在飼養(yǎng)體系里,科研人員們會(huì)準(zhǔn)確調(diào)控水的溫度、電導(dǎo)率等參數(shù),并設(shè)定固定的日常光照時(shí)刻,以保證斑馬魚能在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)大規(guī)模繁育,確保實(shí)驗(yàn)的有序進(jìn)行。儀器設(shè)備實(shí)驗(yàn)室除了先進(jìn)的飼養(yǎng)體系,還具有了先進(jìn)的正置熒光顯微鏡、熒光定量PCR儀、熒光酶標(biāo)儀、斑馬魚行為分析儀等檢測(cè)設(shè)備。斑馬魚成魚體長(zhǎng)5cm左右,其胚胎通明,在受精72h后完結(jié)孵化,并在孵出后3個(gè)月內(nèi)性成熟。成年斑馬魚的繁衍周期短(一般7d左右),若條件適宜,成年雌性斑馬魚可定期產(chǎn)卵(每次200~300個(gè))。在斑馬魚的前期胚胎及幼體的發(fā)育過(guò)程中,尚無(wú)性別分解,原始性腺都是相同的且具有雙向發(fā)育的潛能,易受環(huán)境(溫度、光照、pH值等)因素的影響而改變其遺傳性別。斑馬魚實(shí)驗(yàn)遵循 3R 原則,優(yōu)化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)減少動(dòng)物使用數(shù)量。斑馬魚魚房建造費(fèi)用
斑馬魚幼魚的社會(huì)行為研究為自閉癥譜系障礙(ASD)機(jī)制解析提供了新視角。美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院團(tuán)隊(duì)通過(guò)高通量行為分析系統(tǒng),發(fā)現(xiàn)敲除shank3b基因的斑馬魚幼魚在群體游動(dòng)中表現(xiàn)出社交回避行為,且多巴胺能神經(jīng)元突觸密度降低30%,與人類ASD患者病理特征高度相似。進(jìn)一步通過(guò)光遺傳學(xué)jihuo特定神經(jīng)環(huán)路,可部分逆轉(zhuǎn)斑馬魚的社交缺陷,提示多巴胺信號(hào)通路可能是ASD醫(yī)療的潛在靶點(diǎn)。該研究為開發(fā)非侵入性神經(jīng)調(diào)控療法提供了跨物種驗(yàn)證模型。斑馬魚養(yǎng)殖設(shè)備采購(gòu)斑馬魚受精后 24 小時(shí)形成完整organ,利于早期發(fā)育毒性評(píng)估。
在藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究方面,斑馬魚幼魚展現(xiàn)出獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。其肝臟代謝酶(如CYP3A65)與人類CYP3A4同源性達(dá)76%,且腸道屏障功能尚未完全建立,使得藥物吸收、分布、代謝過(guò)程可視化。瑞士諾華公司通過(guò)LC-MS/MS技術(shù)檢測(cè)斑馬魚幼魚體內(nèi)藥物濃度,發(fā)現(xiàn)某新型kang生素的生物利用度較傳統(tǒng)模型預(yù)測(cè)值高18%,該差異源于斑馬魚腸道中特異性轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá)差異。這一發(fā)現(xiàn)促使藥物劑型設(shè)計(jì)優(yōu)化,使候選藥物在II期臨床試驗(yàn)中的療效提升30%。斑馬魚在中藥毒性研究中的應(yīng)用日益寬泛。中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院團(tuán)隊(duì)通過(guò)斑馬魚胚胎熱休克蛋白(Hsp70)啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)熒光報(bào)告基因,構(gòu)建了中藥肝毒性的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)。實(shí)驗(yàn)顯示,含馬兜鈴酸的中藥復(fù)方可使斑馬魚胚胎肝臟區(qū)域熒光強(qiáng)度在24小時(shí)內(nèi)增加5倍,而傳統(tǒng)生化檢測(cè)需72小時(shí)才能達(dá)到相同靈敏度。該技術(shù)已應(yīng)用于中藥材質(zhì)量控制,成功識(shí)別出多批次含微量腎毒性成分的飲片,為中藥國(guó)際化提供了科學(xué)依據(jù)。
【試驗(yàn)計(jì)劃】咱們將受測(cè)試斑馬魚分成兩組,分別是正常對(duì)照和服用/打針供試品組(供試品經(jīng)過(guò)溶解到養(yǎng)魚用水中或打針的方法攝入到斑馬魚體內(nèi))。服用/打針?biāo)幬镆欢螘r(shí)間后,檢測(cè)尾長(zhǎng)、彗星長(zhǎng)、尾矩和Olive尾矩。能夠看到,服用/打針供試品組斑馬魚細(xì)胞核呈現(xiàn)拖尾。該供試品改變DNA鏈的負(fù)超螺旋結(jié)構(gòu)、空間構(gòu)象,使DNA鏈斷裂、形成類核,終究導(dǎo)致細(xì)胞逝世(壞死、凋亡或自體吞噬)?!军c(diǎn)評(píng)結(jié)論】1.經(jīng)過(guò)每組30尾斑馬魚的比照試驗(yàn),服用/打針供試品組的斑馬魚細(xì)胞核呈現(xiàn)顯著拖尾,與正常對(duì)照組存在顯著的差別。2.本試驗(yàn)證明了該供試品對(duì)斑馬魚有基因毒性。斑馬魚腸道菌群研究,助力解析微生物與宿主健康的互作關(guān)系。
【試驗(yàn)方案】咱們將受測(cè)試斑馬魚分成兩組,分別是正常對(duì)照組和供試品組(供試品通過(guò)溶解到養(yǎng)魚用水中攝入到斑馬魚體內(nèi))。皮膚吸收供試品一段時(shí)間后,咱們通過(guò)中性粒轉(zhuǎn)基因熒光斑馬魚,調(diào)查皮膚/肌肉刺激性;通過(guò)表型拍照,調(diào)查肌肉紋理及皮膚色素變化;通過(guò)AO染色凋亡細(xì)胞,調(diào)查皮膚細(xì)胞凋亡情況?!驹u(píng)價(jià)結(jié)論】1.通過(guò)每組30尾斑馬魚的比照試驗(yàn),供試品組的斑馬魚皮膚肌肉發(fā)生顯著的毒性表型(包括肌肉紋理反常和色素反常),在斑馬魚尾部可見顯著的凋亡細(xì)胞,在軀干部可見顯著的中性粒細(xì)胞合集。2.本試驗(yàn)證實(shí)了該供試品對(duì)斑馬魚有皮膚肌肉毒性。轉(zhuǎn)基因斑馬魚在環(huán)境監(jiān)測(cè)中用于檢測(cè)水中的污染物,具有重要應(yīng)用價(jià)值。斑馬魚房安裝
高通量篩選利用斑馬魚幼魚,能快速評(píng)估大量化合物的生物活性。斑馬魚魚房建造費(fèi)用
斑馬魚為tumor研究開辟了新的途徑,其獨(dú)特的生物學(xué)特性使tumor發(fā)生的發(fā)展機(jī)制的研究更加直觀和深入。斑馬魚的免疫系統(tǒng)和tumor微環(huán)境與人類具有一定的相似性,并且能夠通過(guò)基因編輯技術(shù)構(gòu)建多種tumor模型,如黑色素瘤、白血病等。在斑馬魚黑色素瘤模型中,通過(guò)將人類黑色素瘤相關(guān)基因?qū)氚唏R魚胚胎,能夠誘導(dǎo)斑馬魚產(chǎn)生黑色素瘤,研究人員可以實(shí)時(shí)觀察tumor細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲過(guò)程。此外,斑馬魚胚胎透明的特點(diǎn)使得利用活的體成像技術(shù)追蹤tumor細(xì)胞的動(dòng)態(tài)變化成為可能,能夠清晰地看到tumor細(xì)胞與周圍組織的相互作用以及血管生成等過(guò)程。通過(guò)對(duì)斑馬魚tumor模型的研究,發(fā)現(xiàn)了許多參與tumor發(fā)生的發(fā)展的關(guān)鍵信號(hào)通路和調(diào)控因子,為tumor的診斷和醫(yī)療提供了新的靶點(diǎn)和思路,同時(shí)也有助于評(píng)估新型抗tumor藥物的療效和毒性。斑馬魚魚房建造費(fèi)用