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珠海無血清細胞凍存液直銷廠家

來源: 發(fā)布時間:2025-04-14

細胞凍存和復(fù)蘇操作步驟:細胞凍存和復(fù)蘇采取“慢凍快融”的原則,慢速冷凍可使細胞內(nèi)的水份滲出細胞外,減少細胞內(nèi)形成冰晶的機會,快融以保證細胞外結(jié)晶快速融化,避免慢速融化水份滲入細胞內(nèi),再次形成胞內(nèi)冰晶造成對細胞的損傷。細胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以比較大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少細胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復(fù)蘇細胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細胞造成損傷。無血清細胞凍存液,含多種保護劑成分。珠海無血清細胞凍存液直銷廠家

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產(chǎn)品簡介我們經(jīng)過長期的實驗研究與反復(fù)驗證,研發(fā)出一系列新型細胞凍存產(chǎn)品,能有效地提高常規(guī)細胞、原代細胞與干細胞的復(fù)蘇后存活率與活力。產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定可靠,使用方便,助力科研工作者擺脫程序繁瑣、操作復(fù)雜、容易污染的傳統(tǒng)凍存方法,專注于后續(xù)實驗研究。LiveCyteTM(LC-1601)是即用型細胞凍存液,所含化學(xué)成分明確,無動物源性成分,可一步實現(xiàn)細胞凍存并長期在-80℃冰箱保存,保護細胞免受冰晶和溶質(zhì)損傷,適用于大多數(shù)常規(guī)細胞。LiveCyteTM(LC-1602)是原代細胞及干細胞**凍存液,可進一步提高原代細胞和干細胞凍存效率。徐州昆明無血清細胞凍存液無血清細胞凍存液的優(yōu)勢:無血清細胞凍存液是不含血清和動物源成分。

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血清血液成分(加入抗凝劑)血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應(yīng),血液迅速凝固,形成膠凍。凝血塊收縮,其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過程中,纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,這一點是與血漿比較大的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中,血小板釋放出許多物質(zhì),各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學(xué)成分的分析,都以血清為樣品。

細胞凍存的注意事項:1、各種細胞對凍存速度的要求也不一樣;上皮細胞和成纖維細胞耐受性可能大些,骨髓干細胞-2~-3℃/分鐘合適;胚胎細胞耐受性較小,不宜太快??傊谝婚_始時,下降速度不能超過-10℃/分鐘。2、用什么防護劑合適和用量多大,要依細胞而定,初代培養(yǎng)細胞用DMSO較好,一般細胞可用甘油;用量以較小為好。有人認為人皮膚上皮細胞貯存在20%-30%甘油中很好。3、原則上細胞在液氮中可貯存多年,但為妥善起見,凍存一年后,應(yīng)再復(fù)蘇培養(yǎng)一次,然后再繼續(xù)凍存。4、將凍存管放入液氮容器或從中取出時,要做好防護工作,以免凍壞。5、注意自身的安全,對于來自人源性或病毒傳染的細胞株應(yīng)特別小心。操作過程中,應(yīng)避免引起氣溶膠的產(chǎn)生,小心有毒性試劑例如DMSO,并避免尖銳物品傷人等。無血清凍存液注意事項:若需長期凍存細胞,請轉(zhuǎn)移至液氮罐中貯存。

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無血清細胞凍存液與含血清細胞凍存液對比:傳統(tǒng)的細胞凍存液是使用培養(yǎng)基、血清和DMSO按照一定的比例混合,其中DMSO的含量是10%,血清的含量是10%,統(tǒng)稱為含血清細胞凍存液。含血清細胞凍存液的一般的凍存方法是梯度降溫凍存法,如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘,然后移至-20℃冰箱30分鐘,再移至-80℃冰箱保存16-18個小時(或隔夜),較后才移至液氮罐中進行長期的儲存??梢?,含血清細胞凍存液凍存細胞時遇到的問題:1.凍存細胞時需現(xiàn)配凍存液(如購買市面上通用的含血清細胞凍存液,此步可省略)。2.需要程序降溫(4℃→-20℃→-80℃→液氮),步驟繁瑣,耗時耗力。3.含血清,細胞污染(病毒、霉菌和支原體等)的風(fēng)險更高。4.血清批次、品質(zhì)間差異導(dǎo)致凍存液的批次間差異。5.需液氮凍存,且不能原位(如孔板)凍存??梢苑乐够驕p少冷凍冰晶對細胞的損傷作用。合肥正規(guī)無血清細胞凍存液廠家供應(yīng)

含血清,細胞污染(細菌、霉菌和支原體等)的風(fēng)險更高。珠海無血清細胞凍存液直銷廠家

使用方法:1)細胞超凈臺無菌環(huán)境,1.5mlEP管內(nèi)加入細胞混懸劑均勻混懸細胞,細胞終濃度為5×106個/ml,混懸液體積為200μl。細胞凍存劑冰水混合物中預(yù)冷,逐滴加入細胞凍存劑800μl,細胞混懸劑與細胞凍存劑的體積比控制在1:4。2)開啟程序性降溫,降溫速率為1℃/min,較后降溫至-80℃以下進行凍存。將比較例1凍存后細胞的復(fù)蘇率與實施例5凍存后細胞的復(fù)蘇率進行對比,具體結(jié)果如附圖1所示,可見采用本發(fā)明的凍存方法能夠明顯提高細胞的復(fù)蘇率。其他實施例通過與比較例1進行比較,也得到相同的試驗結(jié)果。本發(fā)明的凍存方法不僅可以明顯提高凍存后細胞復(fù)蘇率,同時還可減少不同批次細胞凍存復(fù)蘇率不穩(wěn)定、以及避免由血清中的支原體,細菌,朊細菌及其他細菌顆粒引發(fā)的污染。珠海無血清細胞凍存液直銷廠家