在食品微生物學領域,Baird-Parker瓊脂培養(yǎng)基已成為金黃色葡萄球菌檢測的金標準方法。其應用范圍涵蓋乳制品、肉制品、速凍食品等復雜基質(zhì)樣本。例如,在生鮮肉類檢測中,培養(yǎng)基中的甘氨酸能中和樣本中殘留的表面活性劑干擾;而卵黃成分的乳化作用可有效分散脂肪顆粒,減少假陰性結(jié)果。研究還拓展了其在即時檢測(POCT)中的應用:通過預灌裝脫水培養(yǎng)基片劑與便攜式恒溫孵育箱結(jié)合,可在野外或生產(chǎn)線現(xiàn)場實現(xiàn)48小時內(nèi)完成定量檢測,檢測限低至1CFU/g(經(jīng)MPN法驗證)。與傳統(tǒng)PCR或免疫學方法相比,Baird-Parker培養(yǎng)法的優(yōu)勢在于兼顧成本效益與可靠性。一項多中心研究顯示,其與分子檢測(如nuc基因擴增)的一致性達93.7%,而單樣本檢測成本為后者的1/5。此外,培養(yǎng)基支持自動化菌落計數(shù)儀的圖像分析,通過算法識別黑色菌落與溶血環(huán)特征,將人工判讀誤差率從15%降至2%以下。麥康凱瓊脂基礎是一種選擇性培養(yǎng)基,主要用于糞便、分泌物中腸道致病菌及腸球菌的分離培養(yǎng) 。AN厭氧瓊脂基礎
乳糖肉湯是一種經(jīng)典的微生物培養(yǎng)基,廣泛應用于細菌的增菌和發(fā)酵特性檢測。其配方簡單而高效,主要成分包括乳糖、蛋白胨、牛肉浸粉和氯化鈉。乳糖作為主要的碳源,能夠被許多細菌發(fā)酵,產(chǎn)生酸性代謝產(chǎn)物,從而改變培養(yǎng)基的pH值。蛋白胨和牛肉浸粉則為細菌生長提供了豐富的氮源和生長因子,支持細菌的快速繁殖。氯化鈉則維持培養(yǎng)基的滲透壓,確保細菌在適宜的環(huán)境中生長。乳糖肉湯的設計原理基于細菌對乳糖的發(fā)酵能力。在發(fā)酵過程中,細菌將乳糖分解為酸性產(chǎn)物,導致培養(yǎng)基的pH值下降。這種pH變化可以通過添加酸堿指示劑(如溴甲酚紫)來觀察。當培養(yǎng)基中的乳糖被發(fā)酵時,溴甲酚紫的顏色會從紫色變?yōu)辄S色,從而直觀地指示細菌的發(fā)酵活性。這種特性使得乳糖肉湯在檢測腸道致病菌(如大腸桿菌和沙門氏菌)時表現(xiàn)出色,因為這些細菌通常能夠發(fā)酵乳糖并產(chǎn)生酸性代謝產(chǎn)物。馬丁培養(yǎng)基葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基營養(yǎng)豐富蛋白胨和酵母浸出粉提供氮源和生長因子,葡萄糖作為碳源,促進微生物快速生長。
RV沙氏增菌肉湯(Rappaport-Vassiliadis Enrichment Broth,簡稱RV肉湯)是一種專為沙門氏菌選擇性增菌而設計的液體培養(yǎng)基。其配方設計基于沙門氏菌的生物學特性,通過優(yōu)化營養(yǎng)成分和抑制劑的組合,實現(xiàn)對沙門氏菌的高效增菌。RV肉湯的主要成分包括大豆蛋白胨、氯化鎂、氯化鈉、磷酸鹽緩沖劑和少量孔雀綠。大豆蛋白胨提供豐富的碳源和氮源,支持細菌的快速生長;氯化鎂和氯化鈉維持高滲透壓,抑制其他腸桿菌科細菌的生長;低pH值和孔雀綠則進一步增強對非沙門氏菌的抑制作用。RV肉湯的配方經(jīng)過多次改良,減少了孔雀綠的使用量,降低了毒性,同時保持了高效的選擇性。這種優(yōu)化不僅提高了培養(yǎng)基的安全性,還使其在復雜的樣本中能夠更有效地分離沙門氏菌。研究表明,RV肉湯在短時間內(nèi)能夠增加沙門氏菌的數(shù)量,同時有效抑制大腸桿菌、變形桿菌等常見雜菌的生長。此外,RV肉湯的配方還考慮到了沙門氏菌的代謝特性,通過調(diào)節(jié)pH值和滲透壓,為沙門氏菌提供了理想的生長環(huán)境。這種配方設計使得RV肉湯在分離和增菌沙門氏菌方面表現(xiàn)出色,優(yōu)于其他同類增菌培養(yǎng)基,如四硫磺酸鹽肉湯(TTB)和亞硒酸鹽肉湯。
溴十六烷三甲銨瓊脂培養(yǎng)基廣泛應用于微生物檢測領域,尤其適用于從臨床樣本、環(huán)境樣本和食品樣本中分離和鑒定銅綠假單胞菌。其高度選擇性的特性使其成為檢測銅綠假單胞菌的理想工具,尤其在需要快速篩選和鑒定該菌的場景中表現(xiàn)出色。在實驗操作中,溴十六烷三甲銨瓊脂培養(yǎng)基的制備過程簡單且易于操作。通常將45.3g培養(yǎng)基干粉溶解于1000mL純化水中,加入10mL甘油,加熱煮沸至完全溶解后,分裝至三角瓶中,121℃高壓滅菌15分鐘。滅菌后,培養(yǎng)基應在50℃時傾注至無菌平皿中備用。需要注意的是,培養(yǎng)基中含少量氯化鎂,滅菌后可能出現(xiàn)微量沉淀,但不影響使用。在實際應用中,樣本接種后通常在30-35℃下需氧培養(yǎng)18-72小時。銅綠假單胞菌在該培養(yǎng)基上生長良好,形成的菌落通常呈現(xiàn)黃綠色,具有較高的辨識度。此外,該培養(yǎng)基還可與其他檢測方法結(jié)合使用,如分子生物學方法(如PCR)和生化鑒定方法,進一步提高檢測的準確性和靈敏度腸道菌增菌肉湯(EE肉湯)培養(yǎng)基緩沖體系穩(wěn)定pH值維持在7.2±0.2,為微生物生長提供適宜環(huán)境,實驗重復性高。
富集培養(yǎng)基是一種在微生物學中用于從復雜微生物群落中選擇性培養(yǎng)目標微生物的培養(yǎng)基。其主要特點和應用如下:1.**選擇性培養(yǎng)**:富集培養(yǎng)基通過增加特定營養(yǎng)條件或改變環(huán)境條件,從復雜的微生物群落中選擇性地培養(yǎng)出目標微生物。這種培養(yǎng)基的設計基于不同微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的利用能力和生長特性的差異,利用這些差異來選擇性地培養(yǎng)出目標微生物。2.**目標微生物特性**:富集培養(yǎng)基的制備需要明確目標微生物的特性和所需營養(yǎng)物質(zhì)。目標微生物可能對某種特定的碳源、氮源或微量元素有特殊的需求。因此,在富集培養(yǎng)的過程中,需要選擇適當?shù)母患囵B(yǎng)基,以提供目標微生物所需的營養(yǎng)物質(zhì)。3.**抑制其他微生物**:在富集培養(yǎng)基中,可以添加一些抑制其他微生物生長的物質(zhì),以防止其他微生物的干擾。4.**培養(yǎng)條件**:富集培養(yǎng)需要合適的培養(yǎng)條件。不同微生物對溫度、pH值和氧氣需求有所不同,因此在富集培養(yǎng)中需要根據(jù)目標微生物的需求來調(diào)節(jié)這些條件。5.**應用廣**:富集培養(yǎng)基在工業(yè)微生物產(chǎn)生菌的分離篩選中非常重要,尤其是在從微生物混合群中引向純培養(yǎng)的一種培養(yǎng)方法。例如,杜宗軍教授課題組設計了新的富集培養(yǎng)基和富集條件,分離出了大量的海洋細菌新類群。該培養(yǎng)基質(zhì)地均勻,透明度高,便于觀察菌落形態(tài),瓊脂凝固性好,穩(wěn)定性強適合長時間培養(yǎng)實驗結(jié)果清晰可靠。EB肉湯增菌液添加劑B
連四硫酸鹽成分獨特,增強目標菌特征反應,檢測信號更明顯,為微生物鑒定和研究提供有力支持。AN厭氧瓊脂基礎
在臨床微生物學領域,Vogel-Johnson瓊脂被廣用于耐藥性金黃色葡萄球菌(如MRSA)的快速篩查。一項多中心研究顯示,使用VJ瓊脂對200例術(shù)后樣本進行檢測,與PCR確認結(jié)果的一致性達92%,高于血瓊脂(78%)和MSA(85%)。其顯色反應可在18–24小時內(nèi)完成初步鑒定,縮短了傳統(tǒng)生化試驗所需的48–72小時周期。在食品安全領域,VJ瓊脂被納入ISO 6888-1標準,用于食品中金黃色葡萄球菌的定量檢測。例如,在乳制品檢測中,VJ瓊脂可有效抑制乳酸菌和芽孢桿菌的干擾,同時通過黃色暈圈清晰區(qū)分產(chǎn)菌株(如金黃色葡萄球菌)。研究還表明,在即食肉類樣本中,VJ瓊脂的檢測限低至10 CFU/g(經(jīng)增菌后),符合歐盟法規(guī)(EC No. 2073/2005)對即食食品的微生物安全要求。此外,其高選擇性減少了后續(xù)確證試驗(如凝固酶試驗)的工作量,降低了實驗室成本。AN厭氧瓊脂基礎