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陜西嬰幼兒食品用左旋肉堿測定用試劑肉堿乙酰轉(zhuǎn)移酶

來源: 發(fā)布時間:2023-05-22

乙酰輔酶A的提取1、細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g4℃離心10min,取上清,置冰上待測。2、組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一),進行冰浴勻漿。8000g4℃離心10min,取上清,置冰上待測。測定步驟1、分光光度計預(yù)熱30min,用蒸餾水于340nm處調(diào)零。2、取920μL工作液和100μL樣本至1mL石英比色皿,混勻,立即記錄340nm處20s的吸光值A(chǔ)1和80s時的吸光值A(chǔ)2,計算ΔA=A2-A1上海普譽科貿(mào)有限公司是一家專業(yè)提供 左旋肉堿測定用的公司,價格實惠,有想法的不要錯過哦!陜西嬰幼兒食品用左旋肉堿測定用試劑肉堿乙酰轉(zhuǎn)移酶

法驗證參數(shù)

線性和線性范圍左旋肉堿標準儲備液濃度為80μg/mL。吸取0.5mL、1mL、2mL、3mL、5mL的左旋肉堿標準儲備液定容到25mL,經(jīng)過計算,該系列標準溶液中左旋肉堿的質(zhì)量濃度分別為1.6μg/mL、3.2μg/mL、6.4μg/mL、9.6μg/mL、16μg/mL。以左旋肉堿標準工作液的濃度為橫坐標,吸光值為縱坐標,制作標準曲線。標準曲線線性方程結(jié)果見表1。2.2檢出限和定量限左旋肉堿的檢出限采用空白標準偏差法評估,即通過分析大量(n≥10)樣品空白確定檢出限(LOD)。本次實驗通過10次樣品空白**測試,計算出檢測結(jié)果的算數(shù)平均值(X)和標準偏差(S)確定檢出限(LOD)。計算公式如下:LOD=X+3S上式中:LOD為方法檢出限(mg/100g);X為10次**空白平均值;S為10次**空白標準偏差。定量限(LOQ)的確定主要是從其可信性考慮,為了增加數(shù)據(jù)的可信性,將10倍的檢出限作為本檢驗方法的定量限。實驗結(jié)果見表2。當樣品稱樣量為5.0000g時,該方法的檢出限為0.187mg/100g,定量限為1.87mg/100g。 上海普譽公司左旋肉堿測定用試劑HEPES上海普譽科貿(mào)有限公司致力于提供 左旋肉堿測定用,價格實惠,有想法可以來我司咨詢!

1試驗方法——《食品安全國家標準嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定》(GB29989—2013)1.1原理概述將樣品中的蛋白質(zhì)用高氯酸溶液沉淀,過濾后的濾液用氫氧化鉀溶液皂化,使左旋肉堿游離。在乙酰肉堿轉(zhuǎn)移酶的催化作用下,游離的左旋肉堿和乙酰輔酶A反應(yīng)生成乙酰肉堿和游離的輔酶A。輔酶A和顯色劑發(fā)生顯色反應(yīng),可從工作曲線上查得相應(yīng)的質(zhì)量濃度,據(jù)此計算樣品中左旋肉堿的含量。1.2試驗用品1.2.1試劑和標準品13%的高氯酸溶液(HClO4);4mol/L的氫氧化鉀溶液(KOH);10mol/L的氫氧化鈉溶液(NaOH);2-硝基苯甲酸;N-2-羥乙基哌嗪-2-乙烷磺酸;乙二胺四乙酸二鈉;乙酰輔酶A(CoA);乙酰肉堿轉(zhuǎn)移酶(CAT)。其中,乙酰輔酶A(CoA)和乙酰肉堿轉(zhuǎn)移酶(CAT)需要在2~8℃的環(huán)境中保存。試驗用水均為三級水,所用試劑均為分析純。左旋肉堿標準品(C7H15NO3):純度≥98%。

CarnitineAcetyltransferasefrompigeonbreastmuscleProductDescriptionAcetyl-CoA:carnitineO-acetyltransferaseEC2.3.1.7Specificactivity:approx.80U/mgat25°CwithCoAandacetyl-D,L-carnitineasthesubstratesContentsSuspensionin2.9Mammoniumsulfatesolution,50mMK-phosphate,1mMEDTA,pHapproximay7.5QualityContaminants:<0.01%acetyl-CoA-deacylase上海普譽科貿(mào)有限公司

介紹:酶活定義:在pH8.0,溫度為25°C的條件下,一單位酶每分鐘可將1.0μmole的乙酰-L-左旋肉堿和輔酶A轉(zhuǎn)化為L-左旋肉堿和乙酰輔酶A。來源:鴿子胸肌儲存條件:2-8℃ 上海普譽科貿(mào)有限公司致力于提供 左旋肉堿測定用,價格實惠,有需要可以聯(lián)系我司哦!

乙酰輔酶A用于使用放射性同位素測定細胞提取物中的CAT酶活性。細胞提取物中的CAT酶活性催化乙?;鶑囊阴]o酶A轉(zhuǎn)移到氯霉素。已經(jīng)開發(fā)了許多測定來測量細胞提取物中的CAT活性。乙酰輔酶A也已用于測定檸檬酸合酶活性。生化/生理作用乙酰輔酶A(Ac-CoA)是糖酵解的**終產(chǎn)物,參與Ac-CoA途徑,這是碳化合物的代謝途徑。Ac-CoA在膽固醇合成中十分重要。它還參與脂肪酸的生物合成和多胺(如精胺和亞精胺)的分解代謝。低水平的Ac-CoA導致神經(jīng)膠質(zhì)細胞和神經(jīng)元功能的喪失。酮體和甘油三酯在水解時產(chǎn)生Ac-CoA,這間接導致組蛋白乙?;黾?。制備說明工作溶液:比較好溶劑:具有弱酸性pH(4至5)的水或水溶液。儲存條件(工作溶液):-15至-25°C50mg/ml磷酸鹽緩沖液,pH7,在-15至-25℃下,可穩(wěn)定保存3周。未凍存的溶液應(yīng)立即使用。左旋肉堿測定用,就選上海普譽科貿(mào)有限公司,歡迎新老客戶來電!安徽肉堿測定用左旋肉堿測定用試劑肉堿乙酰轉(zhuǎn)移酶

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GB 29989 嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定

2500835,5'-二硫代雙(2-硝基苯甲酸)99%(5,5′-Dithiobis(2-nitrobenzoicacid))CAS:69-78-35g/25g2

50022N-2-羥乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸HEPEScas:7365-45-925G/100g

280033乙酰輔酶AAcetylCoenzymeA(Acetyl-CoA)Tri-Li20mg,50mg,200mg

230057乙酰肉堿轉(zhuǎn)移酶5mg/1ml

嬰幼兒食品和乳品中膽堿的測定

250004三羥甲基氨基甲烷Tris(hydroxymethyl)aminomethane77-86-1250g

230048膽堿氧化酶>10u/mgCholineOxidaseforBiohemistry9028-67-5100U500U

230028過氧化物酶>180U/mgHorseradishPeroxidase9003-99-0100KU

2701024-氨基安替比林4-Aminoantipyrine83-07-825g

250053磷脂酶D≥60U/mgPhospholipaseDfromArachishypogaea(peanut)9001-87-02.5KU

250084膽堿酒石酸氫鹽、酒石酸氫膽堿CholineHydrogenL-(+)-Tartrate87-67-21g 陜西嬰幼兒食品用左旋肉堿測定用試劑肉堿乙酰轉(zhuǎn)移酶

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