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原代細胞是出了名的難養(yǎng)，對培養(yǎng)環(huán)境和實驗操作的要求更苛刻。原代細胞在體外通常只能傳代少數(shù)幾次，某些原代細胞（如神經(jīng)元細胞）甚至無法進行傳代。對于研究人員來說，如何才能經(jīng)濟高效地培養(yǎng)好原代細胞，并圍繞這有限幾次傳代的細胞設(shè)計實驗，是更大的一個挑戰(zhàn)。原...

不能用手觸及已消毒器皿瓶口、瓶塞內(nèi)部，吸管前部等所有可能與細胞接觸的部分，如已接觸，要用火焰燒灼消毒或取備品更換。開啟、關(guān)閉長有細胞的培養(yǎng)瓶時，火焰滅菌時間要短。防止因溫度過高燒死細胞。換液時傾倒廢液，瓶口不能接觸廢液缸，速度不能過快，防止廢液四濺...

CRISPR基因敲除穩(wěn)定細胞株構(gòu)建服務(wù)：隨著TALEN和Cas9/gRNA基因敲除系統(tǒng)的出現(xiàn)，基因定點敲除的難度大幅下降。全新的技術(shù)將基因敲除從價格高昂，耗時漫長的ZNF系統(tǒng)，逐漸變成簡便的研究工具?，F(xiàn)在我們可提供Talen和Cas9/gRNA兩個系統(tǒng)的基因敲...

這篇研究報告中，研究人員將四種類型人類細胞注射到小鼠的大腦中，包括間質(zhì)干細胞，對于每一種類型的細胞而言，研究人員共能注射30萬個細胞。隨后研究人員利用MRI來追蹤在兩周內(nèi)所發(fā)現(xiàn)的注射細胞群體。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，間充質(zhì)干細胞的MRI信號要比其它三種注射的細胞類型高出大約...

簡單的可以這么認(rèn)為，就是說呢，生長因子進入人體以后，它不光刺激普通的細胞，它也刺激一種細胞，演變?yōu)榉置诩毎?，而且這個分泌細胞又可以分泌生長因子，所以它會源源不斷的造成生長因子產(chǎn)生，刺激到組織的生長。但是這只是一種理論上的推測啊。不過它能更好的解釋打...

疫區(qū)來源的胎牛血清受制于血源地和集血技術(shù)，很多都攜帶有生物學(xué)污染，如支原體、噬菌體、病毒、原蟲等。這對實驗室和操作人員的安全是重大的隱患，對全國廣大人民**也是不容忽視的潛在危險！國內(nèi)官方對這方面有明確解答（以下摘自查處非法入境胎牛血清的官方公告）：“未經(jīng)檢疫...

肝臟原位灌注法：（為分離肝細胞的經(jīng)典方法）1，在38度-39度的水浴槽中預(yù)熱hepes緩沖液和膠原酶液，使其在肝內(nèi)達到37度。2，給大鼠（180-200g）腹腔注射巴比妥鈉100ul/100g，從古靜脈注射肝素1000u，打開腹腔，在門靜脈的肝外5...

成纖維細胞培養(yǎng)基是專門為正常人類成纖維細胞體外培養(yǎng)設(shè)計的*適于其生長的培養(yǎng)基。它是經(jīng)滅菌的液體培養(yǎng)基，包含必需和非必需氨基酸、維生素、有機和無機化合物、激su、生長因子、微量礦物質(zhì)和低濃度胎牛血清(2%)。該培養(yǎng)基緩沖體系為HEPES和重碳酸鹽，在含5%CO2...

原代培養(yǎng)就是提取的細胞體外次培養(yǎng)。，當(dāng)原代培養(yǎng)成功以后，隨著培養(yǎng)時間的延長和細胞不斷分裂，一則細胞之間相互接觸而發(fā)生接觸性抑制，生長速度減慢甚至停止；另一方面也會因營養(yǎng)物不足和代謝物積累而不利于生長或發(fā)生中毒。此時就需要將培養(yǎng)物分割成小的部分，重新接種到另外的...

胎牛血清是一種外觀呈黃色無溶血無異物，粘稠的液體，它取自于剖腹產(chǎn)的胎牛，胎牛血清品質(zhì)是比較高的，因為他沒有接觸到外界，血清中所含有的抗體補體對細胞有害成分也比較少。它能夠維持細胞指數(shù)的正常生長素，提供蛋白質(zhì)，識別維生素之類，有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱...

胎牛血清儲存：-10℃，避光 恒溫冰箱；運輸：干冰。高質(zhì)量澳大利亞胎牛血清和小牛血清現(xiàn)貨供應(yīng)——牛血清由于包含豐富的營養(yǎng)成分，通常被添加到細胞培養(yǎng)液中，用于促進和維持脊椎動物、哺乳動物、昆蟲及其他物種細胞的生長。牛血清的來源地很多，其中澳大利亞來源的牛血清被公...

原代肝細胞培養(yǎng)基由補充了適當(dāng)?shù)纳L因子和細胞因子的基礎(chǔ)培養(yǎng)基組成。細胞在細胞培養(yǎng)箱中生長并維持在適當(dāng)?shù)臏囟群突旌蠚怏w中（對于哺乳動物細胞，通常為37°C，5％CO2）。培養(yǎng)條件根據(jù)細胞類型而廣變化。生長培養(yǎng)基的pH，葡萄糖濃度，生長因子和其他營養(yǎng)物質(zhì)的存在...

Autotaxin(ATX)是一種分泌型溶血磷脂酶D，可催化溶血磷脂酰膽堿(LPC)水解為溶血磷脂酸(LPA)，這是一種多效性生長因子樣磷脂。LPA通過其G蛋白偶聯(lián)受體(GPCRs;LPAR1-6)在幾乎所有細胞類型中具有多種作用，表現(xiàn)出重疊的特異...

細胞培養(yǎng)可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)。直接從體內(nèi)獲取的組織細胞進行培養(yǎng)為原代培養(yǎng)；當(dāng)原代培養(yǎng)的細胞增殖達到一定密度后，則需要做再培養(yǎng)，即將培養(yǎng)的細胞分散后，從一個容器以1：2或其他比率轉(zhuǎn)移到另一個或幾個容器中擴大培養(yǎng)，為傳代培養(yǎng)，傳代培養(yǎng)的累積次數(shù)就是...

干細胞鑒別方法：盡管許多組織中都存在干細胞，但其數(shù)量很少，而且在顯微鏡下時，無法將它們與這些組織中的其他細胞清楚區(qū)分。因此，如何找到一種簡單有效的方法，科學(xué)、準(zhǔn)確地區(qū)分這類稀少的細胞，一直是科學(xué)家們不斷探索的課題。過去人們普遍采用的干細胞鑒別方法主要有以下兩種...

細胞培養(yǎng)是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究常用的手段之一，可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩種。原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取組織或的一部分進行培養(yǎng)，也稱初代培養(yǎng)。嚴(yán)格地說即從體內(nèi)取出組織接種培養(yǎng)到次傳代階段，但實際上，通常把代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。一般持...

這篇研究報告中，研究人員將四種類型人類細胞注射到小鼠的大腦中，包括間質(zhì)干細胞，對于每一種類型的細胞而言，研究人員共能注射30萬個細胞。隨后研究人員利用MRI來追蹤在兩周內(nèi)所發(fā)現(xiàn)的注射細胞群體。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，間充質(zhì)干細胞的MRI信號要比其它三種注射的細胞類型高出大約...

細胞株是培養(yǎng)十代以內(nèi)的細胞，細胞系是培養(yǎng)50代以內(nèi)的細胞，而腫瘤細胞，可以簡單的理解為病細胞。那么請看生物必修一然后一章：病細胞是正常細胞的原病基因或者抑病基因發(fā)生突變產(chǎn)生的可以無限增殖，表面糖蛋白減少易轉(zhuǎn)移的一類細胞。注意：只要細胞原病基因或者抑病基因發(fā)生突...

慢病毒染上目的細胞：通過上述實驗確定了慢病毒染上目的細胞的比較好MOI，接下來就可以進行穩(wěn)定細胞株的篩選工作了。將目的細胞接種24孔板，控制好細胞密度，貼壁后大約為30%-40%左右的密度；細胞過夜培養(yǎng)后，按比較好MOI加入病毒，同時加入終濃度為8μg/mlp...

現(xiàn)在您知道了如何傳代細胞，讓我們再來看看傳代的一些不同應(yīng)用。前面已經(jīng)提到，人胚胎干細胞是一類必須傳代的細胞。它們通常與小鼠成纖維細胞MEF共培養(yǎng)，后者能提供幫助干細胞保持其多能性的因子。生長于飼養(yǎng)細胞上的干細胞到了合適的發(fā)育階段時需挑出來?？捎梦⑿?..

常見細胞株：4179長尾綠猴胚胎細胞；4647長尾綠猴腎細胞ATCC細胞；351雜交瘤細胞抗；CD23A0人卵巢ai細胞；A2780細胞[人卵巢ai細胞]ATCC細胞；3T3小鼠胚胎瘤成纖維細胞；3T3-E1鼠胚成骨細胞；3T3-L1小鼠脂肪細胞；3T3-Sw...

細胞培養(yǎng)可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)。直接從體內(nèi)獲取的組織細胞進行培養(yǎng)為原代培養(yǎng)；當(dāng)原代培養(yǎng)的細胞增殖達到一定密度后，則需要做再培養(yǎng)，即將培養(yǎng)的細胞分散后，從一個容器以1：2或其他比率轉(zhuǎn)移到另一個或幾個容器中擴大培養(yǎng)，為傳代培養(yǎng)，傳代培養(yǎng)的累積次數(shù)就是...

細胞一般儲存在液氮中，溫度達-196℃，理論上儲存時間是無限的。細胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以比較大限度的保存細胞活力。細胞復(fù)蘇就是要把原本冷凍保存(凍存)著的細胞恢復(fù)到一般的生長狀態(tài)，現(xiàn)在我們來看看原代細胞的復(fù)蘇步驟。一、檢...

傳代培養(yǎng)的細胞是細胞系；細胞株就是從細胞系篩選出來的有特殊屬性的比如無線增值的。細胞株(CellStrain)：通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱為細胞株(CellStrain)，也就是說，細胞株是用單細胞分離培養(yǎng)或...

零售EGF產(chǎn)品的主要障礙是它們的貨架期過短。在適當(dāng)?shù)膬Υ鏃l件下，平均3個月的穩(wěn)定期使EGF制劑不適合大規(guī)模的商業(yè)批量使用。在室溫下存放一周對EGF的穩(wěn)定性影響不大，但產(chǎn)品的長期穩(wěn)定性需要溫度監(jiān)控。冷藏的儲存方式可以將保質(zhì)期從1個月延長到3個月。若果該產(chǎn)品在冷凍...

原代肝細胞屬于高度分化的細胞，對體外培養(yǎng)條件的要求比傳代細胞高，其在體外存活時間也比傳代細胞短，采用單層膠原培養(yǎng)法進行體外培養(yǎng)的原代肝細胞存活時間為1周左右[25]。本實驗是在Seglen兩步灌流法的基礎(chǔ)上進行改進，結(jié)合逆向灌流、多次低速離心等方法成功分離獲取...

是一種可對DNA染色的細胞核染色試劑，常用于細胞凋亡檢測。碘化丙啶是一種核酸染料呈紅色，它不能透過完整的細胞膜，但凋亡中晚期的細胞和壞死細胞由于細胞通透性的增加，PI能夠透過細胞膜而使細胞核染紅，用PI 單一染色觀測培養(yǎng)細胞，只能表示細胞的壞死情況，而不是...

營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基是維持細胞活性及高密度生長的基礎(chǔ)，營養(yǎng)缺乏容易引起細胞凋亡，新生牛血清中所含大部分營養(yǎng)成分可以通過化學(xué)成分明確的營養(yǎng)物質(zhì)如氨基酸維生素等成分組合取代。低血清培養(yǎng)基營養(yǎng)成分大優(yōu)于基礎(chǔ)培養(yǎng)基，只需添加1％～5％新生牛血清，而對細胞生長、...

科學(xué)家們在經(jīng)過長期的探索和努力之后，較終把目光落在干細胞上，生命體是通過干細胞的分裂來實現(xiàn)細胞更新及保證持續(xù)增長，干細胞的研究與應(yīng)用將有可能使人類實現(xiàn)完美修復(fù)損傷組織和器臟的夢想。多年來科學(xué)家們一直致力于尋找利用干細胞的復(fù)制和分化來取代受損細胞或組織的方法。這...

這項研究中，研究者Bulte及其同事發(fā)現(xiàn)，這些間充質(zhì)干細胞含有高水平的甘露糖（mannose），其與葡萄糖相似，且能利用基于MRI的標(biāo)準(zhǔn)成像方法輕松成功地被發(fā)現(xiàn)；研究者表示，特定的腫瘤細胞會失去大量糖分子，這或許就能被MRI機器很容易就檢測到，此后研究人員便有...