動(dòng)物疾病模型在人類(lèi)重大疾病研究和新藥創(chuàng)制等方面具有不可替代的重要作用和價(jià)值。與自發(fā)性疾病動(dòng)物模型和環(huán)境誘導(dǎo)、物理因素、藥物誘導(dǎo)的疾病動(dòng)物模型相比,手術(shù)模型操作復(fù)雜、技術(shù)門(mén)檻高,因此也存在相應(yīng)的一些問(wèn)題,如缺乏標(biāo)準(zhǔn)化流程、穩(wěn)定性差、實(shí)驗(yàn)室之間數(shù)據(jù)可比性較差。即便是同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室,重復(fù)性也是一個(gè)很大的挑戰(zhàn)。所以實(shí)現(xiàn)手術(shù)疾病模型的標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化和重復(fù)性仍然是該領(lǐng)域長(zhǎng)期的目標(biāo)。針對(duì)這一現(xiàn)狀,賽業(yè)生物利用多年積累的的堅(jiān)實(shí)經(jīng)驗(yàn)、高效的團(tuán)隊(duì)組建及管理經(jīng)驗(yàn),歷經(jīng)兩年籌備,打造了一支技術(shù)過(guò)硬的小鼠手術(shù)模型服務(wù)團(tuán)隊(duì),熟練掌握多種模型的制備,具備建立復(fù)雜及復(fù)合手術(shù)疾病模型的能力。我們以項(xiàng)目“可重復(fù)”作為金標(biāo)準(zhǔn),對(duì)于客戶(hù)復(fù)雜的項(xiàng)目需求或文獻(xiàn)未見(jiàn)、少見(jiàn)的疾病模型,我們會(huì)與客戶(hù)緊密協(xié)作,認(rèn)真理解和把握需求,制定科學(xué)合理的手術(shù)模型造模方案。希望我們提供的專(zhuān)業(yè)且穩(wěn)定的手術(shù)模型服務(wù)可以節(jié)省您的時(shí)間和精力,讓您可以聚焦到科學(xué)創(chuàng)新性的工作上來(lái)。服務(wù)優(yōu)勢(shì)1.以實(shí)驗(yàn)“可重復(fù)”作為服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)我們以實(shí)驗(yàn)“可重復(fù)”作為金標(biāo)準(zhǔn),對(duì)技術(shù)團(tuán)隊(duì)進(jìn)行大量的手術(shù)模型操作訓(xùn)練,確保疾病模型多個(gè)批次之間數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性。2.一站式服務(wù)。小鼠卵巢早衰POF模型。云南裸鼠動(dòng)物模型建模
脂多糖致膿毒血癥肝損傷小鼠模型【方法】1、小鼠稱(chēng)重,按體重計(jì)算藥物用量。2、脂多糖(LPS)藥物配制,生理鹽水溶解,根據(jù)小鼠體重配制終濃度為10mg/kg,200ul/只腹腔注射使用。3、抓取小鼠,捏緊小鼠頸背部皮膚,小拇指無(wú)名指疊加固定小鼠左下肢充分暴露小鼠腹部。4、小鼠的頭部向下,這樣腹腔中的就會(huì)自然倒向胸部,防止注射器刺入時(shí)損傷腸道。進(jìn)針的動(dòng)作要輕乘,防止刺傷腹部。5、注射器吸取準(zhǔn)備好的藥物,腹腔左下部與身體呈45度角左右斜角進(jìn)針注射LPS,注射完藥物后,輕微旋轉(zhuǎn)針頭退針,防止漏液。6、造模18h后處死小鼠解剖取組織進(jìn)行組織病理學(xué)檢查?!緳z測(cè)】肝組織有無(wú):1、肝水腫;2、肝出血;3、炎性細(xì)胞浸潤(rùn);4、肝組織腫大等病理改變。再觀(guān)察肝損傷程度,各按程度積分為:0分為無(wú)該項(xiàng)病理改變;1分為病理變化輕且很局限;2分為病理變化中等且局限;3分為病變中等但或局部很;4分為非常的理改變。求出各動(dòng)物的各項(xiàng)病理改變的總和,作為肝損傷程度積分。江蘇腦定位動(dòng)物模型通過(guò)建立腦缺血-再灌注動(dòng)物模型,模擬人類(lèi)ICVD的病理過(guò)程。
SD大鼠腦缺血致腦梗死模型【材料】水合氯醛、線(xiàn)栓直徑(體重250-300g)【方法】1、10%水合氯醛(35mg/kg)腹腔注射麻醉。2、仰臥位固定,頸正中線(xiàn)切口,分離肌肉和筋膜,分離左側(cè)頸總動(dòng)脈(CCA)、頸外動(dòng)脈(ECA)和頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA)。3、微動(dòng)脈夾暫時(shí)夾閉頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA),活扣結(jié)扎近心端頸總動(dòng)脈(CCA)、頸外動(dòng)脈(ECA)打雙結(jié),在雙結(jié)中間剪開(kāi)小口插入線(xiàn)栓。4、將拴線(xiàn)插入到頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA),用眼科鑷輕推拴線(xiàn),以頸外動(dòng)脈(ECA)和頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA)分叉處為參考位置。5、栓線(xiàn)插入預(yù)刻深度,感到有阻力,說(shuō)明栓線(xiàn)已到達(dá)腦中動(dòng)脈(MCA),打結(jié)固定栓線(xiàn)。6、血管外的栓線(xiàn)不要留得過(guò)長(zhǎng),1h后拔出栓線(xiàn),縫合傷口,單籠飼養(yǎng)觀(guān)察。注:前兩三天老鼠會(huì)萎靡,不進(jìn)食,注意不要,老鼠無(wú)死亡即可。
酒精性肝病(AH)大鼠模型建模方法【方法】1、正常組大鼠自由飲水。2、酒精性脂肪肝(alcoholicfattyliverdisease,AFL)模型組大鼠自由飲用酒精飲料,其酒精濃度從5%開(kāi)始,每個(gè)濃度維持一周,依次改為10%、15%、20%、25%、30%、35%至40%,以40%濃度持續(xù)至12周。3、在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,各組大鼠均給以普通顆粒飼料,共持續(xù)為12周。4、第12,動(dòng)物禁食12h,稱(chēng)重,下腔靜脈取血處死,血液離心取上清備用?!緳z測(cè)】1、生化指標(biāo)檢測(cè)檢測(cè)ALT、AST、TC、TG、FFA、LDL-C、HDL-C和血糖的含量。2、組織病理學(xué)酒精性脂肪肝模型組大鼠肝臟體積增大,明顯腫脹,包膜緊張,邊緣圓鈍,呈奶黃色,切面油膩,腹腔內(nèi)尤以有腹膜后脂肪堆積明顯。HE染色顯示,正常組肝臟內(nèi)無(wú)明顯脂肪變性,肝小葉結(jié)構(gòu)正常,肝細(xì)胞索圍繞靜脈呈放射排列。模型組肝臟彌漫大量脂肪變性,細(xì)胞體積增大,呈氣球樣變。3、標(biāo)志因子水平ELISA法測(cè)定血清中TNF-α和ApoB的含量。通過(guò)高脂飲食誘導(dǎo)構(gòu)建非酒精性脂肪肝模型。
agtacacacactggagagaaaccctataaatgtaaccagtgtggtaaagcctttgcatatcacattactctccgaacacataaaggaacacacactgaagagaaaccctatgaatgtaaccaatgtggtaaagcctttgcatattccaacagtctccaaatacatcaaagaacacacactggagagaaaccctatgaatgtaaccagtgtggtaaagcctttgcatatcacaatagtctccaaatacataaaagtacacacactggagagaaaccctatgaatgtaaccagtgtggtaaagcctttgtatgtagcagtcattttcaaaggcataaaaaaattcatactggagagaaaccctatgattgtaaccagtgtggtaaagcctttgcatataaaagtaatctccaaattcatgaaagaaaacacactggagggaaaccctctgaatgtaattaatgtagtaaagcttttgcatttcataatagtttccaaatacataaaagaacacatagtgagagaaaccctatgaatataaccaatgtggtaaaacatttccatatctcagtggtctccgcatttataacagaacacatagtggagagaaaccctatggatgtaa。gm20541在小鼠體內(nèi)的具體作用機(jī)制尚不清楚,限制了其開(kāi)發(fā)應(yīng)用。迄今為止,還沒(méi)有針對(duì)gm20541基因的功能研究,其生物學(xué)功能不甚明了。本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn),在目標(biāo)動(dòng)物如小鼠的視網(wǎng)膜前體細(xì)胞中敲除gm20541基因即沉默或敲減gm20541基因的表達(dá),可以使得目標(biāo)動(dòng)物表現(xiàn)出視網(wǎng)膜色素變性性疾病相關(guān)的特征例如視桿細(xì)胞死亡并繼發(fā)視錐細(xì)胞死亡,主要表現(xiàn)為光感受器受損、變性,視網(wǎng)膜外核層逐漸變薄直至消失。骨質(zhì)疏松癥是目前世界上發(fā)病率、死亡率和醫(yī)療保健消耗較大的疾病之一,已成為全世界范圍的嚴(yán)重的社會(huì)問(wèn)題。湖南C57動(dòng)物模型造模
故大腦中動(dòng)脈阻塞(MCAO)模型被用于局灶性腦缺血的研究。云南裸鼠動(dòng)物模型建模
brain:腦組織;liver:肝臟;retina:視網(wǎng)膜,intestine:腸;muscle:肌肉;heart:心臟;kidney:腎臟;spleen:脾;b:圖1中a的統(tǒng)計(jì)結(jié)果;c:westernblot檢測(cè)gm20541蛋白在不同組織的表達(dá);d:圖1中c的統(tǒng)計(jì)結(jié)果。圖2:gm20541基因敲除小鼠的構(gòu)建路線(xiàn);圖中sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型;het是指雜合子。圖3:中長(zhǎng)距離pcr鑒定子一代鼠的結(jié)果;圖中:a:擴(kuò)增5’端長(zhǎng)臂使用引物對(duì)gm5’lrf和sa3’r,擴(kuò)增產(chǎn)物為;其中a2,3,6,9,10,b1為陽(yáng)性;b:擴(kuò)增3’端長(zhǎng)臂使用引物對(duì)neof和gm3’lrr,擴(kuò)增產(chǎn)物為。其中:a2,3,6,9,10,b6,9,es1g,es2g為陽(yáng)性雜合子,+/+為野生型對(duì)照。圖4:gm20541基因敲除小鼠的鑒定;a:gm20541基因敲除小鼠的基因型鑒定結(jié)果;b:實(shí)時(shí)定量pcr實(shí)驗(yàn)分析gm20541敲除小鼠視網(wǎng)膜中基因敲除效率,證明gm20541在敲除小鼠視網(wǎng)膜中不再表達(dá);sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型;het是指雜合子。圖5:暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖(electroretinogram,erg)檢測(cè)結(jié)果;圖中:a-c:不同光強(qiáng)下gm20541基因敲除小鼠的暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖軌跡圖;d:不同光強(qiáng)下gm20541基因敲除小鼠的暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖a波統(tǒng)計(jì)。云南裸鼠動(dòng)物模型建模