動物不同,分離出的血清也會有所不同。物種來源相同的血清,根據(jù)采集血時間、血源品質也會分出不同的類別。有些時候,根據(jù)實驗需求,還要對血清進行一些特殊的加工,因此,市面上的血清種類就變得五花八門了。牛來源的血清,可以細分為很多種:根據(jù)采集血時間分??合格的血清產(chǎn)品,需要嚴格控制采集血時間點,才能保證比較基本的血清質量。以胎牛血清為例:一旦牛胎齡過長,會導致補體系統(tǒng)逐漸發(fā)育完全,進而使制備的血清中含有補體,影響血清品質。另外,胎牛中各類生長因子也會隨著生長發(fā)育而逐漸喪失,進一步使血清品質下降。實驗不是千篇一律的,根據(jù)不同的需求,有時候需要對血清進行一些“定制化處理”。細胞培養(yǎng)時,要保證細胞可以順利生長和增殖,需添加10%~20%的血清,動物血清還可起到酸堿度緩沖液的作用。福建雞血清培養(yǎng)基
血清的種類與類型根據(jù)培養(yǎng)的細胞類型不同,我們要選擇合適的血清類型。常見的血清類型如:特級胎牛血清、胚胎干細胞特用胎牛血清、間充質干細胞特用胎牛血清等,還有新西蘭、澳洲來源的胎牛血清。此外,還有一些特殊加工工藝的血清如:四環(huán)素調控系統(tǒng)胎牛血清、低IgG胎牛血清、去外泌體胎牛血清、透析胎牛血清、碳吸附胎牛血清、去脂胎牛血清等。血清的解凍條件建議血清的解凍比較好方式為:-20℃冰柜到4℃冰箱融化,充分過夜解凍。不推薦-20℃冰柜到37℃水浴融化,會因溫度改變較大,導致蛋白析出,產(chǎn)生大量沉淀。解凍時,可將血清無菌分裝至50ml離心管中。無錫胎牛血清品牌物種來源相同的血清,根據(jù)采集血時間、血源品質也會分出不同的類別。
牛血清是細胞培養(yǎng)中用量的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細胞生長必需的營養(yǎng)成分,常用于動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。1.提供對維持細胞指數(shù)生長的,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他等,能結合或調變它們所結合的物質活力。3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到祛毒作用。4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。血清,在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用:1.血清提供:營養(yǎng)和能量來源;生長和粘附因子;肽和類固醇;載體蛋白。2.保護細胞:免受蛋白酶、毒性物質、PH值波動、機械剪切力、氧化及自由基的損傷。
用于免疫的動物作免疫用的動物有哺乳類和禽類,主要為羊、馬、家兔、猴、豬、豚鼠、雞等,實驗室常用者為家兔、山羊和豚鼠等。動物種類的選擇主要根據(jù)抗原的生物學特性和所要獲得抗血清數(shù)量,如一般制備抗r-免疫球蛋白抗血清,多用家兔和山羊,因動物反應良好,而且能夠提供足夠數(shù)量的血清,用于免疫的動物應適齡,健壯,無感染性疾患,比較好為///雄性,此外還需十分注意動物的飼養(yǎng),以消除動物的個體差異以及在免疫過程中死亡的影響。若用兔,最好用純種新西蘭兔,一組三只,兔的體重以2~3kg為宜。二、免疫途徑免疫途徑有多種多樣,如靜脈內、腹腔內、肌肉內、皮內、皮下、淋巴結內注射等,一般常用皮下或背部多點皮內注射,每點注射0.1ml左右。途徑的選擇決定于抗原的生物學特性和理化特性,如、酶、等生物學活性抗原,一般不宜采用靜脈注射。您只需把標本寄過來,我們?yōu)槟?jié)省時間,幫您出結果,原始數(shù)據(jù),分析數(shù)據(jù)均可提供。
鑒別方法,血清血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應被煥液迅速凝固,形成膠凍。凝血塊收縮,其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,也可于凝血液成分(加入抗凝劑)血后經(jīng)離心取得。在凝血過程中,纖維蛋白原轉變成纖維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,這一點是與血漿比較大的區(qū)別。而在凝血反應中,血小板釋放出許多物質,各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應的物質則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學成分的分析,都以血清為樣品。血漿血漿是血液的液體成分,血細胞懸濁于其中。人體含有2750-3300毫升血漿,約占血液總體積的55%。血漿的絕大部分是水(體積的90%),其中溶解的物質主要是血漿蛋白,還包括葡萄糖、無機鹽離子、以及二氧化碳。血漿的主要功能是運載血細胞,同時也是運輸分泌產(chǎn)物的主要媒介。將新鮮血液離心,使血細胞沉降,上層淡黃色清液即是血漿。血漿與血清的區(qū)別是血清中不含纖維蛋白原等凝血因子。有些時候,根據(jù)實驗需求,還要對血清進行一些特殊的加工。福建雞血清培養(yǎng)基
給培養(yǎng)液供應出色的緩沖系統(tǒng)。福建雞血清培養(yǎng)基
配制方法:按比例將羊毛脂與石蠟油置容器內,用超聲波使之混勻,高壓滅菌,置4°C下保存?zhèn)溆?。免疫前取等容積完全或不完全佐劑與免疫原溶液混合,用振蕩器混勻成乳狀,也可以在免疫前取需要量佐劑置乳缽中研磨,均勻后再邊磨邊滴加入等容積抗原液其中加卡介苗3~4mg/ml或不加加完后再繼續(xù)研磨成乳劑,潤十水水上10min內完全不擴散為止。為避免損失抗原,亦可用一注射器裝抗原液,另一注射器裝佐劑,二者以聚乙烯塑料管連接,然后二者來回反復抽吸,約數(shù)十分鐘后即能完全乳化。檢查合格后即以其中一注射器作注射用。免疫方法抗原劑量,頭次劑量為300~500ug,加強免疫的劑量約為頭次劑量為1/4左右。每2~3周加強免疫一次。加強免疫時用不完全佐劑,頭次免疫時皮下注射百日咳疫苗0.5ml,加強免疫時不必注射百日咳疫苗。在第2次加強免疫后2周,從耳緣靜脈取2~3ml血,制備血清,檢測抗體效價。如未達到預期效價,需再進行加強免疫,直到滿意時為止。當抗體效價達到預期水平時,即可放血制備抗血清。福建雞血清培養(yǎng)基
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