CASA，即計(jì)算機(jī)輔助精子分析，是一種利用技術(shù)手段對(duì)精子活力、濃度和形態(tài)進(jìn)行精確評(píng)估的方法。WHO第五版指南強(qiáng)調(diào)，相比人工檢測(cè)，CASA提供更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)和精子動(dòng)力學(xué)參數(shù)，如前向運(yùn)動(dòng)和超活化運(yùn)動(dòng)，以及獲能精子特征參數(shù)。研究顯示，CASA檢測(cè)的精子參數(shù)與體內(nèi)外受精成功率和受孕時(shí)間有***關(guān)聯(lián)。使用CASA分析儀，通常通過相差顯微鏡識(shí)別活動(dòng)精子，適用于精子動(dòng)力學(xué)分析。但要確?？煽拷Y(jié)果，操作者需注意標(biāo)本制備、幀頻率、精子濃度等因素。每份樣本至少需要分析200個(gè)活動(dòng)精子的運(yùn)動(dòng)軌跡，更多精子樣本有助于分類和變異性的分析。國內(nèi)已有自主研發(fā)的精子分析儀，通常進(jìn)行兩次分析，每次至少200個(gè)精子，結(jié)果通過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析得出。CASA在評(píng)估精子濃度時(shí)，需精確測(cè)量精子體積，確保**完全液化并充分混勻。計(jì)數(shù)板的精確性和計(jì)數(shù)一致性是關(guān)鍵，每次檢測(cè)需滿足5個(gè)視野和200條以上精子的比較低要求。對(duì)于高濃度**，可能需要稀釋以減少誤差。形態(tài)分析方面，CASA能夠定量評(píng)估精子頭部、中段和主段，尾部缺陷可通過活力評(píng)估。對(duì)于碎片過多或黏稠的**，可能需要洗滌以減少背景干擾。CASA中涉及一系列術(shù)語，如VCL（曲線速度）、VSL（直線速度）等，它們反映了精子運(yùn)動(dòng)的不同特性。精子分析儀參數(shù)，平均路徑速率（VAP）?：精子頭沿其平均路徑移動(dòng)時(shí)的時(shí)均速率。上海瀕危物種精子分析

CASA系統(tǒng)雖然有諸多優(yōu)點(diǎn)，但是很多因素都會(huì)影響到CASA儀器的使用及準(zhǔn)確性。CASA系統(tǒng)進(jìn)行**分析應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：3.1標(biāo)本的采集與制作（1）采集前禁欲2?7天，禁欲時(shí)間過長、過短對(duì)**質(zhì)量都有一定影響。（2）容器要清潔。（3）特殊情況下，*可使用專門為采集**設(shè)計(jì)的無毒性避孕套，普通的乳膠避孕套因含有損害精子活力的物質(zhì)不可使用。（4）注意保溫（20?37℃），并于30分鐘內(nèi)送檢驗(yàn)科。（5）標(biāo)本置于37℃水浴.精子運(yùn)動(dòng)參數(shù)具有溫度敏感性，因此要求計(jì)數(shù)池應(yīng)于分析儀恒溫板上預(yù)溫。（6）密切注意**液化的情況，確保液化時(shí)間準(zhǔn)確，因**樣本隨放置時(shí)間的延長，精子活動(dòng)力及活動(dòng)率有減少的趨勢(shì)。標(biāo)本液化后取混勻樣本**1滴滴在樣品池中間，然后進(jìn)行分析。（7）檢測(cè)精子活動(dòng)力，標(biāo)本密度應(yīng)控制在2×106/ml到50×106/ml之間。具有高密度（如高于50×106/ml）精子的標(biāo)本，通常會(huì)增加碰撞的頻率，并可能由此出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。在這種情況下，建議用同源精漿稀釋標(biāo)本。南京CASA精子分析VCL電腦全自動(dòng)精子采集分析儀是一款高科技醫(yī)療設(shè)備，它巧妙地融合了現(xiàn)代計(jì)算機(jī)技術(shù)和自動(dòng)控制技術(shù)。

CASA系統(tǒng)進(jìn)行**分析應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：3.2**分析儀閾值的確定（1）精子灰度、對(duì)比度閾值：由于分析儀是根據(jù)灰度的高低來判斷精子的真?zhèn)?，?duì)亮度和對(duì)比度要求特別高，檢測(cè)時(shí)應(yīng)多次試用，尋找能準(zhǔn)確識(shí)別精子的比較好灰度閾值[8]。（2）碎片：測(cè)定精子濃度準(zhǔn)確性受**中細(xì)胞成份和非精子的顆粒物質(zhì)的干擾，測(cè)定活動(dòng)精子的百分率也受精子中非精子物質(zhì)的影響[9]，這些也是需要注意的。對(duì)于系統(tǒng)誤認(rèn)為精子的非精子成分，如精原細(xì)胞、白細(xì)胞和非白細(xì)胞顆粒等，可人為準(zhǔn)確記數(shù)后在可刪除雜質(zhì)一欄將其舍去。3.3出現(xiàn)1次異常結(jié)果應(yīng)間隔復(fù)查反復(fù)檢查2?3次方能得出比較正確的結(jié)果。3.4對(duì)于無精子的患者應(yīng)仔細(xì)進(jìn)行視野檢查注意不要將雜質(zhì)誤認(rèn)為精子計(jì)數(shù)在內(nèi)，應(yīng)將**3000ɡ離心15分鐘后，再涂片檢查，確認(rèn)無精后再出報(bào)告。

測(cè)定精子密度和精子總數(shù)的方法主要包括顯微鏡計(jì)數(shù)和全自動(dòng)分析。1.顯微鏡計(jì)數(shù)：這是傳統(tǒng)的測(cè)定方法，需要收集精液，通常是使用量杯。收集后，應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室中盡快進(jìn)行計(jì)數(shù)。應(yīng)在光學(xué)顯微鏡下將精子進(jìn)行分類，這一步非常重要，因?yàn)橥暾木硬拍鼙挥?jì)數(shù)。然后，將剩余的精液樣本通過自然沉降或離心的方法讓精子下沉，通過顯微鏡觀察并計(jì)數(shù)。這種方法需要一定的經(jīng)驗(yàn)和技巧，而且受到許多因素的影響，如精子的活動(dòng)性、濃度、形態(tài)等。2.全自動(dòng)分析：隨著科技的發(fā)展，現(xiàn)在有全自動(dòng)的精子分析儀，可以快速準(zhǔn)確地測(cè)定精子密度和總數(shù)。這種方法通過激光技術(shù)進(jìn)行，可以測(cè)量大量精子，包括前向運(yùn)動(dòng)的精子。這些儀器通?？梢蕴峁└_的結(jié)果，并且減少了人為錯(cuò)誤。在進(jìn)行精子計(jì)數(shù)前，男性應(yīng)避免長時(shí)間禁欲，因?yàn)檫@可能會(huì)影響精子的數(shù)量和質(zhì)量。同時(shí)，健康的飲食和生活方式也有助于提高精子的數(shù)量和質(zhì)量。?精子分析可以分析參數(shù)有，曲線速率（VCL）?：精子頭沿其實(shí)際曲線運(yùn)動(dòng)的時(shí)均速率。

前沿性檢查：目前不作為生育力低下男性初步評(píng)估的常規(guī)方法。這一部分包括了非常專業(yè)化的、主要用于研究的方法和其他新興檢測(cè)技術(shù)。有研究認(rèn)為，氧化應(yīng)激可能是影響人類精子功能和妊娠結(jié)局的重要因素；新的證據(jù)也表明了精子DNA完整性和染色質(zhì)組裝與生育力的關(guān)系。前沿性檢查一節(jié)中詳細(xì)介紹了精子氧化應(yīng)激和活性氧實(shí)驗(yàn)、精子染色質(zhì)檢測(cè)(苯胺藍(lán)和色霉素A3染色)的具體實(shí)驗(yàn)操作及討論。手冊(cè)重寫了計(jì)算機(jī)輔助精子分析(CASA)部分，強(qiáng)調(diào)了CASA對(duì)于檢測(cè)精子濃度的局限性與質(zhì)控要求，增加了CASA檢測(cè)精子超活化運(yùn)動(dòng)的內(nèi)容。對(duì)精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的功能分析，可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。為此，手冊(cè)新增了檢測(cè)精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的內(nèi)容。精子分析，直線速率（VSL）?：精子頭在開始檢測(cè)時(shí)的位置與終止所處位置之間的直線運(yùn)動(dòng)的時(shí)均速率。廣州慢速運(yùn)動(dòng)精子分析W.H.O 4

精子分析系統(tǒng)較傳統(tǒng)的分析法比較，具有速度快、量比性好、準(zhǔn)確性高、為臨床和科研提供客觀的檢測(cè)依據(jù)。上海瀕危物種精子分析

世界衛(wèi)生組織(WHO)《人類精液及精子—宮頸粘液相互作用實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)手冊(cè)》于1980年***出版，以滿足臨床與科研對(duì)人類精液標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)程序日益增長的需求。該手冊(cè)是人類精液實(shí)驗(yàn)室檢查和處理程序及方法的標(biāo)準(zhǔn)操作指南，旨在提高精液分析的質(zhì)量和提高不同實(shí)驗(yàn)室結(jié)果的可比性。在過去40年里，該手冊(cè)進(jìn)行了4次修訂與補(bǔ)充(1987年、1992年、1999年和2010年)，內(nèi)容涉及精液檢查的標(biāo)準(zhǔn)化操作程序、精子功能、精漿生化、精液處理與冷凍以及質(zhì)量保證等，已成為國際公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)，被世界各地臨床和實(shí)驗(yàn)室***使用。中國衛(wèi)生部已在2003年將其納入人類輔助生殖技術(shù)規(guī)范。WHO《人類精液檢查與處理實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)(第5版)》精液參考值的數(shù)據(jù)是來自全球3大洲8個(gè)國家的前瞻性、多中心臨床研究的結(jié)果，通過循證醫(yī)學(xué)研究獲得的精液參數(shù)參考值具有里程碑式意義。自2010年出版以來成為WHO很受歡迎的出版物之一，即使在**近幾年其下載量也在穩(wěn)步增長。它是男科實(shí)驗(yàn)室及全球范圍內(nèi)開展精液分析操作的其他實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)院和研究機(jī)構(gòu)使用的標(biāo)準(zhǔn)操作手冊(cè)。該手冊(cè)在國際大會(huì)、科學(xué)會(huì)議、以及WHO合作中心、專業(yè)學(xué)會(huì)和其他學(xué)術(shù)機(jī)構(gòu)的培訓(xùn)項(xiàng)目中進(jìn)行了***傳播。截止到2021年，已被3000余篇同行評(píng)議論文和評(píng)論引用。上海瀕危物種精子分析