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來源: 發(fā)布時間:2022-03-08

磁珠分離細胞STRO-1+的DPSC、EMSC中HNK-1、Nestin的表達,進一步了解DPSC的表型特點及與EMSC的相關性,為今后研究提供較為純化的細胞來源。方法采用間接免疫磁珠分離法獲得DPSC、EMSC,間接免疫熒光雙標法檢測抗原HNK-1、Nestin的表達。結果磁珠分離前后進行細胞計數,大約有5%的DPSC為STRO-1+的細胞,大約有1%的EMSC為STRO-1+的細胞;STRO-1+的DPSC免疫熒光檢測同時表達HNK-1(++)、Nestin(+),STRO-1+的EMSC免疫熒光檢測顯示也同時表達HNK-1(++)、Nestin(++)。結論免疫磁珠分離法獲得STRO-1+陽性的DPSC共表達EMSC的標記HNK-1和Nestin,進一步說明二者作為間充質來源的干細胞,細胞表型具有繼承性。用免疫磁珠法檢測抗白念珠*烯醇化酶抗體。江蘇anti-Flag COIP免疫磁珠銷售

戊二醛兩步交聯法將辣根過氧化物酶(HRP)結合于甲胎蛋白 (AFP)抗體上制成酶標AFP抗體,質量鑒定結果表明其比活性為200 U/mg,抗體效價為1: 256,滿足酶聯免疫吸附測定法(ELISA)要求;通過滴定法確定酶標AFP抗體的**適工作稀釋度為V(酶標抗體): V(磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液)=1: 160;血清用量及孵育時間的影響實驗表明:血清100 μL,孵育時間2 h為比較好測定條件.建立了肝*患者血清AFP免疫磁珠ELISA法的規(guī)范化檢測程序.初步應用實驗顯示:免疫磁珠ELISA法測定受試健康組血清AFP值 平均為3.9 ng/mL,肝*組血清AFP值平均為316.7 ng/mL,對肝*診斷陽性率為72.0%.批內及批間CV值分別為5.05%和8.20%.該項技術有較高的靈敏度和很好的特異性,操作簡便,分離快 速,適用于肝*的初期快速診斷.浙江anti-Flag COIP免疫磁珠代理價格4折起利用人免疫球蛋白構建免疫磁珠富集金葡菌條件優(yōu)化。

一種免疫磁珠及制作方法和用于檢測的方法及測試板,所述的免疫磁珠至少由磁性載體微球組成,該磁性載體微球結合有至少一種免疫配基;所述的磁性載體微球由磁性納米粒和高分子骨架材料組成,其**為金屬小顆粒,**外為高分子材料,**外層為帶有各種可以結合不同免疫配基功能基因的功能層;免疫磁珠的制作方法包括:磁珠預處理;活化磁珠;偶聯抗體的制作;對偶聯抗體用封閉液封閉;免疫磁珠純化等;用于檢測的方法是:利用免疫學反應夾心法,競爭法以及間接法檢測不同物質的存在,并在測試板上設置對照體系:測試板由包被試紙條,偶聯墊,樣品墊,吸水墊,覆蓋膜以及測試板外卡組成,它具有靈敏度高,定量準確,不受光學因素干擾,磁信號穩(wěn)定,不易衰減,試劑簡單,穩(wěn)定,低廉,檢測快速,適合現場檢測等特點.

利用免疫磁珠法分選并鑒定人前列腺*類干細胞.方法利用免疫磁珠法從人前列腺*細胞株PC3中分選CD133+/CD44+細胞,通過免疫組化,流式細胞術,CCK8,平板克隆形成實驗及裸鼠成瘤實驗鑒定其表面標志物表達情況及**干細胞特性.結果經免疫磁珠法分選所得CD133+/CD44+細胞比例為0.50%;免疫組化及流式顯示其CD44/CD133/整合素α2β1均高表達;其細胞增殖和克隆形成率高于PC3細胞;以低密度注射時,其裸鼠體內成瘤率明顯高于PC3細胞.結論利用免疫磁珠法可從人前列腺*細胞株PC3中高效的分選出具有**干細胞生物學特性的前列腺*類干細胞.外周血微轉移前列腺Cancer細胞的免疫磁珠法檢測。

免疫共沉淀(COIP)優(yōu)點

(1)相互作用的蛋白質都是經翻譯后修飾的,處于天然狀態(tài);

(2)蛋白的相互作用是在自然狀態(tài)下進行的,可以避免人為的影響;

(3)可以分離得到天然狀態(tài)的相互作用蛋白復合物。

免疫共沉淀(COIP)缺點

(1)可能檢測不到低親和力和瞬間的蛋白質-蛋白質相互作用;

(2)兩種蛋白質的結合可能不是直接結合,而可能有第三者在中間起橋梁作用;

(3)必須在實驗前預測目的蛋白是什么,以選擇***檢測的抗體,所以,若預測不正確,實驗就得不到結果,方法本身具有冒險性。

(4)靈敏度沒有親和色譜高。 BEENbio Anti HA Co-IP&CHIP磁珠 Cell Nature Science。陜西anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠市場報價

免疫磁珠法分離成人骨髓來源神經干細胞的生物學特征。江蘇anti-Flag COIP免疫磁珠銷售

COIP常見問題及對策

1:如何提高抗體與磁珠結合效率?

磁珠與抗體的結合效率與抗體的種屬來源及所屬亞型有關,請確 認抗體的類型與 Protein A/G 配基的親和效率。如抗體所屬亞型與 Protein A/G的親和度較低,可以通過增加抗體與磁珠的孵育時間( 30~120min)、提高結合緩沖液的pH值(8~9)及降低離子強度( 25~100mM NaCl)等方法提高親和效率。

2:如何提高磁珠在免疫沉淀反應中的特異性?

可以先將抗體與樣品進行孵育,形成抗體-抗原復合物,再用 Protein A/G磁珠捕獲復合物。這種方法可以提高抗體與抗原的結合效 率,并降低磁珠與樣品接觸的時間,從而提高沉淀產物的特異性。對 于蛋白質/核酸共沉淀或染色質免疫共沉淀也推薦使用此法。 江蘇anti-Flag COIP免疫磁珠銷售

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