斑馬魚作為繼大小鼠后的第三模式生物，其與人類基因同源性高達87%，皮膚結(jié)構(gòu)與人類高度相似，且胚胎透明、發(fā)育周期短，成為化妝品功效評價的理想模型。根據(jù)《化妝品監(jiān)督管理條例》及國際3R原則，出生5天內(nèi)的斑馬魚胚胎不屬于動物實驗范疇，可替代哺乳動物測試，明顯降低倫理爭議和實驗成本。斑馬魚檢測具備高通量、可視化、高效率三大優(yōu)勢：單次實驗可處理數(shù)百條胚胎，結(jié)果通過顯微鏡或熒光標(biāo)記實時觀測；實驗周期只需3-7天，相比人體臨床測試縮短90%以上時間；成本只為傳統(tǒng)動物實驗的1/10，尤其適用于原料篩選、配方優(yōu)化等早期研發(fā)階段?；瘖y品實驗常用的斑馬魚品系有AB、TL和Tübingen等。化妝品原料體內(nèi)功效評價

盡管用于化妝品評價的創(chuàng)新模型和技術(shù)在不斷發(fā)展，但無論是斑馬魚模型、體外細胞模型還是皮膚器官芯片等均不能完全模擬體內(nèi)皮膚的真實結(jié)構(gòu)與功能，這使得離體皮膚評價模型逐漸進入人們的視野。離體皮膚也被稱為皮膚外植體，它是由人體來源的皮膚組織經(jīng)體外培養(yǎng)而獲得的模型[26]。離體皮膚通過適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)方式，可在體外維持一定的組織活力，目前，已被廣泛應(yīng)用于化妝品功效測評、傷口愈合、皮膚相關(guān)疾病的研究中。離體皮膚是接近健康和患病皮膚生理機能的模型，包含完整的皮膚細胞類群如角質(zhì)形成細胞、成纖維細胞、黑素細胞、朗格漢斯細胞;含有膠原蛋白、彈性蛋白、糖胺聚糖等細胞外基質(zhì);包含皮膚附屬物如汗腺等叨。本文將在下面章節(jié)重點概述離體皮膚模型及其在化妝品功效評價中的應(yīng)用。化妝品皮膚外植體試驗機構(gòu)人們渴望擁有明亮、均勻的肌膚，美白化妝品一直以來都備受關(guān)注。

環(huán)特化妝品CRO服務(wù)站結(jié)合拉曼光譜技術(shù)，從定性和定量的角度研究化妝品中活性成分在皮膚中的滲透特性，包括滲透深度及滲透量，為活性成分的作用機理研究提供一定技術(shù)支持。這不僅是拉曼技術(shù)在化妝品透皮吸收研究領(lǐng)域的創(chuàng)新應(yīng)用，更為活性成分在皮膚中的吸收動力學(xué)研究及配方優(yōu)化提供新的研究思路。經(jīng)過幾十年的發(fā)展，拉曼光譜技術(shù)已經(jīng)取得了巨大的進步，在不同領(lǐng)域中得到了廣泛的應(yīng)用。拉曼光譜在皮膚研究中有諸多應(yīng)用，包括皮膚成分分析，透皮吸收監(jiān)測和分析，皮膚病學(xué)中的診斷功能。利用拉曼光譜技術(shù)研究活性成分在皮膚中的滲透濃度分布，可以為產(chǎn)品優(yōu)化、功效評價等提供重要的數(shù)據(jù)支撐。未來，拉曼數(shù)據(jù)分析還可以結(jié)合人工智能實現(xiàn)更多跨場景應(yīng)用，在臨床及制藥相關(guān)領(lǐng)域，無損分析與監(jiān)測技術(shù)將會越來越受青睞。

研究人員發(fā)現(xiàn)，離體培養(yǎng)48小時的全層皮膚可保持屏障特性，且能對不同強度的屏障破壞做出反應(yīng)，使用膠帶剝離或4小時十二烷基硫酸鈉(SLS)處理通過破壞皮膚結(jié)構(gòu)、促進炎癥因子IL-6、IL-8的表達破壞皮膚屏障5]。使用1:1(v:v)乙mi:bing酮混合物對離體皮膚進行損傷造模，PPAR-α激動劑RFV3可通過增加神經(jīng)酰胺、絲聚蛋白和轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶1的表達來促進離體皮膚的屏障修護過程[”。離體皮膚模型還被用來評估清潔產(chǎn)品的功效，ZHOU等人通過對沐浴露A和沐浴露B處理的離體皮膚進行免疫熒光染色發(fā)現(xiàn)，與水對照和沐浴露A處理相比，經(jīng)沐浴露B處理的離體皮膚在處理7天后，顆粒層和角質(zhì)層中絲聚蛋白的表達明顯減少，證明沐浴露B對皮膚屏障具有破壞作用，此外，使用MTT檢測離體皮膚的組織活力也是用來評價皮膚屏障修護功效的重要指標(biāo)。通過長期的觀察和評估，可以了解化妝品的功效是否持久。

測試結(jié)果的科學(xué)解讀是化妝品人體淡斑美白功效測試的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。環(huán)特人體功效實驗室通過嚴謹?shù)臄?shù)據(jù)分析，將測試數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化為直觀且具有說服力的結(jié)論。通過對比試驗側(cè)與陰性對照側(cè)的皮膚黑色素含量、ITA 值及膚色視覺評分差值，以統(tǒng)計學(xué)方法（P＜0.001）驗證產(chǎn)品的明顯性差異。例如，若在 D28 回訪時，試驗側(cè)皮膚黑色素含量較陰性對照明顯下降，且 ITA 值明顯上升，則可科學(xué)判定產(chǎn)品具有淡斑美白、提亮的功效。這種基于數(shù)據(jù)的結(jié)論不僅為企業(yè)提供產(chǎn)品優(yōu)化方向，也為消費者選購提供了可信賴的參考依據(jù)，推動美白化妝品市場朝著更理性、科學(xué)的方向發(fā)展。斑馬魚是一種小型、易于繁殖的淡水魚類，其生命周期短且繁殖能力強，能夠在短時間內(nèi)進行大規(guī)模的實驗?；瘖y品功效離體皮膚檢測機構(gòu)

隨著科技的不斷進步，人體功效測試的方法和技術(shù)也在不斷創(chuàng)新?；瘖y品原料體內(nèi)功效評價

皮膚外用產(chǎn)品的制造、運輸和銷售需要事先進行安全性評估，并評估可能因預(yù)期用途、誤用、或意外皮膚暴露而導(dǎo)致的皮膚反應(yīng)。離體皮膚的另一重要應(yīng)用是評估皮膚外用產(chǎn)品的安全性和功效性，這包括日用品、化妝品、藥品、醫(yī)療器械等。BURGHER等人使用腹部整形手術(shù)獲取的人體皮膚外植體研究了氫氟酸的腐蝕性，他們發(fā)現(xiàn)70%的氯氟酸在作用的5分鐘內(nèi)即可完全穿透皮膚，這與之前研究的意外氫氟酸暴露的臨床結(jié)果是一致的均。研究人員在OECDTG439標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)之上，開發(fā)了使用離體皮膚模型評估化合物是否具有潛在刺激性的方法。通過對120種化妝品刺激離體皮膚的實驗結(jié)果與人體斑貼實驗結(jié)果進行對比，發(fā)現(xiàn)離體皮膚模型檢測的特異性為89.9%，準(zhǔn)確率為89.1%[46]。此外，科研人員還使用彗星實驗對手術(shù)獲得的離體皮膚進行了化合物遺傳毒性的評估，通過將離體皮膚局部暴露于20中化學(xué)物質(zhì)中，他們發(fā)現(xiàn)其遺傳毒性檢測的靈敏度、特異性和準(zhǔn)確性分別為89%、90%和89%切。這些結(jié)果均表明離體皮膚是外用產(chǎn)品刺激性、腐蝕性、遺傳毒性等評價的可靠模型，具有廣泛的應(yīng)用前景。化妝品原料體內(nèi)功效評價