免疫磁珠法(MiniMACS)在分離純化外周血CD4+和CD8+T淋巴細胞亞群中的應用.方法:應用密度梯度離心法分離外周血單個核細胞(Peripheralbloodmononucleatecells,PBMC),采用MiniMACS分別分離和純化39例標本外周血PBMC中的CD4+T淋巴細胞和CD8+T淋巴細胞,并經(jīng)流式細胞儀分析細胞純度和臺盼藍染色的方法對細胞活力進行評估.結(jié)果:MiniMACS分離外周血CD4+T淋巴細胞前,后細胞純度分別為(37.38±5.74)%,(97.75±1.03)%(P〈0.001),CD8+T淋巴細胞分離純化前后細胞純度分別為(20.11±6.83)%,(96.85±1.86)%(P〈0.001);外周血分離前PBMC細胞活力為(97.66±2.73)%,純化為CD4+T淋巴細胞和CD8+T淋巴細胞后細胞活力分別為(97.44±3.08)%,(98.05±2.92)%(P〉0.05).結(jié)論:MiniMACS可以高度富集CD4+T淋巴細胞和CD8+T淋巴細胞且不改變細胞的活力.BEENbio Anti HA Co-IP&CHIP磁珠廠家直銷。江蘇anti-HA 免疫共沉淀免疫磁珠市場報價
人腦**組織中分離,培養(yǎng),純化和鑒定腦**干細胞(BTSCs),探討CD133免疫磁珠分選方法獲取BTSCs的可行性及BTSCs的生物學特性.方法:留取人腦膠質(zhì)母細胞瘤新鮮標本,分離獲得腦腫瘤細胞.應用CD133免疫磁珠分選方法純化BTSCs;流式細胞儀檢測分選陽性率;神經(jīng)球計數(shù)法分析CD133+/-亞群細胞神經(jīng)球形成情況;免疫熒光方法檢測CD133+/-亞群細胞表面神經(jīng)干細胞(NSCs)標記物CD133,神經(jīng)巢蛋白(nestin)表達情況;檢測CD133+/-亞群細胞經(jīng)誘導分化后細胞表面分化標記物β-TubulinⅢ,GFAP表達情況.結(jié)果:CD133+亞群細胞具有干細胞特性,可形成明顯的神經(jīng)球,具有自我更新和明顯的增殖能力,并且NSCs標記物CD133,nestin表達陽性,經(jīng)誘導分化后分化標記物β-TubulinⅢ,GFAP表達陽性;CD133-亞群細胞無上述特性.結(jié)論:CD133免疫磁珠分選方法獲得的CD133+亞群細胞即為BTSCs,該方法可以得到高純度的BTSCs,可以用于BTSCs的實驗研究.北京anti-Flag COIP免疫磁珠哪家好上海普平生物科技有限公司主做免疫磁珠的批發(fā)銷售。
CoIP ：實驗原理一切從 CoIP 的原理談起：免疫共沉淀是一種以抗體和抗原識別專一性為基礎，用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。實驗步驟第一步：樣品制備首先進行樣品制備，以提取出想要研究的蛋白，由于不同類型的細胞裂解條件有所差異，這里不展開介紹。注意事項：細胞裂解要采用溫和的裂解條件，避免破壞細胞內(nèi)存在的蛋白間相互作用，裂解、洗滌時需使用非變性裂解液，如 NP-40 和 Triton X-100。此外，由于不同細胞裂解條件不一樣，建議通過預實驗來確定比較好條件。第二步：固定抗體在共沉淀之前，先將固相基質(zhì)與抗體共同孵育，從而使兩者結(jié)合，常用的固相基質(zhì)有瓊脂糖 Agarose 和磁珠 Magnetic beads。瓊脂糖 Agarose 具有簡單易用，直徑大，結(jié)合力強，多孔易吸附的特點；磁珠具有直徑小，背景低，抗體消耗少的特點，但操作時需借助磁力架。注意事項：抗體的選擇十分重要，選經(jīng)過 IP 驗證的抗體，可以減少假陽性概率。同時，要注意抗體/緩沖液的比例，抗體稀釋過度不利于后續(xù)抗原抗體結(jié)合；而抗體過多就不能完全沉降在固相基質(zhì)上，殘存于上清。操作時，為了避免損傷 beads，使用大口徑或截短***頭進行加樣。
小鼠脾臟CD8+T細胞的免疫磁珠負性分選方法,并對分選后所得細胞進行純度、活力及功能檢測.方法以免疫磁珠負性分選法從小鼠脾臟細胞中分離CD8+T細胞,流式細胞術檢測所得細胞的純度,臺盼藍檢測細胞活力并用ConA刺激檢測增殖能力.結(jié)果經(jīng)過流式細胞儀測定免疫磁珠負性分選后的小鼠脾臟CD8+T細胞純度達到(91.6±3.6)%,臺盼蘭染色細胞活力為(94.9±3.2)%,ConA刺激72h后有(56.3±1.7)%的細胞增殖.結(jié)論免疫磁珠負性分選法能夠分選出高純度的CD8+T細胞,并且不影響分選靶細胞的細胞活力和功能.想要買免疫磁珠？您要先了解免疫磁珠的特點。
免疫共沉淀（COIP）實驗過程（1）轉(zhuǎn)染后24-48h可收獲細胞，加入適量細胞裂解緩沖液（含蛋白酶抑制劑），冰上裂解30min,細胞裂解液于4°C，最大轉(zhuǎn)速離心30min后取上清；（2）取少量裂解液以備Westernblot分析，剩余裂解液加1μg相應的抗體加入到細胞裂解液，4°C緩慢搖晃孵育過夜；（3）取10μlproteinA瓊脂糖珠，用適量裂解緩沖液洗3次，每次3,000rpm離心3min；（4）將預處理過的10μlproteinA瓊脂糖珠加入到和抗體孵育過夜的細胞裂解液中4°C緩慢搖晃孵育2-4h，使抗體與proteinA瓊脂糖珠耦聯(lián)；（5）免疫沉淀反應后，在4°C以3,000rpm速度離心3min，將瓊脂糖珠離心至管底；將上清小心吸去，瓊脂糖珠用1ml裂解緩沖液洗3－4次；***加入15μl的2×SDS上樣緩沖液，沸水煮5分鐘；（6）SDS-PAGE,Westernblotting或質(zhì)譜儀分析。注意的問題：（1）細胞裂解采用溫和的裂解條件，不能破壞細胞內(nèi)存在的所有蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)相互作用，多采用非離子變性劑（NP40或TritonX-100)。每種細胞的裂解條件是不一樣的，通過經(jīng)驗確定。不能用高濃度的變性劑（0.2%SDS)，細胞裂解液中要加各種酶抑制劑，如商品化的cocktailer。（2）使用明確的抗體，可以將幾種抗體共同使用。（3）使用對照抗體：免疫磁珠的好處有很多。黑龍江anti-HA COIP免疫磁珠市場報價
上海免疫磁珠批發(fā)推薦上海普平生物科技有限公司。江蘇anti-HA 免疫共沉淀免疫磁珠市場報價
骨髓間充質(zhì)干細胞在一定條件下可分化成為多種結(jié)締組織細胞,也可分化成神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細胞.目的:觀察采用免疫磁珠法分離成人骨髓來源神經(jīng)干細胞的生物學特征.設計,時間及地點:以患者自身骨髓組織為觀察對象的實驗,于2003-03/2007-06在菏澤市立醫(yī)院檢驗科完成.材料:骨髓組織來自菏澤市立醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院的中風,老年性癡呆,帕金森病,腦缺血等神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者.方法:利用免疫磁珠表面的特異性抗體與骨髓組織中神經(jīng)干細胞抗原相結(jié)合,在磁場作用下使結(jié)合磁珠與其他細胞分離,從而獲得神經(jīng)干細胞,再將所分離的純化神經(jīng)干細胞接種到含體積分數(shù)為0.20胎牛血清的EaglesMEM培養(yǎng)液,再在培養(yǎng)基中加入堿性成纖維因子和表皮生長因子進行原代培養(yǎng).主要觀察指標:采用免疫組織化學染色與免疫熒光染色鑒定細胞,并采用流式細胞術測定細胞DNA含量.結(jié)果:在相差顯微鏡下觀察培養(yǎng)的神經(jīng)干細胞,細胞形態(tài)豐滿,胞核及核仁清晰可見,神經(jīng)突起粗大,網(wǎng)絡稠密.免疫組織化學和免疫熒光染色顯示,細胞神經(jīng)元特異性烯醇化酶,神經(jīng)蛋白,膠質(zhì)纖維酸性蛋白酶,微管相關蛋白為陽性.傳代后的細胞用流式細胞術測定DNA含量為正常二倍體,無誘發(fā)突變.江蘇anti-HA 免疫共沉淀免疫磁珠市場報價
上海普平生物科技有限公司致力于化工，以科技創(chuàng)新實現(xiàn)***管理的追求。普平生物深耕行業(yè)多年，始終以客戶的需求為向?qū)?，為客戶提?**的科研試劑、耗材、儀器，納米脂質(zhì)體，細胞、分子、蛋白實驗，科研項目。普平生物致力于把技術上的創(chuàng)新展現(xiàn)成對用戶產(chǎn)品上的貼心，為用戶帶來良好體驗。普平生物始終關注自身，在風云變化的時代，對自身的建設毫不懈怠，高度的專注與執(zhí)著使普平生物在行業(yè)的從容而自信。