。此外,對細菌與宿主相互作用的理解可能有助于設(shè)計更有效的基因編輯方法,以改善其在農(nóng)業(yè)或生物技術(shù)應(yīng)用中的性能。
DL15000 Plus DNA Marker:大片段DNA分析的理想工具DL15000 Plus DNA Marker 是一種即用型的DNA分子量標(biāo)準,廣應(yīng)用于瓊脂糖凝膠電泳中,用于分析和估算DNA片段的大小。它由多條線狀雙鏈DNA片段組成,覆蓋從250 bp到15,000 bp的范圍,能夠為大片段DNA的分析提供精確的參考。產(chǎn)品特點組成:DL15000 Plus 包含10條線狀雙鏈DNA片段,分別為250 bp、500 bp、1,000 bp、1,500 bp、2,500 bp、4,000 bp、5,000 bp、7,500 bp、10,000 bp和15,000 bp。即用型設(shè)計:已預(yù)混1×Loading Buffer,可直接上樣,無需額外處理。清晰的條帶:電泳圖像清晰,背景干凈,條帶亮度均勻。穩(wěn)定性高:在-20℃下可長期保存,室溫下也能穩(wěn)定保存6個月。使用方法上樣量:建議每次取2-5 μL直接加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中。如果加樣孔較寬,可適當(dāng)增加上樣量。電泳條件:推薦使用0.6%-1.0%的瓊脂糖凝膠,電壓4-10 V/cm,電泳時間20-40分鐘。染色與觀察:電泳結(jié)束后,使用溴化乙錠(EB)或其他DNA染料染色,在紫外燈下觀察。注意事項保存條件:建議低溫保存,避免反復(fù)凍融。瓊脂糖質(zhì)量:電泳時應(yīng)盡量選用高質(zhì)量的瓊脂糖,以獲得比較好分離效果。電泳緩沖液:及時更換電泳緩沖液并使用新制備的凝膠,以免影響電泳結(jié)果。Plant Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)表現(xiàn)出色。它能夠耐受植物樣本中的多種抑制物,如多糖、酚類等。
在分子生物學(xué)實驗中,RNA的分離與分析是研究基因表達和調(diào)控的重要環(huán)節(jié)。BPTE電泳緩沖液(1×, RNase free)作為一種為RNA電泳設(shè)計的緩沖液,因其高效、穩(wěn)定且無核酸酶污染的特點,成為實驗室中不可或缺的工具。BPTE電泳緩沖液的主要成分包括PIPES、Tris和EDTA,這些成分共同作用,為RNA電泳提供了理想的環(huán)境。該緩沖液經(jīng)過0.1% DEPC處理,確保了無RNase污染,從而保護RNA樣品免受降解。其pH值約為6.5,適合RNA在電泳過程中的穩(wěn)定遷移。優(yōu)勢與特點無核酸酶污染:BPTE緩沖液經(jīng)過DEPC處理,確保無RNase污染,適合RNA樣品的電泳分析。高效分離:該緩沖液能夠提供穩(wěn)定的電泳條件,確保RNA條帶清晰、分辨率高。即用型設(shè)計:BPTE電泳緩沖液(1×, RNase free)為即用型溶液,無需額外配制,直接使用即可。廣適用性:適用于多種類型的RNA電泳實驗,包括小片段RNA和長片段RNA的分離。使用方法BPTE電泳緩沖液(1×, RNase free)可以直接用于制備瓊脂糖凝膠或作為電泳槽的緩沖液。使用時需注意以下幾點:確保所有實驗器材和試劑均經(jīng)過RNase-free處理。在電泳結(jié)束后,建議使用RNase-free的核酸染料進行染色,以避免RNA降解。
Pfu Master Mix (2x)(With Dye)在基因合成中的應(yīng)用 高保真特性使其成為基因合成更加,確保合成片段的準確性。遼寧酶定向進化技術(shù)服務(wù)臨床前研究
TAFE凝膠電泳緩沖液(10×):高效、穩(wěn)定的核酸電泳選擇TAFE凝膠電泳緩沖液(10×)是一種廣應(yīng)用于核酸電泳的高效緩沖液,主要由200 mM Tris-乙酸和5 mM EDTA組成。這種緩沖液以10倍濃縮的形式提供,使用時需用蒸餾水或去離子水稀釋至1×工作液。產(chǎn)品特點高效分離:TAFE緩沖液在核酸電泳中表現(xiàn)出色,尤其適用于分離小片段核酸,能夠提供清晰的電泳條帶。穩(wěn)定性高:10倍濃縮的設(shè)計使其在儲存和使用過程中更加穩(wěn)定,適合長期保存。兼容性強:適用于瓊脂糖凝膠電泳,兼容常見的核酸染料(如EB或GoldView),滿足不同實驗需求。使用便捷:使用前只需稀釋至1×工作液,操作簡單。使用方法稀釋緩沖液:取適量的10×TAFE緩沖液,加入去離子水稀釋至1×工作液。例如,取10 mL的10×TAFE緩沖液,加入90 mL去離子水。制備凝膠:使用稀釋后的1×TAFE緩沖液制備瓊脂糖凝膠。電泳操作:將核酸樣品加入凝膠孔中,使用1×TAFE緩沖液進行電泳。染色與觀察:電泳結(jié)束后,使用合適的核酸染料對凝膠進行染色,并在紫外透射儀下觀察結(jié)果。保存與注意事項保存條件:TAFE凝膠電泳緩沖液(10×)應(yīng)保存在室溫下,避免長時間暴露在高溫或強光下。使用期限:未開封的產(chǎn)品有效期為12個月。遼寧酶定向進化技術(shù)服務(wù)臨床前研究