熒光壽命成像中的熒光壽命及其含義：假定一個無限窄的脈沖光(δ函數(shù))激發(fā)n0個熒光分子到其激發(fā)態(tài)，處于激發(fā)態(tài)的分子將通過輻射或非輻射躍遷返回基態(tài)。假定兩種衰減躍遷速率分別為Γ和knr，則激發(fā)態(tài)衰減速率可表示為：其中n(t)表示時間t時激發(fā)態(tài)分子的數(shù)目，由此可得到激發(fā)態(tài)物種的單指數(shù)衰減方程。熒光壽命定義為衰減總速率的倒數(shù)：熒光強度正比于衰減的激發(fā)態(tài)分子數(shù)，因此可將上式改寫為：其中I0是時間為零時的熒光強度，τ為熒光壽命。也就是說熒光強度衰減到初始強度的1/e時所需要的時間就是該熒光物種在測定條件下的熒光壽命。實際上用熒光強度的對數(shù)對時間作圖，直線斜率即為熒光壽命倒數(shù)的負值。熒光壽命也可以理解為熒光物種在激發(fā)態(tài)的統(tǒng)計平均停留時間。事實上當(dāng)熒光物質(zhì)被激發(fā)后有些激發(fā)態(tài)分子立即返回基態(tài)，有的甚至可以延遲到5倍于熒光壽命時才返回基態(tài)，這樣就形成了實驗測定的熒光強度衰減曲線。熒光壽命成像不受光漂白的影響。廣東分子熒光壽命成像訂購

熒光壽命成像FLIM相比于熒光強度成像更有優(yōu)勢。通過熒光強度成像可以獲得熒光分子的空間分布，較為直接和簡便，但是當(dāng)熒光分子具有相似的頻譜特性，或是同樣的熒光分子在不同環(huán)境下時，依賴強度進行成像的方案便無法準(zhǔn)確反映信息。與基于光強的成像方式不同，熒光壽命成像FLIM適用于測量熒光分子環(huán)境的變化，或是測量分子的運動情況。其結(jié)果與熒光分子濃度無關(guān)，且不受影響光強的光散射或是光吸收影響，可以精確測量熒光淬滅過程，對生物分子微環(huán)境進行定量測量。佛山單分子熒光壽命成像哪個品牌好熒光壽命成像主要應(yīng)用領(lǐng)域包括：用于樣品分離。

熒光壽命成像技術(shù)及其在生物醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用：熒光分子的壽命就像熒光分子的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜一樣是熒光分子的固有特性，隨著近年來對蛋白及分子功能研究的不斷深入，科研工作者除對多色成像、鈣成像等功能成像的需求日漸增多之外，對熒光壽命成像的需求也逐漸增加，而熒光壽命成像能提供除熒光強度、熒光光譜信息之外的熒光分子的壽命信息，可用于分子間相互作用（FRET）、分子所處微環(huán)境的離子濃度（如Ca2+、pH）及細胞代謝水平的改變等測量，并可拆分光譜重疊的熒光染料及染料和自發(fā)熒光，還可以結(jié)合熒光相關(guān)光譜對單分子實現(xiàn)熒光壽命相關(guān)光譜FLCS的測量。熒光壽命成像擴展了傳統(tǒng)熒光成像的維度，是功能成像的理想工具，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有廣闊的應(yīng)用前景。

與熒光光譜一樣，熒光壽命也是熒光物質(zhì)的一種內(nèi)在特有性質(zhì)，不受熒光物質(zhì)濃度、激發(fā)光強度等因素的影響。熒光壽命成像能在不受熒光強度影響因素影響的條件下，在納米分辨率水平對蛋白互作進行研究，或者通過 FRET 探針研究分子環(huán)境變化，更重要的是其測量數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性高、易重復(fù)。通過熒光壽命成像還可以對樣本所處的微環(huán)境進行檢測、對樣品組份進行分離等等。在傳統(tǒng)的熒光強度和熒光光譜兩個維度的基礎(chǔ)上，又增加了熒光壽命這一新的成像維度，大幅度拓展了該系統(tǒng)的應(yīng)用范圍。熒光壽命成像（FLIM）對細胞信號傳導(dǎo)及調(diào)控，蛋白間的相互作用等生物研究發(fā)揮著很大作用。

在基于時間相關(guān)單光子計數(shù)的熒光壽命成像實驗中，通過選用超快激光器可以優(yōu)化脈沖持續(xù)時間，單光子探測器和時間數(shù)字轉(zhuǎn)換器的時間抖動則成為制約時間分辨率的關(guān)鍵參數(shù)。熒光壽命成像可進行高質(zhì)量的多色成像實驗或?qū)崿F(xiàn)STED、PALM/STORM等超分辨率熒光顯微成像。目前TCSPC是主要應(yīng)用的熒光壽命測定技術(shù)。熒光壽命通常在ps～us量級，在如此短的時間量級上進行測量，它是較為成熟準(zhǔn)確的測試手段。TCSPC的工作原理是使用一個同步信號源驅(qū)動激光器，出射光脈沖照射樣品池，在利用光子探測裝置（多為PMT）對熒光信號進行探測，每一個光子計數(shù)信號在FT1010中都會落入一個對應(yīng)的時間窗口，經(jīng)過一定時間的統(tǒng)計疊加后即得到熒光壽命曲線。幾十萬次重復(fù)以后，不同的時間通道累積下來的光子數(shù)目不同。熒光壽命成像在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有廣闊的應(yīng)用前景。重慶熒光壽命成像哪個品牌好

熒光壽命成像這種技術(shù)相對較新，涉及到同時在圖像的每個像素處確定熒光衰減時間的空間分布。廣東分子熒光壽命成像訂購

熒光壽命成像可以應(yīng)用到個性化化療：要針對患者所患的特殊病癥，找到較有效的抗病藥物至關(guān)重要。但是，病細胞對不同類型藥物的反應(yīng)并不是完全可預(yù)測的。因此，進行活檢，將細胞培養(yǎng)并用不同的藥物處理。同時，它們被FLIM重復(fù)成像。熒光壽命表明治理后細胞代謝狀態(tài)的早期改變。因此，通過這些測量，只需幾天即可確定較有效的藥物。熒光壽命成像將時域多指數(shù)衰減分析與相量圖相結(jié)合。時域中熒光衰減的測量需要短的激發(fā)脈沖和快速的檢測電路。樣品中的每個點都被依次激勵。使用時域方法，壽命是從對衰減數(shù)據(jù)的指數(shù)擬合得出的。廣東分子熒光壽命成像訂購

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