在分子生物學實驗中,PCR技術(shù)是基因擴增的重要工具,而Phusion Master Mix (2×) (With Dye) 則是結(jié)合了高保真性與實時監(jiān)測功能的選擇。這種預混液不僅繼承了Phusion DNA聚合酶的高保真特性,還通過添加熒光染料,為實驗提供了更直觀的監(jiān)測手段,極大地提升了實驗效率和準確性。Phusion Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預混液,包含Phusion DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應緩沖液以及用于實時監(jiān)測的熒光染料。Phusion DNA聚合酶以其保真性而聞名,其錯誤率比普通Taq酶低50倍以上,比Pfu酶低6倍。這種高保真性使其成為基因克隆、測序模板制備、突變分析等高精度實驗的推薦工具。同時,Phusion酶的延伸速度可達15-30秒/kb,比傳統(tǒng)Pfu酶快10倍,提高了實驗效率。熒光染料的加入是該預混液的一大亮點。這種染料能夠在PCR過程中實時監(jiān)測DNA的擴增情況,通過熒光信號的強度變化反映目標基因的擴增程度。實驗人員無需額外添加染料或進行復雜的后處理,即可直接在PCR儀上觀察擴增曲線,從而實現(xiàn)快速、準確的定量分析。這種設計不僅節(jié)省了實驗時間,還減少了人為操作帶來的誤差。此外,Phusion Master Mix (2×) (With Dye) 的2倍濃度設計進一步簡化了實驗操作。CRISPR-Cas12a(以前稱為Cpf1)是一種類II型V型內(nèi)切酶,偏好富含胸腺嘧啶的原間隔短回文重復序列鄰近基序。Recombinant Rat LIX/CXCL5
SYBR Green qPCR Mix (2×, UDG Plus):高效防污染的實時定量PCR解決方案SYBR Green qPCR Mix (2×, UDG Plus) 是一種為實時熒光定量PCR(qPCR)設計的2×預混液,結(jié)合了SYBR Green I熒光染料和尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)技術(shù),能夠有效防止PCR產(chǎn)物污染,提高檢測的特異性和準確性。產(chǎn)品特點高特異性和靈敏度:采用抗體修飾的熱啟動Taq DNA聚合酶,結(jié)合優(yōu)化的反應緩沖液,有效減少非特異性擴增,提高檢測靈敏度。防污染設計:預混液中包含UDG酶和dUTP,可在PCR反應前降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,防止交叉污染。通用性:含有ROX被動參考染料,適用于所有qPCR儀器,無需根據(jù)儀器調(diào)整ROX濃度??梢暬聚櫍翰糠之a(chǎn)品含有藍色示蹤染料,加入模板后顏色變化可防止加樣錯誤。應用場景基因表達分析:用于定量檢測基因表達水平。病原體檢測:快速檢測病毒、細菌等病原體的DNA。多重檢測:可在同一反應中同時檢測多個目標基因。SYBR Green qPCR Mix (2×, UDG Plus) 以其高效、特異和防污染的特點,成為分子生物學研究和臨床檢測中的重要工具,尤其適用于需要高靈敏度和防污染的qPCR實驗。Recombinant Cynomolgus CD83 Protein,His Tag利用His標簽通過親和層析從細胞裂解物中純化目標蛋白,然后可能通過離子交換層析、等方法進一步提純。
dUTP(脫氧尿苷三磷酸)是一種特殊的核苷酸,其結(jié)構(gòu)與dTTP(脫氧胸苷三磷酸)相似,但在堿基部分含有尿嘧啶而非胸腺嘧啶。dUTP在分子生物學中具有獨特的應用價值,尤其是在DNA合成、PCR反應以及基于尿嘧啶的標記和檢測中。產(chǎn)品特點dUTP Solution (100 mM) 是一種高純度的即用型溶液,濃度為100 mM,能夠滿足多種實驗需求。與傳統(tǒng)的dNTP(如dATP、dTTP、dCTP和dGTP)不同,dUTP中的尿嘧啶可以被特定酶識別和作用,例如尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG)。這一特性使其在某些實驗中具有不可替代的作用。dUTP溶液經(jīng)過嚴格的質(zhì)量控制,確保其純度和穩(wěn)定性。其高濃度設計便于實驗人員根據(jù)具體需求進行稀釋和使用,同時減少了試劑添加量,降低了污染風險。應用場景dUTP在分子生物學中具有多種獨特的應用:PCR反應中的熱啟動:dUTP常用于熱啟動PCR技術(shù)中,通過引入尿嘧啶標記的引物,利用UDG酶在PCR反應前降解引物,從而防止非特異性擴增。DNA標記與檢測:dUTP可用于DNA標記,通過將尿嘧啶引入DNA鏈,后續(xù)可通過UDG酶或熒光標記的抗尿嘧啶抗體進行檢測,實現(xiàn)對特定DNA片段的標記和追蹤。
Taq DNA聚合酶:分子生物學的“明星酶”Taq DNA聚合酶是一種從嗜熱菌Thermus aquaticus中分離得到的耐熱性DNA聚合酶,因其獨特的耐高溫特性和高效的DNA合成能力,成為分子生物學領(lǐng)域不可或缺的工具。該酶在PCR(聚合酶鏈式反應)技術(shù)中發(fā)揮著重要作用,極大地推動了基因擴增、測序和診斷技術(shù)的發(fā)展。Taq DNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性,但缺乏3'→5'外切酶活性,這使得它在DNA合成過程中能夠快速延伸引物,同時在PCR產(chǎn)物的3'端添加一個突出的A堿基,便于后續(xù)的克隆操作。此外,Taq酶的耐熱性使其能夠在PCR的高溫變性步驟中保持穩(wěn)定,從而實現(xiàn)高效的循環(huán)擴增。近年來,科學家們通過對Taq DNA聚合酶的改造和優(yōu)化,開發(fā)出多種突變體,以滿足不同的實驗需求。例如,Klentaq1突變體具有更高的耐熱性和保真性,適用于長片段PCR擴增。此外,Taq酶的5'外切酶活性還被用于開發(fā)新型的多重PCR檢測技術(shù),如“MeltArray”技術(shù),實現(xiàn)了在單次反應中檢測多個靶點。Taq DNA聚合酶的發(fā)現(xiàn)和應用不僅極大地簡化了DNA擴增的流程,還為基因診斷、遺傳病檢測和個性化醫(yī)療等領(lǐng)域提供了強大的技術(shù)支持。在泛素化過程中,首先泛素激起酶E1(Uba1或其他)在ATP的存在下激起泛素分子,形成E1-泛素硫酯中間體。
dNTP/dUTPMixture(2.5mMeach/5mM):助力分子生物學實驗的高效防污染解決方案在分子生物學實驗中,PCR技術(shù)是基因擴增和檢測的工具之一。然而,PCR產(chǎn)物的殘留污染可能導致假陽性結(jié)果,嚴重影響實驗的準確性和可靠性。dNTP/dUTPMixture(2.5mMeach/5mM)作為一種高效的防污染試劑,通過與尿嘧啶DNA糖苷酶(UDG)聯(lián)合使用,能夠有效解決這一問題。產(chǎn)品特點高純度與穩(wěn)定性dNTP/dUTPMixture(2.5mMeach/5mM)采用高純度的dATP、dCTP、dGTP和dUTP,純度≥99%,確保實驗的準確性和重復性。該產(chǎn)品在-20℃下可穩(wěn)定保存24個月,使用時需避免反復凍融。防污染機制該產(chǎn)品通過在PCR反應中用dUTP替代dTTP,使擴增產(chǎn)物中摻入dU堿基。隨后,UDG酶能夠特異性地降解含有dU的DNA產(chǎn)物,從而有效去除殘留的PCR產(chǎn)物污染。這種防污染系統(tǒng)特別適用于高通量PCR實驗和需要嚴格控制假陽性的應用場景。兼容性與適用性dNTP/dUTPMixture適用于多種DNA聚合酶,如Taq酶和BstDNA聚合酶等,可用于PCR、real-timePCR、RT-PCR、引物延伸反應以及cDNA合成等多種分子生物學實驗。然而,需要注意的是,某些具有校正活性的酶可能不適用于該混合物,具體需參考酶的產(chǎn)品說明書。實驗人員可以根據(jù)需求選擇后續(xù)的檢測方法,例如凝膠電泳分析、平末端克隆或測序,無需擔心染料對結(jié)果干擾。Recombinant Human GDF-7/BMP-12
泛素激起酶E1(Ubiquitin-activating enzyme E1)在ATP的存在下激發(fā)泛素分子,形成E1-泛素硫酯中間體。Recombinant Rat LIX/CXCL5
在分子生物學實驗中,PCR技術(shù)是基因擴增的重要工具,而Hot-Start Taq Master Mix (2×) (With Dye) 則是提升PCR特異性和便捷性的理想選擇。這種預混液結(jié)合了熱啟動技術(shù)和熒光染料,為效率、準確的基因擴增提供了強大的支持。Hot-Start Taq Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預混液,包含Hot-Start Taq DNA聚合酶、優(yōu)化的反應緩沖液、dNTPs、增強劑以及熒光染料。其優(yōu)點在于熱啟動技術(shù)的應用。通過在常溫下抑制Taq酶活性,該預混液有效避免了非特異性擴增和引物二聚體的形成,從而提高了PCR反應的特異性和靈敏度。這種特性尤其適用于復雜模板(如高GC含量或低豐度基因)的擴增,以及對特異性要求較高的實驗場景。熒光染料的加入是該預混液的另一大亮點。這種染料在PCR過程中能夠?qū)崟r監(jiān)測DNA的擴增情況,通過熒光信號的強度變化反映目標基因的擴增程度。這種“即用型”預混液不僅節(jié)省了實驗時間,還減少了人為操作帶來的污染風險,尤其適合高通量的基因檢測和定量分析。此外,該預混液的2倍濃度設計進一步簡化了實驗操作。實驗人員只需加入模板DNA和引物,即可直接進行反應,減少了手動配制反應體系的步驟和可能出現(xiàn)的誤差。Recombinant Rat LIX/CXCL5