原代肝細(xì)胞研究歷史可以追溯到20世紀(jì)初。當(dāng)時,科學(xué)家們開始對肝臟的結(jié)構(gòu)和功能進(jìn)行深入研究,并嘗試從肝臟中分離出原代肝細(xì)胞進(jìn)行研究。早期的研究方法是通過肝臟切片的方式來分離出肝細(xì)胞,但是這種方法存在很多局限性,比如細(xì)胞的存活率很低,細(xì)胞的數(shù)量也很有限。 隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步,科學(xué)家們開始嘗試使用酶解法來分離原代肝細(xì)胞。這種方法可以有效地提高細(xì)胞的存活率和數(shù)量,但是由于酶的質(zhì)量和濃度的不同,細(xì)胞的質(zhì)量和純度也存在很大的差異。 在20世紀(jì)50年代,科學(xué)家們開始使用離心法來分離原代肝細(xì)胞。這種方法可以有效地提高細(xì)胞的純度和數(shù)量,但是由于離心過程中細(xì)胞受到的力的不同,細(xì)胞的形態(tài)和功能也會發(fā)生改變。 隨著細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的不斷發(fā)展,科學(xué)家們開始嘗試使用原代肝細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)。這種方法可以使細(xì)胞在體外繼續(xù)生長和分化,從而更好地研究肝細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能。但是由于原代肝細(xì)胞的生長和分化受到很多因素的影響,比如培養(yǎng)基的成分、pH值、溫度等,因此細(xì)胞的生長和分化也存在很大的差異。 隨著技術(shù)的不斷發(fā)展,相信原代肝細(xì)胞研究會越來越深入,為人類健康事業(yè)做出更大的貢獻(xiàn)。立沃生物的原代肝細(xì)胞可以配套提供多種細(xì)胞凍存設(shè)備支持,包括程序降溫儀,低溫液氮罐等。佛山羊原代肝細(xì)胞分離培養(yǎng)
貼壁培養(yǎng)是一種常用的細(xì)胞培養(yǎng)方法,可以使原代肝細(xì)胞在培養(yǎng)皿表面附著生長,形成單層細(xì)胞群落。原代肝細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)需要注意以下幾點: 1. 分離和準(zhǔn)備細(xì)胞:從新鮮的動物肝臟中分離出原代肝細(xì)胞后,需要進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)和質(zhì)量檢測,確保細(xì)胞數(shù)量和質(zhì)量符合要求。 2. 培養(yǎng)基的選擇:原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)基需要選擇適合其生長和代謝的培養(yǎng)基,常用的培養(yǎng)基包括DMEM、RPMI-1640等。 3. 培養(yǎng)皿的涂層:為了使原代肝細(xì)胞能夠附著生長,需要在培養(yǎng)皿表面涂層一定濃度的膠原蛋白、明膠或者其他細(xì)胞黏附因子。 4. 細(xì)胞接種和培養(yǎng):將準(zhǔn)備好的原代肝細(xì)胞接種到涂層好的培養(yǎng)皿中,加入適量的培養(yǎng)基,放入恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。需要注意的是,原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)時間較短,一般在3-5天左右,因此需要及時更換培養(yǎng)基和進(jìn)行細(xì)胞觀察。 原代肝細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)可以通過在培養(yǎng)皿上加一定的的吸附涂層來達(dá)到讓原代肝細(xì)胞快速貼壁的效果。惠州原代肝細(xì)胞培養(yǎng)技巧立沃原代肝細(xì)胞配套提供多種細(xì)胞培養(yǎng)實驗設(shè)計服務(wù),包括細(xì)胞培養(yǎng)實驗方案設(shè)計、細(xì)胞培養(yǎng)實驗數(shù)據(jù)分析等。
原代肝細(xì)胞是藥物代謝研究領(lǐng)域非常重要的體外模型。原代肝細(xì)胞作為藥物代謝研究的經(jīng)典模型,在探討藥物在肝中的代謝途徑和藥代動力學(xué)的研究中發(fā)揮著重要作用。將苗頭化合物與懸浮原代肝細(xì)胞共孵育,不但可對化合物在肝細(xì)胞中的代謝穩(wěn)定性進(jìn)行研究,而且還可得到相對多量的高純度的代謝產(chǎn)物,在研究藥物生物轉(zhuǎn)化特征,尋找藥物可能的代謝物方面具有很大的優(yōu)勢。尤其是當(dāng)有證據(jù)顯示化合物的生物轉(zhuǎn)化途徑為二相代謝、水解作用或肝微粒體中非特異性蛋白結(jié)合很高、肝微粒體中代謝不明顯的時候,原代肝細(xì)胞更為不可替代的體外模型。
原代肝細(xì)胞的體外培養(yǎng)一直是困擾學(xué)者們開展肝病研究的難題。為了研究肝臟的生理和病理過程,學(xué)者們一直在努力開發(fā)體外培養(yǎng)原代肝細(xì)胞的方法。 一般來說,原代肝細(xì)胞體外培養(yǎng)可以維持7-14天左右,7天以后細(xì)胞的狀態(tài)和活率會逐漸開始下降。 為了克服這些局限性,科學(xué)家們開始嘗試將肝實質(zhì)細(xì)胞和肝非實質(zhì)細(xì)胞共同培養(yǎng)。根據(jù)鄧宏魁教授的5C文章,將肝實質(zhì)細(xì)胞和肝非實質(zhì)細(xì)胞共同培養(yǎng)時,肝實質(zhì)細(xì)胞和肝非實質(zhì)細(xì)胞可以相互作用,形成更加復(fù)雜的細(xì)胞群體,從而更好地模擬肝臟的生理和病理過程,通過這種方法可以將原代肝細(xì)胞體外培養(yǎng)128天。 當(dāng)然,共同培養(yǎng)方法也存在一些局限性,比如如何控制細(xì)胞的生長和分化、如何保持細(xì)胞的穩(wěn)定性等。但是,隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步,相信這種方法將會越來越成熟,為研究肝臟生理和病理提供更加有效的手段。立沃生物原代肝細(xì)胞可以用于肝臟疾病研究、藥物代謝和藥物毒性、篩選藥物和測試藥物的毒性等方面的研究。
解決人工肝臟合成難題,原代肝細(xì)胞是理想的肝細(xì)胞源。目前,常用的肝細(xì)胞源有人原代肝細(xì)胞、動物原代肝細(xì)胞、liver cancer細(xì)胞系HepG2、HepaRG、永生化細(xì)胞以及干細(xì)胞等。其中,人原代肝細(xì)胞是理想的肝細(xì)胞源,因為它們具有完整的肝功能和生理特性,能夠更好地模擬人體肝臟的生理狀態(tài)。但是,由于人原代肝細(xì)胞的獲取和保存非常困難,且存在批次差異和有限的增殖能力,因此在實際應(yīng)用中受到了一定的限制。 相比之下,動物原代肝細(xì)胞則具有更好的增殖能力和更便捷的獲取方式,但是由于動物肝臟與人肝存在一定的差異,因此其在模擬人體肝臟生理狀態(tài)方面存在一定的局限性。HepG2和HepaRG則是常用的liver cancer細(xì)胞系,它們具有較好的增殖能力和穩(wěn)定性,但是存在致瘤風(fēng)險,因此在臨床應(yīng)用中需要謹(jǐn)慎使用。 永生化細(xì)胞則是通過基因工程技術(shù)將原代肝細(xì)胞轉(zhuǎn)化為無限增殖的細(xì)胞系,如HepG2.2.15和Huh7等。這些細(xì)胞系具有較好的增殖能力和穩(wěn)定性,但是存在一定的局限性和風(fēng)險。 綜上所述,原代肝細(xì)胞是理想的肝細(xì)胞源,選擇合適的肝細(xì)胞源需要綜合考慮其功能、增殖能力、安全性等因素,以期達(dá)到想要的生物人工肝效果。貼壁原代肝細(xì)胞主要用于肝臟再生研究、肝臟3D打印、肝臟疾病研究、HBV、HCV病毒研究等?;葜荽笫笤渭?xì)胞培養(yǎng)
人原代肝細(xì)胞的獲取和保存非常困難,且存在批次差異和有限的增殖能力,因此在實際應(yīng)用中受到了一定的限制。佛山羊原代肝細(xì)胞分離培養(yǎng)
原代肝細(xì)胞是指從動物或人體肝臟中分離出來的原始肝細(xì)胞,它們沒有經(jīng)過傳代培養(yǎng),保留了肝細(xì)胞的天然特性和功能。原代肝細(xì)胞在生物醫(yī)學(xué)研究中具有重要的應(yīng)用價值,例如:1.藥物代謝和毒性研究:原代肝細(xì)胞可以用于評估藥物的代謝和毒性,以及藥物對肝細(xì)胞的影響。2.肝臟疾病研究:原代肝細(xì)胞可以用于研究肝臟疾病的發(fā)生機(jī)制、病理生理學(xué)和***方法。3.生物制藥:原代肝細(xì)胞可以用于生產(chǎn)生物制藥,例如肝細(xì)胞生長因子和肝細(xì)胞的再生因子等。原代肝細(xì)胞的分離和培養(yǎng)技術(shù)比較復(fù)雜,需要嚴(yán)格的操作和控制條件,以確保肝細(xì)胞的存活率和功能。佛山羊原代肝細(xì)胞分離培養(yǎng)