相對(duì)于二代測(cè)序、基因芯片和定量PCR而言,數(shù)字PCR具備以下優(yōu)勢(shì):●靈敏度可達(dá)到單個(gè)核酸分子:檢測(cè)限低至0.001%,主要系為數(shù)字PCR可以實(shí)現(xiàn)靶標(biāo)DNA/RNA的生物濃縮;●無(wú)需標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)活參照基因進(jìn)行對(duì)比來(lái)測(cè)定核算量,可對(duì)靶分子起始量進(jìn)行***定量,直 接獨(dú)處DNA分子的個(gè)數(shù);●適合環(huán)境復(fù)雜樣品的檢測(cè):終點(diǎn)PCR檢測(cè),不依賴(lài)Ct值,不依賴(lài)擴(kuò)增效率,能克服PCR***劑的影響,避免樣品間的交叉***問(wèn)題,適合各類(lèi)復(fù)雜環(huán)境中的樣本進(jìn)行***定量,如動(dòng)血樣、糞便、尿液、痰液、水樣、土壤、植物等;浚和(上海)儀器科技有限公司力于提供數(shù)字PCR ,歡迎新老客戶(hù)來(lái)電!浙江便攜式數(shù)字PCR定制
數(shù)字PCR可以直接計(jì)算目標(biāo)序列的拷貝數(shù),因此無(wú)需依賴(lài)于對(duì)照樣品和標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)就可以進(jìn)行精確的***定量檢測(cè);此外,由于數(shù)字PCR在進(jìn)行結(jié)果判讀時(shí) 判斷有/無(wú)兩種擴(kuò)增狀態(tài),因此也不需要檢測(cè)熒光信號(hào)與設(shè)定閾值線(xiàn)的交點(diǎn),完全不依賴(lài)于Ct值的鑒定,因此數(shù)字PCR的反應(yīng)受擴(kuò)增效率的影響**降低,對(duì)PCR反應(yīng)***物的耐受能力**提高;數(shù)字PCR實(shí)驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)體系分配的過(guò)程可以極大程度上降低與目標(biāo)序列有競(jìng)爭(zhēng)性作用的背景序列濃度,因此數(shù)字PCR技術(shù)也特別適合在復(fù)雜背景中檢測(cè)稀有突變。青海芯片數(shù)字PCR安裝數(shù)字PCR 浚和(上海)儀器科技有限公司獲得眾多用戶(hù)的認(rèn)可。
數(shù)字PCR(dPCR)是近年來(lái)引起重視并迅速發(fā)展起來(lái)的一種突破性的核酸定量分析技術(shù)。該技術(shù)先將核酸模板進(jìn)行稀釋,分配到大量 的反應(yīng)單元中,使每個(gè)反應(yīng)單元中只有單個(gè)模板分子,然后進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng),擴(kuò)增結(jié)束后對(duì)每個(gè)反應(yīng)室的熒光信號(hào)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,來(lái)定量DNA拷貝數(shù)。數(shù)字PCR采用先擴(kuò)增后定量,因此不依賴(lài)擴(kuò)增曲線(xiàn)的循環(huán)閾值(Ct),也無(wú)需采用內(nèi)參基因和標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性好,可以實(shí)現(xiàn)***定量分析。由于其獨(dú)特的技術(shù)優(yōu)勢(shì),已經(jīng)在臨床診斷、轉(zhuǎn)基因成分定量、單細(xì)胞基因表達(dá)分析、環(huán)境微生物檢測(cè)和下一代測(cè)序等研究領(lǐng)域顯示出巨大的優(yōu)勢(shì)和應(yīng)用前景。
數(shù)字PCR檢測(cè)及分析原理在上世紀(jì)90年代就被提出來(lái)了,但是無(wú)奈受限于當(dāng)時(shí)的技術(shù)條件,樣本稀釋及分配都是靠手工來(lái)完成的,受到很多因素的干擾和限制;并且結(jié)果分析對(duì)于研究者來(lái)說(shuō)也十分枯燥與繁瑣,因此在很長(zhǎng)一段時(shí)間dPCR發(fā)展停滯不前。后來(lái)由于微流控技術(shù)與微納集成制造工藝的發(fā)展解決了dPCR過(guò)程中的幾個(gè)關(guān)鍵技術(shù)問(wèn)題,推動(dòng)了dPCR的研究與商業(yè)化的發(fā)展。目前根據(jù)dPCR樣本稀釋分配的方式,基本可分為三大類(lèi),一種是基于大規(guī)模集成微流控芯片;第二種是使用微反應(yīng)室/孔板;第三種是微滴式。但不論是走芯片式還是微滴式,其基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應(yīng)器或者微滴當(dāng)中,每個(gè)反應(yīng)器的核酸模板數(shù)少于1或者等于1。經(jīng)過(guò)PCR擴(kuò)增之后,有一個(gè)核酸分子的模板的反應(yīng)器就會(huì)給出熒光信號(hào),沒(méi)有模板的反應(yīng)器沒(méi)有熒光信號(hào)。根據(jù)相對(duì)比例和反應(yīng)器的體積,可以推算出原始溶液的核酸濃度。浚和(上海)儀器科技有限公司為您提供數(shù)字PCR ,期待為您服務(wù)!
我國(guó)***擁有完全自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的微滴式數(shù)字PCR儀MiniDrop?研發(fā)成功并投入生產(chǎn)。這是國(guó)內(nèi)***微滴式數(shù)字PCR檢測(cè)系統(tǒng),能廣泛應(yīng)用于醫(yī)療、農(nóng)業(yè)、環(huán)境等領(lǐng)域,未來(lái),采用外周血、唾液、尿液、腦脊液等樣本進(jìn)行低成本、高靈敏、快速的無(wú)創(chuàng)檢測(cè)成為可能。MiniDrop?數(shù)字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測(cè)儀、MDMicrochip微流控芯片及MDPlotter數(shù)據(jù)分析軟件組成,該系統(tǒng)的**為微 流控微滴生成技術(shù),采用原創(chuàng)性的油液,在40um微管道中利用氣壓驅(qū)動(dòng)在2分鐘內(nèi)生成50萬(wàn)微滴,單次運(yùn)行生成400萬(wàn)微滴,微滴體積達(dá)皮升級(jí),檢測(cè)線(xiàn)性范圍達(dá)到5個(gè)數(shù)量級(jí),各項(xiàng)指標(biāo)均超越國(guó)內(nèi)外主流產(chǎn)品??:?上海)儀器科技有限公司為您提供數(shù)字PCR ,有需要可以聯(lián)系我司哦!黑龍江醫(yī)用數(shù)字PCR商家
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數(shù)字PCR也叫DigitalPCR(dPCR),是近幾年發(fā)展起來(lái)的一種核酸定量分析技術(shù)。相較于傳統(tǒng)熒光定量PCR來(lái)說(shuō),數(shù)字PCR對(duì)結(jié)果的判定不依賴(lài)于擴(kuò)增曲線(xiàn)循環(huán)Ct值,不受擴(kuò)增效率的影響,能夠直接讀出DNA的分子個(gè)數(shù),能夠?qū)ζ鹗紭颖竞怂岱肿?**定量。數(shù)字PCR基本原理是將一個(gè)樣本分成幾十到幾萬(wàn)份,然后再將其分配到不同的反應(yīng)單元中,使每個(gè)微滴單元包含一個(gè)或多個(gè)拷貝的核酸分子(即DNA模板),每個(gè)單元都會(huì)對(duì)目標(biāo)分子進(jìn)行擴(kuò)增,然后再對(duì)每個(gè)單元進(jìn)行熒光信號(hào)的統(tǒng)計(jì)并計(jì)算。相對(duì)而言,傳統(tǒng)PCR或qPCR反應(yīng)都是發(fā)生于同一體系當(dāng)中,這也是數(shù)字PCR與其比較大的區(qū)別。 浙江便攜式數(shù)字PCR定制