用多聚抗原肽(multipleantigenpeptides,MAP)包被磁珠制備單表位抗體的方法.方法:通過Fmoc法固相化學合成UreB的8分支單表位MAP,將其作為免疫原免疫小鼠,獲得多克隆抗血清.將MAP以共價偶聯(lián)的方式包被磁珠制備免疫磁珠(immunomagneticbeads,IB),通過IB從多克隆抗血清中純化單表位抗體,熒光偏振(fluorescencepolarization,FP)法鑒定抗體的特異性,SDS-PAGE鑒定抗體純度,紫外分光光度法測定其回收率.結(jié)果:合成的MAP具有較強的免疫原性,免疫小鼠后得到的抗體滴度高達1∶12800.MAP制備免疫磁珠的比較好包被濃度為100mg/L,包被效率比較高可達79%.應用MAP免疫磁珠從抗血清中純化得到的單表位抗體,經(jīng)鑒定與其他抗原表位無反應性,其純度為95%,抗體的回收率為5.8%.結(jié)論:MAP包被的磁珠可快速分離純化出針對某一抗原表位的特異性抗體,其性質(zhì)類似單克隆抗體.這一方案在快速制備少量高特異性抗體中具有廣闊的應用前景.BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠全國招商代理。河南anti-HA COIP免疫磁珠哪家好
從白血病KG1a細胞中分選CD34+CD38-干細胞并研究其生物學特性.方法免疫磁珠法分選CD34+CD38-細胞,流式細胞術(shù)分析細胞表面膜抗原,細胞周期,甲基纖維素培養(yǎng)體系觀察其克隆性;以HL60,K562,CD34+CD38+細胞為對照,甲基偶氮唑藍法檢測柔紅霉素對CD34+CD38-細胞的抑制作用;BALB/c裸鼠皮下接種,觀察體內(nèi)成瘤能力.結(jié)果分選的CD34+CD38-細胞純度達95%以上,(69.03±3.25)%處于G0期,克隆形成率為(38.64±2.68)%,明顯抵抗柔紅霉素;不同濃度柔紅霉素作用后,CD34+CD38-,CD34+CD38+,HL60,K562細胞的活性差異有統(tǒng)計學意義(F=961.136,P=0.000);CD34+CD38-在裸鼠皮下成瘤率***高于CD34+CD38+細胞(P〈0.05).結(jié)論免疫磁珠法分選白血病干細胞簡單易行,分選的細胞符合白血病干細胞生物學特性.遼寧anti-HA 免疫共沉淀免疫磁珠送貨上門上海普平生物科技有限公司免疫磁珠的售后服務很好。
免疫磁珠分離成人骨髓中STRO-1^+陽性細胞,獲得同質(zhì)性骨髓基質(zhì)干細胞.方法:實驗于2004-06/2005-06在東南大學修復重建外科研究所實驗室完成.采集正常自愿獻髓者骨髓,淋巴細胞分離液體離心純化分離后利用免疫磁珠分離出STRO-1^+細胞,研究其生長曲線,體外擴增能力,集落形成能力,細胞表型,細胞周期,成骨能力.結(jié)果:①利用免疫磁珠可從成人骨髓中獲取STRO-1^+細胞.經(jīng)體外培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)STRO-1^+細胞貼壁生長,相差顯微鏡下STRO-1^+細胞呈成纖維細胞梭形外觀.②生長曲線可分為細胞生長延滯期,對數(shù)生長期及穩(wěn)定期,細胞倍增時間為57h.③STRO-1^+細胞可以在體外擴增12周左右,形成的成纖維細胞集落數(shù),處于細胞分裂期的細胞數(shù),擴增倍數(shù)均低于傳統(tǒng)分離方法得到的骨髓基質(zhì)干細胞.④經(jīng)流式細胞儀檢測,STRO-1^+細胞穩(wěn)定地表達CD29,CD44,CD105,不表達造血細胞系的表面標記CD14,CD34,CD45,HLA-DR.⑤經(jīng)成骨培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)STRO-1^+的骨髓基質(zhì)干細胞具有很強的成骨分化能力.結(jié)論:利用免疫磁珠能夠從成人骨髓中快速分離,純化骨髓基質(zhì)干細胞,且具有高效,靈敏。
免疫共沉淀（COIP）優(yōu)點（1）相互作用的蛋白質(zhì)都是經(jīng)翻譯后修飾的，處于天然狀態(tài)；（2）蛋白的相互作用是在自然狀態(tài)下進行的，可以避免人為的影響；（3）可以分離得到天然狀態(tài)的相互作用蛋白復合物。免疫共沉淀（COIP）缺點（1）可能檢測不到低親和力和瞬間的蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)相互作用；（2）兩種蛋白質(zhì)的結(jié)合可能不是直接結(jié)合，而可能有第三者在中間起橋梁作用；（3）必須在實驗前預測目的蛋白是什么，以選擇***檢測的抗體，所以，若預測不正確，實驗就得不到結(jié)果，方法本身具有冒險性。（4）靈敏度沒有親和色譜高。買免疫磁珠就找上海普平生物科技有限公司！
精原干細胞(spermatogonialstemcells,SSCs)富集純化是利用SSCs進行基因修飾新方法等研究的前提基礎(chǔ)。采用免疫磁珠分選法,使用干細胞抗體CD90.2進行小鼠SSCs的純化富集,并采用流式細胞分析法和定量PCR驗證了磁珠分選效率。流式細胞分析結(jié)果:免疫磁珠分選后SSCs純度為50.11%。熒光定量PCR檢測結(jié)果:磁珠分選后支持細胞特異表達基因GATA4***下調(diào)(6倍)、SSCs表達基因GFRα-1上調(diào)(6.5倍)、生殖干細胞特異表達基因OCT4極***上調(diào)(5.9倍),3個基因相對表達量的變化說明,免疫磁珠分選效率為6倍。流式細胞分析法所產(chǎn)生的偏差可能是受到了未解離磁珠及SSCs本身轉(zhuǎn)基因熒光的影響。上海普平生物科技有限公司銷售免疫磁珠價格低廉。天津anti-HA COIP免疫磁珠送貨上門
免疫磁珠的優(yōu)點有很多。河南anti-HA COIP免疫磁珠哪家好
免疫磁珠法(MACS)：免疫磁珠法是2O世紀80年代出現(xiàn)的技術(shù)方法。1983年Ugelstad提出將免疫磁珠用于細胞分選，1990年，Mihenyi建立了MACS。這一方法的**是在磁珠表面包被具免疫反應性的抗體進行抗原抗體反應，在細胞表面形成玫瑰花結(jié)，這些結(jié)合了磁珠的細胞一旦置于強大的磁場下，就會與其他未被結(jié)合的細胞分群，具***順磁場的磁珠脫離磁場后立即消失磁性，這樣就可以篩選或去除所標記的細胞，從而達到陽性或陰性選擇細胞的目的。這一技術(shù)已經(jīng)***運用于細胞及分子生物學，分離基因、靶細胞及造血干細胞等。其分離效果得到了免疫熒光、PCR、FISH及FACS等方法的確認。免疫磁珠可以有效地分選細胞，從而決定了這一方法在神經(jīng)干細胞分選中應用的技術(shù)可行性。河南anti-HA COIP免疫磁珠哪家好
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