外泌體研究的主要應用:外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型,其可參與到機體免疫應答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細胞與基底細胞的遺傳信息的交換,從而導致大量新生血管的生成,促進了一些病癥的生長與侵襲。一些病癥。一些病癥轉(zhuǎn)移。來自白血病干細胞的外泌體促進急性骨髓性白血?。ˋML)細胞的增殖、遷移和壓制細胞凋亡。治病靶標。利用外泌體遞送小干擾RNA來沉默KRASG12D,從而特異性高效靶向至胰腺病細胞,以明顯降低RAS活化、病細胞增殖和轉(zhuǎn)移過程。免疫。β細胞將含有蛋白質(zhì)和miRNA的外泌體釋放到細胞外,并可轉(zhuǎn)移到其他代謝部位或免疫內(nèi)皮細胞,有利于維持葡萄糖體內(nèi)平衡或造成胰島素抵抗。心血管。外泌體介導miR-155從平滑肌細胞轉(zhuǎn)移到內(nèi)皮細胞導致了內(nèi)皮細胞的損傷促進動脈硬化。分子標記。疾病診斷。在酒精性肝病、NASH、菌類性肝炎、藥物性肝損傷和肝細胞病中發(fā)現(xiàn)循環(huán)EVs的水平上升。預后標志。由于外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能,使得它具有潛在的應用價值。南京正規(guī)外泌體提取試劑報價
外泌體是一種存在于細胞外的多囊泡體,可通過細胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成多泡內(nèi)涵體,內(nèi)涵體與細胞膜融合后釋放其中的小囊泡。外泌體的直徑在40-110nm之間,其中包含RNA、蛋白質(zhì)、microRNA、DN段等多種物質(zhì),存在于血液、唾液、尿液、腦脊液和母乳等多種體液中。外泌體從發(fā)現(xiàn)至今已有30多年的歷史,雖然較初被認為可能是細胞的“垃圾”,所以才被排出來,但是近年來研究表明外泌體具有功能活性并可進行細胞間信息傳遞。如今,研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體在抗原提呈細胞中呈遞抗原程中、一些病癥細胞發(fā)生的發(fā)展、神經(jīng)細胞信號轉(zhuǎn)導過程中都發(fā)揮著重要作用。杭州外泌體提取試劑平均價格外泌體提?。狠^常見的過濾膜具有0.8μm、0.45μm或0.22μm的孔徑。
外泌體在肺病進程中的作用:在一些病癥微環(huán)境中,一些病癥細胞來源的外泌體能夠誘導CD4+T分化為調(diào)節(jié)性T細胞,壓制機體的抗一些病癥免疫反應;肺病細胞分泌的外泌體含有miR-21和miR-29a,可在免疫細胞中結(jié)合并啟動TLR8,使TLR介導的NF-κB信號通路活化,從而導致一些病癥的生長和轉(zhuǎn)移。在肺病的侵襲和轉(zhuǎn)移過程中,細胞間通訊扮演著重要的角色。據(jù)有關報道稱,NSCLC分泌的外泌體內(nèi)TGFβ和IL10的高表達與肺病的轉(zhuǎn)移密切相關。此外,啟動的T細胞可以通過調(diào)控Fas信號通路增加基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)的表達,進而促進肺病的轉(zhuǎn)移。這些機制有望成為肺病治病的潛在靶點。雖然大多數(shù)外泌體都是促進一些病癥的侵襲與轉(zhuǎn)移,但也有報道稱,外泌體miR-302b可以通過壓制TGFβRⅡ來壓制肺病細胞的轉(zhuǎn)移與增殖。如純度和回收率低,雜蛋白較多(假陽性),顆粒大小不均一,產(chǎn)生難以去除的聚合物
外泌體的提取方法,先用含無外泌體血清的培養(yǎng)基對人脂肪來源間充質(zhì)干細胞進行饑餓培養(yǎng),這樣可使干細胞處于正常生長狀態(tài),不會被克制生長增殖,其所分泌的外泌體所包含的有效物質(zhì)也更貼近其自然狀態(tài)下的外泌體,然后將含有外泌體的培養(yǎng)上清液進行低速差速離心(即先一離心處理、再第二離心處理)以去除細胞及其碎片,用100kd超濾管對低速差速離心后的離心液進行超濾濃縮得到外泌體濃度更高的超濾液,將超濾液經(jīng)過第三離心處理去除雜質(zhì)后直接用0.22μm過濾器過濾除菌,過濾掉粒徑為220nm以上的物質(zhì),進一步得到含顆粒粒徑小于220nm的濃縮液,因超濾濃縮處理和第三離心處理使得液體量濃縮,這樣過濾除菌效率得到較大提高,較后將濃縮液進行超速離心的第四離心處理分離提取到外泌體。該外泌體的提取方法,既結(jié)合了差速離心,又結(jié)合了超濾和超速離心,通過該提取流程,較終可高效地從人脂肪來源間充質(zhì)干細培養(yǎng)上清液中提取到高濃度、高純度的外泌體,具有操作簡單、成本低,適合產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的特點。外泌體提取:重復離心操作還有可能對囊泡造成損害,從而降低其質(zhì)量。
外泌體研究思路。外泌體研究通常與高通量測序的聯(lián)系緊密,研究思路可以分為三大類:表達譜、分子標志物和分子機制方向,其中表達譜思路的特點就是短平快、通常以測序數(shù)據(jù)為主要內(nèi)容,短平快發(fā)表3-5分文章。而分子標志物的特點是在表達譜基礎之上加入大量樣本驗證,建立ROC、KM曲線,分析分子與臨床疾病的相關性為主,通常文章影響因子在3-10分之間。分子機制研究,顧名思義要做到細胞功能、機制研究深度,因此工作量通常較大,影響因子通常能夠上10+。唐山正規(guī)外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹在體內(nèi)參與細胞通訊、細胞遷移、促血管新生和抗一些病癥免疫等生理過程,與多種疾病的發(fā)生和進程密切相關。嚴重阻礙了我國在外泌體的研究和臨床應用上的發(fā)展。深圳正規(guī)外泌體提取試劑平均價格
可以使用NanoSight?或電子顯微鏡分析純化的外泌體,以評估近似外泌體大小范圍和濃度。南京正規(guī)外泌體提取試劑報價
外泌體在肺病治病中的作用:有研究發(fā)現(xiàn),使用外泌體運載紫杉醇(PTX)可顯著提高病細胞對PTX的吸收,將PTX加載至外泌體中顯著增加了藥物細胞毒性,Exo-PTX能顯著壓制肺病的發(fā)展。Aqil等在進行裸鼠實驗時發(fā)現(xiàn),加載至外泌體中的雷公藤紅素(Exo-CEL)比普通的CEL有更強的抗一些病癥功效,且在小鼠中未發(fā)現(xiàn)明顯全身性或系統(tǒng)性毒性,由此可以證明,外泌體制劑可以有效增強CEL功效并降低與劑量有關的毒性。到目前為止,外泌體在肺病治病方面的研究主要集中于免疫壓制,有效的外泌體藥物遞送平臺的搭建以及外泌體相關的潛在治病靶點的探索。已有的研究表明外泌體在肺病治病領域有著廣闊的前景,期待外泌體在肺病治病領域早日得到突破,造福更多的患者。正規(guī)外泌體提取試劑供應商通過超速離心(120000g/分鐘)20小時以上才能獲得足夠的外泌體量。南京正規(guī)外泌體提取試劑報價