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活力檢測(cè)

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2021-09-09

就eGFP而言,相對(duì)于GFP,其熒光強(qiáng)度更強(qiáng)、熒光性質(zhì)更穩(wěn)定。mCherry是從DsRed演化來(lái)的性能*好的一個(gè)單體紅色熒光蛋白,可以和GFP系列熒光蛋白共用,實(shí)現(xiàn)多色標(biāo)記。熒光蛋白活性和被融合的目標(biāo)蛋白功能相互沒(méi)有明顯影響。這些熒光標(biāo)簽蛋白,其融合表達(dá)目的蛋白后具有以下優(yōu)點(diǎn):1.不用破碎組織細(xì)胞和不加任何底物,直接通過(guò)熒光顯微鏡就能在活細(xì)胞中發(fā)出綠色熒光,實(shí)時(shí)顯示目的基因的表達(dá)情況,而且熒光性質(zhì)穩(wěn)定,被譽(yù)為活細(xì)胞探針。2.其自發(fā)熒光,不需用目的基因的抗體或原位雜交技術(shù)就可推知目的基因在細(xì)胞中的定位等情況。3.同時(shí)細(xì)胞內(nèi)的其它產(chǎn)物不會(huì)干擾標(biāo)簽蛋白檢測(cè),從而使其檢測(cè)更顯得快速、簡(jiǎn)便、靈敏度高而且重現(xiàn)性。4.其低消耗、高靈敏度檢測(cè),十分適用于高通量的藥物篩選。因此現(xiàn)eGFP表達(dá)標(biāo)簽被廣fan地應(yīng)用于基團(tuán)表達(dá)調(diào)控、轉(zhuǎn)基因功能研究、蛋白在細(xì)胞中的功能定位、遷移變化及藥物篩選等方面。5.mCherry紅色熒光蛋白在標(biāo)記病毒顆粒,研究病毒和宿主細(xì)胞之間更有得天獨(dú)厚的優(yōu)勢(shì)。如用mRFP或mCherry標(biāo)記HIV病毒顆粒,研究HIV和宿主細(xì)胞問(wèn)的相互作用以及HIV侵染宿主細(xì)胞的過(guò)程.用mRFP標(biāo)記慢病毒顆粒,研究慢病毒在小鼠體內(nèi)的復(fù)制過(guò)程等。對(duì)人類端粒長(zhǎng)度定量qPCR檢測(cè)試劑盒旨在直接測(cè)量人類細(xì)胞群的平均端粒長(zhǎng)度?;盍z測(cè)

來(lái)源于生物體內(nèi)的熒光素,常見(jiàn)的有螢火蟲(chóng)熒光素酶、海腎熒光素酶和Guassia熒光素酶。這些熒光素酶作為“報(bào)告蛋白”被用于分子生物學(xué)研究中,這種技術(shù)被稱為報(bào)告基因檢測(cè)法或螢光素酶檢測(cè)法(LuciferaseAssay)。跟普通融合蛋白標(biāo)簽不同,使用熒光素酶構(gòu)建的報(bào)告基因可用作目的基因的定量分析。因此常用于研究啟動(dòng)子、miRNA3'UTR克隆的功能與調(diào)控,因?yàn)樗鼈儗?duì)目的基因的調(diào)控可以是漸變的,而不是簡(jiǎn)單的開(kāi)和關(guān)兩種狀態(tài)。優(yōu)點(diǎn):靈敏度高,檢測(cè)幅度寬;不是哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)源性基因;重復(fù)性好;與HTS兼容等。螢火蟲(chóng)和海腎熒光素酶已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于協(xié)同報(bào)告并進(jìn)行均一化研究。由于它們都是快速,容易和高靈敏的監(jiān)測(cè)方法。而且螢火蟲(chóng)和海腎熒光素酶是理想的雙基因報(bào)告系統(tǒng),因?yàn)樗鼈儊?lái)源于不同的生物進(jìn)化方向,蛋白結(jié)構(gòu)和底物差異都很大,在實(shí)驗(yàn)中不會(huì)產(chǎn)生相互影響。人細(xì)胞角蛋白17試劑盒為雜交瘤細(xì)胞生長(zhǎng)期間和之后定性和定量抗體類別同種型提供了一種快速靈敏且簡(jiǎn)便的方法,用于評(píng)估免疫應(yīng)答。

常用的病毒載體有腺病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒和慢病毒。逆轉(zhuǎn)錄病毒載體只能感ran分裂期細(xì)胞,而且容量有限,腺病毒一般不能整合到染色體上,只能進(jìn)行瞬時(shí)感ran。與其它逆轉(zhuǎn)錄病毒相比,慢病毒(LV)具有可以感ran非分裂期細(xì)胞、容納外源性基因片段大,可以長(zhǎng)期表達(dá)等xian zhu優(yōu)點(diǎn)。慢病毒不產(chǎn)生任何有效的細(xì)胞免疫應(yīng)答,可作為一種體外基因運(yùn)輸?shù)墓ぞ摺B《据d體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因表達(dá)能持續(xù)數(shù)月,且無(wú)可觀察到的病理學(xué)現(xiàn)象。

對(duì)于一些按常規(guī)方法難以轉(zhuǎn)染甚至無(wú)法轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,通過(guò)病毒介導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)?zāi)軌虼骴a提高基因的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,以達(dá)到目的基因的高效瞬時(shí)表達(dá)。

腺病毒與其他病毒工具比較,具有以下優(yōu)勢(shì):a.是研究原代非增殖細(xì)胞基因表達(dá)的*佳系統(tǒng):腺病毒感ran細(xì)胞后,1-2天即可表達(dá),是研究原代非增殖細(xì)胞基因表達(dá)的*佳系統(tǒng);b.滴度高:腺病毒系統(tǒng)在轉(zhuǎn)有E1基因的HEK293細(xì)胞中可進(jìn)行自我復(fù)制,可產(chǎn)生滴度為1010到1011PFU/mL的病毒;c.載體容量大:可容納不超過(guò)5kb的片段;d.不整合到染色體中,無(wú)插入致突變性:腺病毒除卵細(xì)胞以外,幾乎在所有已知細(xì)胞中都不整合到染色體中,因此避免了因整合而引發(fā)的潛在的基因突變和隨機(jī)效應(yīng)。

AAV在基因傳遞和表達(dá)的優(yōu)勢(shì)1.宿主范圍廣:隨時(shí)可轉(zhuǎn)染的 AAV 可高效感ran分裂和非分裂細(xì)胞;2.多種血清型 :AAV1,AAV2, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8 和 AAV9 等;3.安全性高:ITR 序列和 rep/cap 基因分別由獨(dú)li的質(zhì)粒表達(dá);未發(fā)現(xiàn) AAV 對(duì)人體致 病,rAAV 去除了 wtAAV 基因組的96%,進(jìn)一步保證了安全性;4.免疫原性低:AAV2 的基因組jin 4681 個(gè)核苷酸,便于用常規(guī)的重組 DNA 技術(shù)進(jìn)行操作,而且進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)造成的免疫反應(yīng)小;5.擴(kuò)散性強(qiáng):AAV可以穿透血腦屏障,是*理想的神經(jīng)元和膠質(zhì)神經(jīng)下感ran工具。 CCK-8法的檢測(cè)靈敏度很高,甚至可以測(cè)定較低細(xì)胞密度。

ELISA試劑盒在國(guó)內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見(jiàn)的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等。ELISA試劑盒自從60-70年代問(wèn)世以來(lái),得到全世界科研工作者的認(rèn)可及推崇,在歐美及中國(guó)獲得很大的推廣,尤其是國(guó)內(nèi)生化領(lǐng)域的長(zhǎng)足發(fā)展。Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA檢測(cè)試劑盒適用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測(cè)。多重PCR允許通過(guò)在單個(gè)反應(yīng)混合物中使用多個(gè)引物對(duì)在單個(gè)PCR反應(yīng)中擴(kuò)增兩個(gè)或更多個(gè)基因。二抗

堿性磷酸酶染色測(cè)定試劑盒經(jīng)過(guò)優(yōu)化,可檢測(cè)PSC中的堿性磷酸酶?;盍z測(cè)

宿主細(xì)胞蛋白(hostcellprotein,HCP)是指生物制品中來(lái)自生產(chǎn)細(xì)胞系的宿主細(xì)胞的蛋白成分,既包括宿主細(xì)胞的結(jié)構(gòu)蛋白也包括宿主細(xì)胞(傳代細(xì)胞)分泌的促生長(zhǎng)因子等。HCP具有潛在的安全風(fēng)險(xiǎn),作為生物制品中的非目標(biāo)成分,HCP可能引發(fā)機(jī)體未知的免疫應(yīng)答而影響生物制品的功效,甚至引起超敏反應(yīng)或其他不良反應(yīng)。因此,建立合適的HCP檢測(cè)方法,有助于生物制品的質(zhì)量控制,提高生物制品的使用安全性。所有生物制劑的工藝開(kāi)發(fā)的都必須經(jīng)過(guò)HCP檢測(cè),并證明已在純化過(guò)程中將它們降低到安全水平,一般要求每mg藥物HCP應(yīng)當(dāng)控制在ng范圍內(nèi)?;盍z測(cè)

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1、原代細(xì)胞:ScienCell(中國(guó)區(qū)正規(guī)一級(jí)代理)人源和動(dòng)物源各種原代細(xì)胞。

2、培養(yǎng)基:原代細(xì)胞**低血清、無(wú)血清、無(wú)異源蛋白無(wú)動(dòng)物成分培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞生長(zhǎng)因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細(xì)胞裂解物等。

4、細(xì)胞系(株):種類豐富(1000余種),已通過(guò)STR鑒定;提供細(xì)胞株完全培養(yǎng)基。

5、自研產(chǎn)品:支原體檢測(cè)/qing除試劑盒、端粒酶檢測(cè)試劑盒、人源/動(dòng)物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品。

6、技術(shù)服務(wù):綠/紅色熒光蛋白標(biāo)記、熒光素酶標(biāo)記、慢bing毒介導(dǎo)基因沉默或過(guò)表達(dá)及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建,細(xì)菌基因敲除、細(xì)胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學(xué)實(shí)驗(yàn)。