原代肝細胞是簡單有效的生物體外模型。相比于其他類型誘導產(chǎn)生的肝臟細胞或是cancer細胞系,原代肝細胞在造模的同時不需要復雜的對細胞進行重編程,以及誘導分化,可以更方便更快速的進行高通量藥理研究。此外和另外兩種方式相比,原代肝細胞能夠更準確的反應體內(nèi)的真實情況,有數(shù)據(jù)表明,原代肝細胞比iPSC誘導產(chǎn)生的肝細胞內(nèi)的堿基取代少數(shù)倍,同時這些細胞還保留了捐獻者的特有特征,是較為理想的研究模型。另一個優(yōu)勢在于,原代肝細胞衍生的Organoid可以提供獨特的肝毒模型,因為原代細胞保留了患者特有的I期II期藥物代謝情況。原代細胞不僅擁有捐贈者特有的生理特性,同時也具備其他兩種肝細胞在應對病原體時的生理反應。立沃原代肝細胞配套提供多種細胞培養(yǎng)實驗咨詢服務(wù),包括細胞培養(yǎng)實驗技術(shù)咨詢、細胞培養(yǎng)實驗數(shù)據(jù)解讀等。天津人原代肝細胞培養(yǎng)步驟
原代肝細胞可以用于乙肝病毒的對照試驗。為探究不同類型肝細胞對乙型肝炎病毒(HBV)的影響,以及不同藥物和生物學處理對HBV的影響,可以選擇了人原代肝細胞(PHH)樹鼩原代肝細胞(PTH)、hNTCP穩(wěn)定表達豬肝細胞(PPH-hNTCP)和hNTCP穩(wěn)定表達liver cancer細胞系(Huh7D-hNTCP)作為研究對象。 采用HBV模型,將不同類型肝細胞融合HBV,并進行藥物處理和生物學處理。藥物處理包括小分子化合物和中藥提取物等,生物學處理包括過表達、敲除siRNA和shRNA等。通過對處理后的細胞進行評價,可以了解不同藥物和生物學處理對HBV的影響。 這種研究方法的意義在于探究不同類型肝細胞對HBV的影響,為研究HBV的機制提供重要的實驗數(shù)據(jù)。同時,本研究還可以為開發(fā)新型抗HBV藥物提供參考,為臨床克服乙型肝炎提供新的思路和方法。食蟹猴原代肝細胞原代培養(yǎng)原代肝細胞可以用于研究肝臟的再生和修復,可以幫助人們更好地了解肝臟移植和liver cance。
原代肝細胞的體外擴增不是一件容易的事。原代肝細胞是一種非常重要的細胞類型,具有豐富的酶系和多種特異性功能,因此被大量用于生物化學、實驗性肝損傷、藥代動力學、毒理學和cancer等研究。然而,這些細胞在體外的存活能力非常有限,所以分離并培養(yǎng)出高活性的原代肝細胞并不是一件容易的事情。 分離高質(zhì)量的原代肝細胞,需要采用一系列復雜的技術(shù)和方法。首先,需要選擇合適的動物模型,以獲得足夠數(shù)量的肝組織。然后,需要對肝組織進行消化和分離,通常使用的方法包括機械分離、膠原酶消化、胰蛋白酶消化等。在分離過程中,需要注意避免對細胞的損傷,以保證細胞的活力和功能完整性。 分離出的原代肝細胞也需要按照嚴格的標準進行培育。原代肝細胞需要在適當?shù)呐囵B(yǎng)基中進行培養(yǎng),以提供必要的營養(yǎng)和生長因子。在培養(yǎng)過程中,需要注意細胞的密度、溫度、氧氣濃度、pH值等因素,以保證細胞的正常生長和分化。此外,還需要添加適當?shù)乃幬锖突衔?,以模擬體內(nèi)的生理環(huán)境和病理狀態(tài),以便進行相關(guān)研究。 分離并培養(yǎng)出高活性的原代肝細胞是進行肝臟相關(guān)研究的關(guān)鍵步驟之一。雖然這個過程非常復雜和困難,但是通過不斷的努力和創(chuàng)新,我們相信會有更多的突破和進展。
原代肝細胞的來源供體來源很多。鑒于人原代肝細胞存在數(shù)量稀缺和倫理道德等問題,研究人員嘗試從動物肝臟中分離原代肝細胞,用來體外培養(yǎng)并進行研究。使用較多的是嚙齒動物,還有一些哺乳動物和魚類。目前常用的供體品系有樹鼩、大小鼠、豬、新西蘭兔、比格犬、貓、牛、羊、雞、鴨、鵝、魚等。 原代肝細胞除了供體品系不同以外,也會根據(jù)細胞來源的供體數(shù),分為單供體和多供體。供體數(shù)的選擇主要取決于實驗的研究目的。 原代肝細胞的應用場景也很多。隨著技術(shù)水平的不斷提高,原代培養(yǎng)的動物和人肝細胞已廣泛應用于藥物研究:①探討藥物在肝中的代謝途徑和藥物藥代動力學的研究;②預測和解釋藥物與藥物之間的相互作用;③研究藥物的細胞毒性等。原代肝細胞是一種重要的研究工具,可以為肝臟疾病的研究和攻克提供有力的支持。
原代肝細胞體外培養(yǎng)一般培養(yǎng)在瓶皿等容器中,根據(jù)它們是否能貼附在支持物上生長的特性,可分為懸浮型和貼壁型兩大類。 原代肝細胞懸浮生長時可以呈單個細胞或細小的細胞團,胞體為圓形。其優(yōu)點是在培養(yǎng)液中生長,生存空間大,允許長時間生長,便于大量繁殖。正常貼壁原代肝細胞具有接觸抑制和密度抑制的雙重特性,細胞相互接觸后可抑制細胞的運動,因此細胞不會相互重疊于其上面生長。細胞生長、匯合成片后,雖發(fā)生接觸抑制,但只要營養(yǎng)充分,仍可增殖分裂,但當細胞數(shù)量達到一定密度后,由于營養(yǎng)的枯竭和代謝物的影響,細胞分裂停止,稱為密度抑制。 當肝細胞被分離后,可以進行懸浮培養(yǎng)或貼壁培養(yǎng)。懸浮培養(yǎng)的原代肝細胞在開始的4~6h內(nèi)細胞色素P450酶的活性和體內(nèi)一致,隨時間的延長而迅速下降,故懸浮肝細胞一般用于代謝穩(wěn)定性研究或代謝物譜研究。貼壁培養(yǎng)的原代肝細胞有足夠的時間從損傷中恢復過來,保持了正常肝細胞的生物學特征及代謝活性,一般用于酶誘導研究、藥物細胞毒性研究、慢代謝藥物的代謝穩(wěn)定性或產(chǎn)物推斷研究。立沃生物的原代肝細胞配套提供多種細胞培養(yǎng)技術(shù)培訓服務(wù),包括細胞培養(yǎng)技術(shù)培訓、細胞培養(yǎng)實驗指導等。上海豬原代肝細胞實驗
立沃生物的原代肝細胞的分離技術(shù)門檻很高,需要特定的實驗室條件和技術(shù),嚴格的實驗室管理和質(zhì)量控制。天津人原代肝細胞培養(yǎng)步驟
原代肝細胞是一種非常重要的細胞類型。原代肝細胞是從新鮮的肝臟組織中分離出來的,具有高度的生物學活性和功能性,可以用于許多不同的應用,包括藥物代謝和毒性測試、肝細胞疾病研究、肝細胞移植等。 原代肝細胞與其他肝細胞模型相比具有許多優(yōu)勢。原代肝細胞是從新鮮的肝臟組織中分離出來,具有更高的生物學活性和功能性,這意味著原代肝細胞可以更好地模擬人體肝臟的生理和代謝過程,因此更適合用于藥物代謝和毒性測試。這些細胞可以幫助研究人體對藥物的反應,以及藥物對肝臟的影響。 原代肝細胞可以用于研究肝細胞疾病,如肝病、肝硬化等。這些疾病對人類健康造成了極大的威脅,因此研究這些疾病的機制非常重要。原代肝細胞可以提供一個更真實的模型,幫助科學家更好地理解這些疾病的發(fā)生和發(fā)展過程。 此外,原代肝細胞還可以用于肝細胞移植。肝細胞移植是一種克服肝臟疾病的方法,可以幫助患者恢復肝臟功能。原代肝細胞可以用于移植,以幫助患者恢復健康。 原代肝細胞是一種非常重要的細胞類型,可以用于藥物代謝和毒性測試、肝細胞疾病研究、肝細胞移植等,為人類健康做出了重要的貢獻。天津人原代肝細胞培養(yǎng)步驟