采集精液前5~7天內(nèi)必須停止性生活,并且不得有**、夢遺等情況,還應(yīng)禁煙戒酒,忌服對生精功能有影響的藥物等。采取精液時間以晨起為佳,采精前用溫水將雙手、**,尤其是**洗凈??刹捎?*法或電動按摩**法引起排精。精液的排出具有一定順序,開頭部分來自前列腺、附睪及壺腹,伴有大量精子,***部分來自精囊,故應(yīng)收集整份精液,不要遺漏任何部分,尤其是開頭部分。正因為易丟失精液的***部分,故不能用體外**法收集精液。盛精液的容器應(yīng)干凈、無菌、干燥,采精前容器的溫度應(yīng)與室溫相同;瓶子不應(yīng)過大,但瓶口不應(yīng)過小,以免將精液射出瓶外;還應(yīng)貼上標簽,記錄姓名及取精時間。在冷天應(yīng)將精液標本保溫,放置在貼身內(nèi)衣袋中,不可傾斜或倒置,盡可能在1小時內(nèi)送到實驗室。計算機輔助精子分析(computer- assisted sperm analysis)是2014年公布的泌尿外科學名詞。香港魚精子分析W.H.O 6
醫(yī)生處置質(zhì)量是指診斷質(zhì)量?是以當今醫(yī)學科學知識、技術(shù)為基礎(chǔ)依據(jù)癥狀來完成的。CASA系統(tǒng)可以為醫(yī)生提供優(yōu)于傳統(tǒng)精子分析的手段和快速準確的分析結(jié)果[5]。CASA在醫(yī)生處置質(zhì)量方面的特點在于:①當CASA系統(tǒng)的參數(shù)設(shè)定和樣品的處理方式(溫度、稀釋法、緩沖液)確定時?通過個體內(nèi)和個體間的比較?CASA的精子活力重復性明顯好于直觀評估[6]。②實驗室數(shù)據(jù)資料是質(zhì)量的一部分?CASA系統(tǒng)所有數(shù)據(jù)都是直接在線獲得的?因此明顯優(yōu)于其他方法[6]?記錄傳遞到數(shù)據(jù)庫的過程無錯誤發(fā)生?可清楚準確地打印出結(jié)果。所有的數(shù)據(jù)可直接轉(zhuǎn)換到數(shù)據(jù)庫、能夠?qū)?**前和***后測定的數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學比較[9]、質(zhì)量控制數(shù)據(jù)的采集與保存、每天的標本測試記錄以及許多其他報告等等?如此大量數(shù)據(jù)的處理只有在計算機中才能完成。但是CASA系統(tǒng)的參數(shù)設(shè)定也許限制了其質(zhì)量?特別是在精子形態(tài)學檢查中?通過CASA系統(tǒng)對精子形態(tài)學特征進行分析[7]?這些特征(細胞大小、形狀、光學密度、尾的存在以及其它)可由操作者選擇?這樣就會引起同一標本在不同實驗室或不同分析者測得的結(jié)果一致性較差[8]。就形態(tài)學分析而言?傳統(tǒng)方法的可變性遠遠大于CASA分析。香港快速運動精子分析重復性高Hamilton Thorne自動精子分析儀具有高精度、高效率和自動化的優(yōu)點。
HamiltonThorne精子分析儀IVOSⅠ與IVOSⅡ一致性比對分析根據(jù)質(zhì)量控制的要求,對新精子分析系統(tǒng)進行性能驗證后,應(yīng)與舊系統(tǒng)進行一致性評價,從而保證檢測結(jié)果的準確性。方法:選用原有HamiltonThorne精子分析儀IVOSⅠ為參比儀器,新購儀器IVOSⅡ為實驗儀器,對精子分析系統(tǒng)的主要參數(shù)(精子濃度、前向運動精子百分率、總活力)進行分析比對。結(jié)果:兩臺儀器的方法內(nèi)和方法間離群值檢驗、偏倚圖和散點圖的線性關(guān)系和離群值檢測所有參數(shù)均能符合比對要求,檢測結(jié)果具有相關(guān)性;對實驗儀器的檢測結(jié)果適合范圍的檢驗,當其精子濃度r=0.988,前向運動精子百分率r=0.975,總活力r=0.981,r均≥0.975,表明取值范圍合適;對預期偏倚(Bc)的接受性評價表明當精子濃度在12×10~6/ml,允許總誤差(TEa)為6.67%;當前向運動精子百分率<31%,TEa為2.34%,兩項檢測的Bc上限<1/2允許誤差(Ea),實驗儀器經(jīng)比對分析顯示符合質(zhì)控要求。結(jié)論:通過比對分析,得出兩臺精子分析系統(tǒng)的主要參數(shù)(精子濃度、前向運動精子百分率、總活力)結(jié)果具有可比性,檢測結(jié)果一致,可同時用于臨床標本的檢測。
七、精子形態(tài)檢查[正常參考值]畸形精子:<10%-15%;凝集精子:<10%;未成熟精細胞:<1%。[臨床意義]1.精索靜脈曲張病人的畸形精子增多,提示精子在不成熟時已進入精液,或靜脈回流不暢造成陰囊內(nèi)溫度過高和睪丸組織缺氧,或血液帶有毒性代謝產(chǎn)物從腎或腎上腺靜脈逆流至睪丸,上述原因均有損于精子形態(tài)。2.精液中凝集精子增多,提示生殖道***或免疫功能異常。3.睪丸曲細精管生精功能受到藥物或其他因素影響或傷害時,精液中可出現(xiàn)較多病理性未成熟精細胞。八、精液細胞檢查[正常參考值]白細胞(WBC):<5個/HP(高倍鏡視野);紅細胞(RBC):0-偶見/HP。[臨床意義]1.精液中白細胞增多,常見于精囊炎、前列腺炎及結(jié)核等。2.精液中紅細胞增多,常見于精囊結(jié)核、前列腺*等。3.精液中若查到*細胞,對生殖系*有診斷意義。在男科和輔助生殖技術(shù)領(lǐng)域,精子質(zhì)量的評估是診斷和處理的重要環(huán)節(jié)。
通過結(jié)果的生物學意義對結(jié)果質(zhì)量進行評估?當所有具生物學意義的參數(shù)在測試中表現(xiàn)出較小的可變性時則方法學可變性亦較低方法學可變性低則結(jié)果質(zhì)量就高。CASA系統(tǒng)獲得的數(shù)值與直觀評估獲得的數(shù)值進行分析和比較在精子數(shù)量和綜合運動性上具有較好的相關(guān)性而·131·中國優(yōu)生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向運動精子百分率上的相關(guān)性較低]。Holt等報道了在常規(guī)實驗條件下采用五種不同的CASA系統(tǒng)對**參數(shù)值進行比較,其結(jié)果為:采用同一個測定池由不同的操作者測定**參數(shù);變異系數(shù)(CV)是29%?活動精子比率的CV為24%?平均路徑速度(VAP)的CV為43?85%。作者們指出該分析結(jié)果不應(yīng)看作是不同CASA系統(tǒng)間的工作情況的比較?實際上它揭示了操作者的錯誤是差異的主要來源。目前有待于尋找進一步的標準來評估CASA變量的結(jié)果質(zhì)量。精子***的生物學功能是使卵細胞授精?因此用夫婦中的授精結(jié)果來考察精子運動性是合理的?只有在該基礎(chǔ)上能夠確定活動性參數(shù)的重要性。輔助生殖技術(shù)(授精IVF)的發(fā)展使檢測精子質(zhì)量與各參數(shù)間的關(guān)系的比較成為可能;同樣可以驗證CASA測定結(jié)果與精子真實質(zhì)量間的相關(guān)性有利于CASA結(jié)果質(zhì)量的提高。精子分析系統(tǒng)較傳統(tǒng)的分析法比較,具有速度快、量比性好、準確性高、為臨床和科研提供客觀的檢測依據(jù)。美國人精子分析DSL
HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù),直線性(LIN)?:曲線軌跡的直線性。香港魚精子分析W.H.O 6
CASA系統(tǒng)雖然有諸多優(yōu)點,但是很多因素都會影響到CASA儀器的使用及準確性。CASA系統(tǒng)進行**分析應(yīng)注意以下幾點:3.1標本的采集與制作(1)采集前禁欲2?7天,禁欲時間過長、過短對**質(zhì)量都有一定影響。(2)容器要清潔。(3)特殊情況下,*可使用專門為采集**設(shè)計的無毒性避孕套,普通的乳膠避孕套因含有損害精子活力的物質(zhì)不可使用。(4)注意保溫(20?37℃),并于30分鐘內(nèi)送檢驗科。(5)標本置于37℃水浴.精子運動參數(shù)具有溫度敏感性,因此要求計數(shù)池應(yīng)于分析儀恒溫板上預溫。(6)密切注意**液化的情況,確保液化時間準確,因**樣本隨放置時間的延長,精子活動力及活動率有減少的趨勢。標本液化后取混勻樣本**1滴滴在樣品池中間,然后進行分析。(7)檢測精子活動力,標本密度應(yīng)控制在2×106/ml到50×106/ml之間。具有高密度(如高于50×106/ml)精子的標本,通常會增加碰撞的頻率,并可能由此出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。在這種情況下,建議用同源精漿稀釋標本。香港魚精子分析W.H.O 6