顯微鏡的觀察方式,你知道幾種?明場(chǎng)成像是常見(jiàn)的顯微鏡觀察方式,也是觀察生物樣品和材料樣品常用的觀察方式。觀察不透明的材料樣品,反射光明場(chǎng)是使用較多的觀察方式。光源直接照射到樣品表面,表面的結(jié)構(gòu)對(duì)照射光有不同程度的反射和吸收,圖像的亮暗就反映樣品表面的粗糙度和吸光情況。暗場(chǎng)成像與明場(chǎng)成像相對(duì)應(yīng),顧名思義,人不會(huì)直接觀察到照明光線,而是光線斜射到標(biāo)本的表面,根據(jù)丁道爾(Tyndall)現(xiàn)象,微粒對(duì)斜射光進(jìn)行反射或衍射,增大了人眼可見(jiàn)性,我們才能夠觀察到極其微小的物體。相差也是一種很常見(jiàn)的觀察方式,用來(lái)進(jìn)行活細(xì)胞成像。由于細(xì)胞在明場(chǎng)下輪廓不清,雖然可以觀察到,但其邊界或內(nèi)部結(jié)構(gòu)無(wú)法分辨清楚。相差利用光程差(相位)這種人眼無(wú)法區(qū)分的技巧,光通過(guò)不同厚度標(biāo)本時(shí)的光程差轉(zhuǎn)變?yōu)槿搜劭梢杂^察到的明暗變化,從而對(duì)標(biāo)本的結(jié)構(gòu)有了區(qū)分。體視顯微鏡和金像顯微鏡。江蘇顯微鏡升級(jí)
共聚焦主要的觀察對(duì)象是熒光。通俗來(lái)講,是指用波長(zhǎng)短的光照射某物質(zhì),該物質(zhì)被照射時(shí),由于光激發(fā)原理,能發(fā)射出比照射光波長(zhǎng)較長(zhǎng)的光,后者即為熒光。我們觀察的熒光物質(zhì)主要為熒光蛋白或熒光染料,可能樣本本身也會(huì)有一些自發(fā)熒光。具體到共聚焦顯微鏡上,就是用不同的激光器去激發(fā)樣本中的熒光染料,使之發(fā)射不同的熒光,就可以得到多色熒光圖像了。不管是熒光染料還是熒光蛋白,或是其它熒光材料,都有其熒光特性,主要指激發(fā)光(Ex)-Excitation與發(fā)射光(Em)-Emission。我們常說(shuō)的488,543,633就是指相關(guān)熒光材料的激發(fā)光,但要注意,無(wú)論激發(fā)光還是發(fā)射光,都不是一個(gè)數(shù)值,而是一段波譜,只是為了日常使用方便才使用488nm這樣的波譜峰值(Ex-Max)。非標(biāo)顯微鏡升級(jí)顯微鏡使用注意事項(xiàng);
透射電子顯微鏡、掃描電子顯微鏡、掃描隧道顯微鏡和原子力顯微鏡是各個(gè)高科技領(lǐng)域經(jīng)常運(yùn)用的四種顯微鏡。英文名分別是Transmission Electron Microscope(TEM),Scanning Electron Mcroscope(SEM)、Scanning Tunneling Microscope(STM)和Atomic Force Microscope(AFM)。從名字中很容易知道四個(gè)顯微鏡的特點(diǎn),其中TEM和SEM用的是電子來(lái)替代光,從而確定觀測(cè)樣品結(jié)構(gòu),而STM和AFM其實(shí)用的都是探針。所以可以認(rèn)為亞顯微級(jí)顯微鏡(這個(gè)名字主要是區(qū)別開(kāi)光學(xué)顯微鏡,用來(lái)說(shuō)明其分辨率遠(yuǎn)高于用可見(jiàn)光觀測(cè))可以分為兩大類,即電子顯微鏡類別和探針顯微鏡類別。
掃描探針顯微鏡控制器通過(guò)掃描器在豎直舛由方向移動(dòng)樣品以使探針和樣品之間的距離(或相互作用的物理量)穩(wěn)定在某一固定值;同時(shí)在x-y水平平面移動(dòng)樣品,使探針按照掃描路徑掃描樣品表面。掃描探針顯微鏡在穩(wěn)定探針與樣品間距的情況下,檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)探針與樣品之間相互作用的相關(guān)物理量信號(hào);在穩(wěn)定相互作用物理量的情況下,則通過(guò)豎直方向礴由位移傳感器檢測(cè)探針與樣品之問(wèn)距離。圖像系統(tǒng)則根據(jù)檢測(cè)信號(hào)(或探針與樣品間距)對(duì)樣品表面進(jìn)行成像等圖像處理。激光共聚焦顯微鏡的明顯優(yōu)勢(shì)。
體視顯微鏡又可稱為立體顯微鏡或解剖顯微鏡,是一種具有正象立體感顯微鏡。常常用于切片操作和顯微外科手術(shù)等生物、醫(yī)學(xué)領(lǐng)域和微小零件和集成電路的觀測(cè)、裝配、檢查等工業(yè)檢測(cè)。金相顯微鏡主要是用來(lái)鑒定和分析金屬內(nèi)部結(jié)構(gòu)組織,是金屬學(xué)研究金相的重要儀器,是工業(yè)部門(mén)鑒定產(chǎn)品質(zhì)量的關(guān)鍵設(shè)備,專門(mén)用于觀察金屬和礦物等不透明物體金相組織的顯微鏡。性能優(yōu)越的光學(xué)系統(tǒng),實(shí)現(xiàn)了大視野高分辨率成像;消色差設(shè)計(jì)有效實(shí)現(xiàn)色差校正。激光掃描共聚焦顯微鏡的掃描成像技術(shù)。視頻顯微鏡配件
STM和AFM的原理其實(shí)就是利用探針與樣品間的距離進(jìn)行測(cè)繪;江蘇顯微鏡升級(jí)
顯微鏡透射照明的方式有兩種:(1)臨界照明這種照明要求聚光鏡所成的光源像與被觀察物體的物平面重合,如圖1所示,相當(dāng)于物面上放置一個(gè)光源,燈絲的形狀同時(shí)出現(xiàn)在像面上,而造成不理想的觀察效果。臨界照明透射照明中,為使物鏡的孔徑角得以充分利用,聚光鏡應(yīng)有與物鏡相同或稍大的數(shù)值孔徑。臨界照明聚光鏡的孔徑光闌常設(shè)在聚光鏡的物方焦平面上,如果顯微鏡用的是遠(yuǎn)心物鏡,聚光鏡的出射光瞳與物鏡的入射光瞳重合。聚光鏡的光闌做成可變光闌,可任意改變射入聚光鏡的孔徑角,使之與物鏡的數(shù)值孔徑匹配。由于臨界照明聚光鏡的出射光瞳和像方視場(chǎng)分別與物鏡的入射光瞳和物方視場(chǎng)重合,所以形成“瞳對(duì)瞳,視場(chǎng)對(duì)視場(chǎng)”的光管。臨界照明的缺點(diǎn)在于當(dāng)光源亮度不均勻或者呈現(xiàn)明顯的燈絲結(jié)構(gòu)時(shí),將會(huì)反映在物面上,使物面照度不均勻,從而影響觀察效果。為了達(dá)到比較均勻的照明,這種照明方式對(duì)發(fā)光體本身的均勻性要求較高,同時(shí)要求被照明物體表面和光源像之間有足夠的離焦量。后續(xù)物鏡的孔徑角應(yīng)該取大一些,如果物鏡的孔徑角過(guò)小,焦深會(huì)很大,容易反映出發(fā)光體本身的不均勻性。 江蘇顯微鏡升級(jí)
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