培養(yǎng)基制備基本方法:培養(yǎng)基配方的選定,同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別。因此,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外,一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料,加以比較核對(duì),再依據(jù)自己的使用目的加以選用,記錄其來(lái)源。培養(yǎng)基pH的初步調(diào)整,培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應(yīng)進(jìn)行pH的初步調(diào)正,因培養(yǎng)基在加熱消毒過(guò)程中、pH會(huì)有所變化,例如,牛肉浸液約可降低pH0.2。而腸浸液pH卻會(huì)有明顯的升高。因此,對(duì)這個(gè)步驟,操作者應(yīng)隨時(shí)注意探索經(jīng)驗(yàn)、以期能掌握培養(yǎng)基的很終pH,保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。pH調(diào)正后,還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘,以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。在選購(gòu)培養(yǎng)基制備器時(shí),快速加熱和冷卻能力是重要考量因素,直接影響培養(yǎng)基的質(zhì)量、實(shí)驗(yàn)效率及操作便利性。寧夏培養(yǎng)基制備器哪個(gè)品牌好
培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備:1.過(guò)濾滅菌:過(guò)濾滅菌可以在真空負(fù)壓或正壓條件下進(jìn)行。使用無(wú)菌設(shè)備和0.2um孔徑的濾膜。將過(guò)濾裝置的各個(gè)部分消毒滅菌,或使用預(yù)消毒設(shè)備。一些濾膜上附著蛋白質(zhì)或其他物質(zhì)()。為達(dá)到有效過(guò)濾,應(yīng)事先將濾膜用無(wú)菌水潤(rùn)濕。2.監(jiān)測(cè):應(yīng)對(duì)經(jīng)濕熱或過(guò)濾滅菌的培養(yǎng)基進(jìn)行監(jiān)測(cè),尤其要對(duì)pH、色澤、滅菌效果和均勻度等指標(biāo)進(jìn)行監(jiān)測(cè)。添加劑的制備:制備含有有毒物質(zhì)(生素)時(shí)應(yīng)小心操作,避免因粉末的擴(kuò)散造成實(shí)驗(yàn)人員過(guò)敏或發(fā)生其他不良反應(yīng)。采用適當(dāng)?shù)念A(yù)防措施并小心按照產(chǎn)品使用說(shuō)明操作。遼寧瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器高溫下長(zhǎng)時(shí)間停留會(huì)導(dǎo)致瓊脂過(guò)度凝固、糖類焦化或蛋白質(zhì)變性。
微生物培養(yǎng)基制備:溶解滅菌后,盤子上無(wú)不溶性結(jié)晶紫、無(wú)紫色斑;與未溶解和消毒的盤子相比,盤子上有結(jié)晶紫和紫色斑點(diǎn)。因此正確的步驟順序是在高壓滅菌前需要進(jìn)行培養(yǎng)基煮沸溶解。先煮沸溶解后冷卻至二十五度,確定pH值;對(duì)需要高壓滅菌的介質(zhì)取平均值,高壓滅菌后冷卻至二十五度,這兩種狀況測(cè)量培養(yǎng)基pH值,固體培養(yǎng)基至少檢測(cè)兩個(gè)點(diǎn),取它們的平均值??刂婆囵B(yǎng)基在容器中不要超過(guò)百分之八十,避免填充過(guò)多。注意控制高壓滅菌時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(115-116度)二十分鐘即可,溫度不超過(guò)121度,而且滅菌后的培養(yǎng)基在高溫環(huán)境中不要長(zhǎng)時(shí)間存放。
培養(yǎng)基制備器:培養(yǎng)基的種類繁多,但制備的方法大同小異,一般可分為6個(gè)步驟:用水、稱量、溶解復(fù)水、滅菌、pH測(cè)定、保存。1、必須選用專門純凈水或者經(jīng)消毒過(guò)后的無(wú)菌水。2、培養(yǎng)基進(jìn)行復(fù)水的容器不得用銅鍋或鐵鍋,放置離子混入培養(yǎng)基中,影響微生物的生長(zhǎng)。3、容器的體積須大于復(fù)水后培養(yǎng)基總體積的2倍,預(yù)防出現(xiàn)溢出情況。4、在對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行加熱時(shí),若培養(yǎng)基內(nèi)含有瓊脂粉成分,則需要將其充分浸泡一段時(shí)間。加熱的過(guò)程中不斷進(jìn)行攪拌防止出現(xiàn)培養(yǎng)基結(jié)底炭化從而造成成分損害。部分培養(yǎng)基則需要使用沸水進(jìn)行加熱,預(yù)防發(fā)生局部燒焦及沸騰溢出。5、瓊脂類培養(yǎng)基進(jìn)行再融化時(shí)應(yīng)使用沸水浴或流動(dòng)蒸汽進(jìn)行加熱,較多只能加熱兩次,第二次再融化后仍未用完的培養(yǎng)基應(yīng)棄去。6、而當(dāng)對(duì)培養(yǎng)基實(shí)施滅菌時(shí),需嚴(yán)格按照說(shuō)明規(guī)范操作。但是也不能盲目按照說(shuō)明的時(shí)間進(jìn)行,需結(jié)合實(shí)際情況,合理調(diào)節(jié)滅菌時(shí)間,防止出現(xiàn)培養(yǎng)基滅菌過(guò)度而造成的成分變性。低能耗技術(shù)降低運(yùn)行成本,符合實(shí)驗(yàn)室可持續(xù)發(fā)展要求。 多級(jí)安全保護(hù)機(jī)制預(yù)防設(shè)備過(guò)載或異常操作風(fēng)險(xiǎn)。
培養(yǎng)基的分裝:大批量配制時(shí)使用的自動(dòng)分配器須經(jīng)校準(zhǔn)和確認(rèn)。每次使用前后,均要對(duì)分配器的管道系統(tǒng)進(jìn)行沖洗,在分裝無(wú)菌培養(yǎng)基前,則要采用無(wú)菌硅膠管。固體培養(yǎng)基一般分裝在250ml、500ml錐形瓶中,高壓滅菌后根據(jù)需要分裝平皿或試管。平皿:傾注平皿,應(yīng)在無(wú)菌室中放置3—4h,如用塑料平皿須在35℃培養(yǎng)箱中倒置30—60min。讓水蒸汽自然蒸發(fā)。斜面:制備低層斜面分裝于試管,約占容積1/5,滅菌后趁熱斜放在細(xì)玻璃棒和木桿上,使成斜度,分裝使注意管口和瓶塞上勿沾有培養(yǎng)基,如沾有培養(yǎng)基應(yīng)用布抹去,以避免污染。培養(yǎng)基制備器鋁制表面光滑平坦;易于清潔,無(wú)孔隙和裂縫,以防培養(yǎng)基流進(jìn)去.山東自動(dòng)培養(yǎng)基制備器
全自動(dòng)培養(yǎng)基制備儀主要特點(diǎn):具有快速升溫和迅速冷卻功能!寧夏培養(yǎng)基制備器哪個(gè)品牌好
培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備:①概述:培養(yǎng)基和試劑的滅菌通常采用濕熱滅菌或過(guò)濾滅菌。有些培養(yǎng)基無(wú)需高壓滅菌,可煮滅菌。如,含亮綠的腸道菌培養(yǎng)基對(duì)光和熱特別敏感,應(yīng)在煮沸后快速冷卻,避光保存。同樣,一些試劑則不需要滅菌,直接使用(參見相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)或生產(chǎn)廠商的使用說(shuō)明)。②濕熱滅菌;p濕熱滅菌在高壓鍋或培養(yǎng)基制備器中進(jìn)行。高壓霉菌一般采用121℃±3℃霉菌15min。如果培養(yǎng)基的體積超過(guò)1000mL,要對(duì)滅菌條件進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。所有操作均要按照標(biāo)準(zhǔn)和使用說(shuō)明的規(guī)定進(jìn)行。注:大容量培養(yǎng)基(>1000mL)滅菌時(shí)可能會(huì)造成過(guò)度加熱。加熱后應(yīng)采取適當(dāng)?shù)姆绞嚼鋮s,防止沸溢。這對(duì)大容量培養(yǎng)基和敏感性培養(yǎng)基(如含亮綠的培養(yǎng)基)是非常重要的。寧夏培養(yǎng)基制備器哪個(gè)品牌好