原代肝細胞的體外培養(yǎng)和研究有著很大的應用范圍。原代肝細胞(Primary hepatocytes)是指從動物肝臟取出后立即培養(yǎng)的肝細胞。原代肝細胞作為一種體外模型，具有其它體外模型不可替代的優(yōu)點：1.與體內環(huán)境保持一致，酶量和輔助因子水平都是正常的生理濃度，可以在接近生理狀態(tài)的的情況下研究藥物的代謝和毒性；2.較好保留和維持了肝細胞的完整形態(tài)和肝細胞體外代謝活性，真實反應了體內的代謝情況。3.隨著技術水平的不斷提高，原代培養(yǎng)的動物和人肝細胞已廣泛應用于藥物研究：4.探討藥物在肝中的代謝途徑和藥物藥代動力學的研究；5.評價藥物和外源性物質對肝臟中細胞色素P450酶誘導作用并探討其誘導機制；6.預測和解釋藥物與藥物之間的相互作用；7.研究藥物的細胞毒性等。因此了解或者掌握原代肝細胞體外培養(yǎng)和研究的相關技術對于提升相關試驗的成功率非常有幫助。原代肝細胞擁有肝臟的特性和功能，可以用于研究肝臟疾病的細胞信號傳導和細胞增殖，是有效的體外實驗模型。江蘇牛原代肝細胞種類

原代肝細胞體外培養(yǎng)一般培養(yǎng)在瓶皿等容器中，根據它們是否能貼附在支持物上生長的特性，可分為懸浮型和貼壁型兩大類。 原代肝細胞懸浮生長時可以呈單個細胞或細小的細胞團，胞體為圓形。其優(yōu)點是在培養(yǎng)液中生長，生存空間大，允許長時間生長，便于大量繁殖。正常貼壁原代肝細胞具有接觸抑制和密度抑制的雙重特性，細胞相互接觸后可抑制細胞的運動，因此細胞不會相互重疊于其上面生長。細胞生長、匯合成片后，雖發(fā)生接觸抑制，但只要營養(yǎng)充分，仍可增殖分裂，但當細胞數量達到一定密度后，由于營養(yǎng)的枯竭和代謝物的影響，細胞分裂停止，稱為密度抑制。 當肝細胞被分離后，可以進行懸浮培養(yǎng)或貼壁培養(yǎng)。懸浮培養(yǎng)的原代肝細胞在開始的4~6h內細胞色素P450酶的活性和體內一致，隨時間的延長而迅速下降，故懸浮肝細胞一般用于代謝穩(wěn)定性研究或代謝物譜研究。貼壁培養(yǎng)的原代肝細胞有足夠的時間從損傷中恢復過來，保持了正常肝細胞的生物學特征及代謝活性，一般用于酶誘導研究、藥物細胞毒性研究、慢代謝藥物的代謝穩(wěn)定性或產物推斷研究。浙江新西蘭兔原代肝細胞購買立沃生物科技有限公司的原代肝細胞是一種擁有肝臟組織特點與特性的的細胞產品，具有不錯的應用前景。

在原代肝細胞培養(yǎng)過程中，如何避免污染？在原代肝細胞培養(yǎng)過程中，避免污染是非常重要的，以下是一些避免污染的方法：1.嚴格遵守無菌操作：在進行原代肝細胞培養(yǎng)前，需要對所有設備和材料進行嚴格的無菌處理，并在操作過程中嚴格遵守無菌操作規(guī)范，避免細菌和其他微生物的污染。2.使用無菌技術：在進行原代肝細胞培養(yǎng)時，需要使用無菌技術，例如使用無菌培養(yǎng)皿、無菌吸管、無菌手套等，以避免污染。3.保持培養(yǎng)環(huán)境清潔：培養(yǎng)環(huán)境的清潔度對原代肝細胞的培養(yǎng)非常重要。需要定期清潔培養(yǎng)室和培養(yǎng)設備，并保持室內通風良好。4.控制人員流動：在培養(yǎng)過程中，需要控制人員流動，盡量減少人員進出培養(yǎng)室，以避免污染。5.使用無菌培養(yǎng)基：使用無菌培養(yǎng)基可以避免培養(yǎng)基中的細菌和其他微生物的污染。6.定期檢查：定期檢查培養(yǎng)物的生長情況和污染情況，及時發(fā)現和處理污染。

    原代肝細胞的分離方法有很多種，以下是其中幾種常見的方法：1.膠原酶消化法：膠原酶是一種使用廣的細胞分離酶，可以消化肝細胞外基質中的膠原蛋白，從而使肝細胞分離出來。該方法通常使用膠原酶消化肝臟組織，然后通過離心和過濾等步驟分離肝細胞。2.機械分離法：機械分離法是一種通過物理方法分離肝細胞的方法。該方法通常使用攪拌器、濾網或離心等設備將肝臟組織中的肝細胞分離出來。3.酶消化結合機械分離法：這種方法是將膠原酶消化和機械分離相結合的方法。該方法通常先使用膠原酶消化肝臟組織，然后通過機械分離的方法將肝細胞分離出來。4.密度梯度離心法：密度梯度離心法是一種通過離心的方法分離肝細胞的方法。該方法通常使用密度梯度介質（如Percoll或Ficoll）將肝細胞分離出來。以上是幾種常見的原代肝細胞分離方法，不同的方法適用于不同的實驗需求和研究目的。在選擇分離方法時，需要考慮肝臟組織的來源、肝細胞的數量和質量、實驗目的等因素。 原代肝細胞可以用于新藥研發(fā)企業(yè)有關藥物代謝、毒理、靶向誘導相關的實驗，是有效的體外實驗模型。

原代肝細胞也可以用于Organ-on-a-chip的構建。Organ-on-a-chip是一項創(chuàng)新性的科技成果，它在載玻片大小的芯片上構建了一個完整的生理組織微系統(tǒng)，其中包含有原代肝細胞、肝非實質細胞、生物流體和機械力所需微環(huán)境的關鍵要素。這個微型肝臟模型可以在體外模擬人體肝臟的主要結構功能特征和復雜的組織間聯(lián)系，為藥物藥效評價、藥物安全性評價、化妝品安全性評價、食品安全性評價、環(huán)境保護評價等提供了一種全新的方法和手段。 這個微型肝臟模型的研發(fā)，是在對傳統(tǒng)的肝臟模型進行改進和創(chuàng)新的基礎上實現的。傳統(tǒng)的肝臟模型通常是基于動物實驗或體外細胞培養(yǎng)的方法，但這些方法存在著很多的局限性和缺陷。例如，動物實驗不僅存在著倫理和道德問題，而且還存在著種屬差異、生理反應差異等問題；而體外細胞培養(yǎng)則存在著細胞失活、細胞分化等問題。因此，Organ-on-a-chip的出現，填補了這些傳統(tǒng)方法的空白，為科學研究和工業(yè)應用提供了更加可靠和有效的手段。人原代肝細胞保留了細胞在體內環(huán)境里的功能與特性，是較為接近臨床的一種標準體外短期培養(yǎng)模型。湛江大鼠原代肝細胞

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    在進行原代肝細胞培養(yǎng)時，是否需要添加血清？在進行原代肝細胞培養(yǎng)時，通常需要添加血清。血清是一種含有多種營養(yǎng)物質和生長因子的液體，可以提供細胞生長所需的營養(yǎng)和生長因子，促進細胞的生長和增殖。血清中含有多種蛋白質、氨基酸、維生素、礦物質等營養(yǎng)物質，可以為細胞提供能量和營養(yǎng)，促進細胞的生長和增殖。此外，血清中還含有多種生長因子，如胰島素、表皮生長因子等，可以促進肝細胞的分化和增殖。然而，血清中也含有一些雜質和微生物，可能會對細胞的生長和功能產生不利影響。因此，在使用血清時，需要選擇高質量的血清，并對血清進行嚴格的質量控制和檢測，以確保血清的質量和安全性。此外，在進行原代肝細胞培養(yǎng)時，也可以使用無血清培養(yǎng)基或低血清培養(yǎng)基。無血清培養(yǎng)基或低血清培養(yǎng)基中不含有或含有較少的血清成分，可以減少血清對細胞的影響，提高細胞的純度和穩(wěn)定性。但是，無血清培養(yǎng)基或低血清培養(yǎng)基的成本較高，需要根據實驗目的和經濟條件來選擇?？傊?，在進行原代肝細胞培養(yǎng)時，通常需要添加血清。在選擇血清時，需要選擇高質量的血清，并對血清進行嚴格的質量控制和檢測。此外，也可以選擇無血清培養(yǎng)基或低血清培養(yǎng)基，以減少血清對細胞的影響。 江蘇牛原代肝細胞種類