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江西大鼠原代肝細(xì)胞種類

來源: 發(fā)布時間:2022-07-27

    肝臟原位灌注法:(為分離肝細(xì)胞的經(jīng)典方法)1,在38度-39度的水浴槽中預(yù)熱hepes緩沖液和膠原酶液,使其在肝內(nèi)達(dá)到37度。2,給大鼠(180-200g)腹腔注射巴比妥鈉100ul/100g,從古靜脈注射肝素1000u,打開腹腔,在門靜脈的肝外5mm處松松的放一個結(jié)扎線環(huán),將血管套管插入至肝掌,結(jié)扎,快速切開肝下血管與面壓力過高,關(guān)注500ml無鈣hepes緩沖液,流速為30ml/min,數(shù)秒鐘肝臟即變白。3,灌注300ml膠原酶液,流速15ml/min,持續(xù)20min。肝臟腫大。4,切下肝臟。用hepes緩沖液沖洗。切開肝纖維囊,收集消化清洗液被并混入100mlleibovitzL15培養(yǎng)液,該懸液含大量肝細(xì)胞。5,用兩層紗布或60-80um尼龍篩過濾細(xì)胞懸液,靜置,使活細(xì)胞沉降20分,室溫下,去除含組織碎屑和死細(xì)胞的上清液。6,低速離心法清洗細(xì)胞50g40s三次以去除膠原酶,破壞的細(xì)胞以及肺肝實質(zhì)來源的細(xì)胞。7,將細(xì)胞收集在培養(yǎng)液F12中(含,10ug/ml牛胰島素,),co2孵箱內(nèi)培養(yǎng)。8,傳代培養(yǎng):細(xì)胞長滿時,先用BSS洗1-2次,再用1:1的,吸除消化液,輕輕洗細(xì)胞層,加適量培養(yǎng)液,用吸管吹打成細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)。通常從一個大鼠肝中可獲得4*10‘6-6*10’6個活細(xì)胞。 上海中喬新舟 原代肝細(xì)胞安心售后。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!江西大鼠原代肝細(xì)胞種類

    細(xì)胞培養(yǎng)是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究常用的手段之一,可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩種。原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取組織或的一部分進(jìn)行培養(yǎng),也稱初代培養(yǎng)。嚴(yán)格地說即從體內(nèi)取出組織接種培養(yǎng)到次傳代階段,但實際上,通常把代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。一般持續(xù)1-4周。此期細(xì)胞呈活躍的移動,可見細(xì)胞分裂,但不旺盛。原代培養(yǎng)細(xì)胞與體內(nèi)原組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動上相似性大。由于培養(yǎng)的細(xì)胞剛剛從組織分離出來,故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細(xì)胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段。同時也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。原代培養(yǎng)的過程指動物的組織或從機(jī)體取出后,經(jīng)機(jī)械法或各種酶類(常用胰蛋白酶)和鰲合劑(常用EDTA)處理,使之分散成單個細(xì)胞,加入適量培養(yǎng)基,置于合適的培養(yǎng)容器中,在無菌、適當(dāng)溫度和一定條件下,使之生存、生長和繁殖的過程。 內(nèi)蒙古鴨 野鴨原代肝細(xì)胞種類原代肝細(xì)胞的價格分析。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!

    注意事項1.取材要求新鮮,無菌,解剖小鼠時,注意不要損傷脾臟及其周圍的臟器,尤其是腸道等,防止污染脾臟。2.沖洗脾臟時要盡量洗凈血污,去除無用組織,并要防止組織干燥。3.碾磨后及時用清水沖洗篩網(wǎng),防止組織、細(xì)胞阻塞網(wǎng)孔。4.計數(shù)前,注意吸盡平皿里的細(xì)胞,充分混勻,使細(xì)胞分散成單個細(xì)胞。5.實驗操作應(yīng)在操作臺無菌區(qū)域內(nèi)進(jìn)行,勿在邊緣非無菌區(qū)域操作。6.金屬器械不能在火焰中燒的時間過長,燒過的金屬鑷要待冷卻后才能挾取組織,以免造成組織損傷。7.另外膠塞過火焰時也不能時間長,以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體,危害培養(yǎng)細(xì)胞。8.吸取過營養(yǎng)液后的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管頭中營養(yǎng)液能燒焦形成炭膜,再用時會把有害物帶入營養(yǎng)液中。

    藥物性肝損傷(DILI)是臨床常見的肝損傷類型,是嚴(yán)重的藥物不良反應(yīng)之一。細(xì)胞死亡是DILI的重要特征,藥物可通過誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和死亡受體等方式凋亡通路,誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡或壞死,誘發(fā)肝損傷。除凋亡和壞死外,DILI過程中還伴隨著自噬、焦亡和鐵死亡。自噬可以去除受損的蛋白質(zhì)以及細(xì)胞器,是肝細(xì)胞存活的重要機(jī)制,但也可能誘導(dǎo)肝細(xì)胞死亡。焦亡和鐵死亡是近發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞死亡方式,其在DILI中的作用尚未完全闡明。阻斷肝細(xì)胞死亡通路,是DILI的重要手段。水飛薊素、柚皮素、人參皂苷等可以抑制肝細(xì)胞死亡通路,是DILI的潛在藥。針對不同細(xì)胞死亡方式的機(jī)制和特點,研究改善肝細(xì)胞死亡的藥物對DILI具有重要意義??偨Y(jié)了DILI中肝細(xì)胞死亡的機(jī)制,并論述了潛在的藥物。 原代肝細(xì)胞的生產(chǎn)廠家。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!

小鼠原代肝細(xì)胞的形態(tài)學(xué)觀察本實驗在Seglen兩步灌流法的基礎(chǔ)上改進(jìn),平均每只小鼠肝臟可獲得3×107~5×107個細(xì)胞。臺盼藍(lán)染色結(jié)果顯示,即時分離的原代肝細(xì)胞活率可達(dá)到85%~90%。即時分離的原代肝細(xì)胞胞體呈圓形或類圓形,多為單核或雙核,細(xì)胞間邊界清晰(圖1A)。接種后的肝細(xì)胞4h開始貼壁,24h大部分肝細(xì)胞貼壁,細(xì)胞形態(tài)多呈多角形或不規(guī)則形,細(xì)胞核大而圓,可見明顯的雙核或多核,細(xì)胞有向外延展趨勢,細(xì)胞間邊界不清(圖1B)。此外,按上述方法分離出的原代肝細(xì)胞在體外可存活1周左右,其中3~5d狀態(tài)比較好,第6天開始細(xì)胞凋亡增加 原代肝細(xì)胞的定制尺寸。歡迎來電咨詢上海中喬新舟!內(nèi)蒙古鴨 野鴨原代肝細(xì)胞種類

原代肝細(xì)胞的廠家哪個好?上海中喬新舟告訴您。江西大鼠原代肝細(xì)胞種類

    肝臟,是脊椎動物體內(nèi)以代謝功能為主的,也是人的五臟之一。肝臟能促使一些有毒物質(zhì)的改進(jìn),再排泄體外,從而起到作用。它是人體內(nèi)的一座“化工廠”,是新陳代謝的重要。但同時,肝臟也十分脆弱,過度的酒精、藥物帶來的毒性也會對其造成不可逆的損傷。因此無論在疾病研究、藥物研發(fā),或是環(huán)境安全等的研究中,對肝臟進(jìn)行研究都至關(guān)重要。在這些研究中使用原代肝細(xì)胞,往往是比較好的選擇。因為原代細(xì)胞離體時間短,保持了其在體內(nèi)的生物學(xué)特性,更接近體內(nèi)環(huán)境的研究模型。同時也無須擔(dān)心動物實驗的倫理問題,亦可減少動物實驗所需要的的成本開支,實現(xiàn)了減少(Reduction)、替代(Replacement)、優(yōu)化(Refinement)的3R倫理原則。 江西大鼠原代肝細(xì)胞種類

上海中喬新舟生物科技有限公司

1、原代細(xì)胞:ScienCell(中國區(qū)正規(guī)一級代理)人源和動物源各種原代細(xì)胞。

2、培養(yǎng)基:原代細(xì)胞**低血清、無血清、無異源蛋白無動物成分培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細(xì)胞實驗檢測試劑盒、細(xì)胞生長因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細(xì)胞裂解物等。

4、細(xì)胞系(株):種類豐富(1000余種),已通過STR鑒定;提供細(xì)胞株完全培養(yǎng)基。

5、自研產(chǎn)品:支原體檢測/qing除試劑盒、端粒酶檢測試劑盒、人源/動物源ELISA試劑盒等系列產(chǎn)品。

6、技術(shù)服務(wù):綠/紅色熒光蛋白標(biāo)記、熒光素酶標(biāo)記、慢bing毒介導(dǎo)基因沉默或過表達(dá)及穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建,細(xì)菌基因敲除、細(xì)胞基因敲除、小鼠基因敲除、血管生成功能學(xué)實驗。