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熒光壽命成像怎么用

來源: 發(fā)布時間:2023-02-06

熒光壽命成像中的熒光壽命是什么意思?有什么用?假定兩種衰減躍遷速率分別為Γ和knr,則激發(fā)態(tài)衰減速率可表示為:其中n(t)表示時間t時激發(fā)態(tài)分子的數(shù)目,由此可得到激發(fā)態(tài)物種的單指數(shù)衰減方程。熒光壽命定義為衰減總速率的倒數(shù):熒光強度正比于衰減的激發(fā)態(tài)分子數(shù),因此可將上式改寫為:其中I0是時間為零時的熒光強度,τ為熒光壽命。也就是說熒光強度衰減到初始強度的1/e時所需要的時間就是該熒光物種在測定條件下的熒光壽命。事實上當熒光物質(zhì)被激發(fā)后有些激發(fā)態(tài)分子立即返回基態(tài),有的甚至可以延遲到5倍于熒光壽命時才返回基態(tài),這樣就形成了實驗測定的熒光強度衰減曲線。由于熒光壽命成像不受樣品濃度影響具有其他熒光成像技術無法代替的優(yōu)異性能。熒光壽命成像具高靈敏度、可檢測人體生物樣品等優(yōu)點。熒光壽命成像怎么用

熒光壽命成像的應用領域有哪些?生命科學領域:細胞體自身熒光壽命分析;自身熒光相對熒光標記的有效區(qū)分;活細胞內(nèi)水介質(zhì)的PH 值測量;局部氧氣濃度測量;具有相同頻譜性質(zhì)的不同熒光標記的區(qū)分;活細胞內(nèi)鈣濃度測量;時間分辨共振能量轉移(FRET):納米級尺度上的遠差測量,環(huán)境敏感的FRET 探針定量測量;代謝成像:NAD(P)H 和FAD 胞質(zhì)體的熒光壽命成像。材料科學領域:寬禁帶半導體等體系的少子壽命mapping 測量;量子點等用作熒光壽命成像顯微鏡探針;鈣鈦礦電池/LED 薄膜的組分分析、缺陷檢測;銅銦鎵硒CIGS,銅鋅錫硫CZTS 薄膜太陽能電池的組分、缺陷檢測;鑭系上轉換納米顆粒;GaAs 或GaAsP 量子阱的載流子擴散研究。熒光壽命成像怎么用熒光壽命成像有潛力應用于瘤識別,病變診斷等領域。

熒光壽命成像分析是什么?熒光壽命是用于幾種生物測定的穩(wěn)健參數(shù)。它有可能替代傳統(tǒng)的測量技術,如吸收法、冷光法或熒光強度法。熒光團物理化學環(huán)境的任何變化都會導致熒光壽命的改變??赏ㄟ^各種機制來研發(fā)基于壽命的分析,例如簡單的結合測定,涉及到兩個組分的結合(一個被熒光標記)而引起FLT的變化。另一種機制是猝滅釋放型測定,涉及大量過量存在的猝滅物質(zhì),其具有低而有限的熒光。一旦熒光化合物被釋放(通過酶促反應或與互補DNA結合),系統(tǒng)的壽命就會改變。FLT可與FRET(熒光共振能量轉移)分析結合用于能量轉移效率測量。

熒光壽命顯微成像技術(FLIM)具有對生物大分子結構、動力學信息和分子環(huán)境等進行高分辨高精度測量的能力,因此其重要性日漸提升,被普遍地應用于生物學研究及臨床診斷等領域。熒光壽命成像的發(fā)展很好地彌補了基于強度成像的問題,對生物醫(yī)學檢測有著重要的意義。熒光的特性包含有:熒光激發(fā)和發(fā)射光譜、熒光強度、量子效率、熒光壽命等,其中,熒光壽命是指熒光分子在激發(fā)態(tài)上存在的平均時間(納秒量級)。分子的熒光壽命在幾納秒至幾百納秒之間,因此,測量熒光壽命需要極快響應時間的探測器。熒光壽命檢測經(jīng)典方法為點對點的時間相關單光子計數(shù)(TCSPC)。

熒光成像技術是一種非侵入性成像方法,熒光成像技術可以實時和多維度地清晰地監(jiān)測生物分子、細胞、組織和生物生物。具有高靈敏度輸出、高時間分辨率、非侵入性和低成本。熒光成像在疾病診斷,藥物分布和代謝評估以及血管生物成像中得到了普遍的應用。其中一些前瞻性方法在診斷和影像學引導療治為未來醫(yī)學發(fā)展提供更廣闊的道路。除了手術中的成像引導,熒光成像技術還可以用于手術中神經(jīng)保護,外科手術過程中神經(jīng)意外橫斷或損傷,導致患者部分活動功能衰退甚至長久喪失。熒光壽命成像圖像中每一個像素點在phasor圖上都有一個對應的點。上海單分子熒光壽命成像哪家好

熒光壽命成像技術是如何應用在生物醫(yī)學中的?熒光壽命成像怎么用

熒光壽命成像是熒光基團在通過發(fā)射熒光光子返回基態(tài)之前在其激發(fā)態(tài)下保持平均多長時間的量度。不同熒光基團激發(fā)態(tài)停時間不同,大多數(shù)生物熒光素的熒光壽命時間在 0.2 - 20 ns。熒光壽命檢測經(jīng)典方法為點對點的時間相關單光子計數(shù)(TCSPC),但由于過去檢測硬件的局限和復雜的使用而沒有被普遍地應用于科學研究。隨著技術的發(fā)展,在顯微鏡視野內(nèi)進行超快速全像素熒光壽命信號采集的熒光壽命成像成為可能。熒光壽命成像具有不同于熒光強度成像的眾多優(yōu)點:不受染料濃度的影響,無論染色或免疫熒光的效率高或低,熒光壽命都能呈現(xiàn)一致的數(shù)據(jù),這意味著更少的實驗數(shù)量和重復性更好的實驗結果。不受光漂白的影響,熒光發(fā)射時間不受激發(fā)光強度的影響,因此不存在光漂白問題。不受樣本厚度和光源噪聲的影響。熒光壽命成像怎么用

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