熒光壽命成像可以應(yīng)用到個(gè)性化化療：要針對(duì)患者所患的特殊病癥，找到較有效的抗病藥物至關(guān)重要。但是，病細(xì)胞對(duì)不同類型藥物的反應(yīng)并不是完全可預(yù)測的。因此，進(jìn)行活檢，將細(xì)胞培養(yǎng)并用不同的藥物處理。同時(shí)，它們被FLIM重復(fù)成像。熒光壽命表明治理后細(xì)胞代謝狀態(tài)的早期改變。因此，通過這些測量，只需幾天即可確定較有效的藥物。熒光壽命成像將時(shí)域多指數(shù)衰減分析與相量圖相結(jié)合。時(shí)域中熒光衰減的測量需要短的激發(fā)脈沖和快速的檢測電路。樣品中的每個(gè)點(diǎn)都被依次激勵(lì)。使用時(shí)域方法，壽命是從對(duì)衰減數(shù)據(jù)的指數(shù)擬合得出的。熒光壽命成像具有200 nm的空間分辨率和皮秒量級(jí)的時(shí)間分辨率。深圳熒光壽命成像哪里買

熒光壽命是熒光基團(tuán)在通過發(fā)射熒光光子返回基態(tài)之前在其激發(fā)態(tài)下保持平均多長時(shí)間的量度。不同熒光基團(tuán)激發(fā)態(tài)停時(shí)間不同，大多數(shù)生物熒光素的熒光壽命時(shí)間在 0.2 - 20 ns。熒光壽命檢測經(jīng)典方法為點(diǎn)對(duì)點(diǎn)的時(shí)間相關(guān)單光子計(jì)數(shù)（TCSPC），但由于過去檢測硬件的局限和復(fù)雜的使用而沒有被普遍地應(yīng)用于科學(xué)研究。隨著技術(shù)的發(fā)展，在顯微鏡視野內(nèi)進(jìn)行超快速全像素?zé)晒鈮勖盘?hào)采集的熒光壽命成像成為可能。熒光壽命成像提供了壽命分布的二維圖形視圖。該圖形視圖使任何觀察者都能快速區(qū)分和分離FLIM圖像中的不同壽命種群。相量FLIM分布的解釋很簡單。因?yàn)槊總€(gè)物種都有特定的相量，所以可以在單個(gè)像素內(nèi)解析多個(gè)分子物種。相量圖如何生成？當(dāng)使用時(shí)間分辨單光子計(jì)數(shù)（TCSPC）系統(tǒng)獲取數(shù)據(jù)時(shí)，相量FLIM分布是從傅立葉變換中得出的（Digman等，2008）。圖像中的每個(gè)像素對(duì)應(yīng)于相量圖中的一個(gè)點(diǎn)。重慶單分子熒光壽命成像怎么操作熒光壽命成像不需要考慮跳色的影響，從而免去了計(jì)算和去除跳色雜質(zhì)信號(hào)的麻煩；

熒光壽命成像在生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷應(yīng)用中的許多場合都對(duì)多光譜分辨提出特殊要求，如在FRET測量中，要求能同時(shí)測量供體和受體的熒光強(qiáng)度隨時(shí)間的衰減，多光譜分辨的熒光壽命成像提供了一種新的定量研究手段．目前，基于門控像增強(qiáng)器的多光譜寬場FLIM 技術(shù)一次只能獲得至多兩個(gè)譜段的熒光壽命圖像，而基于TCSPC的多光譜分辨FLIM的成像速度又很低，這些都限制了其應(yīng)用范圍．目前的一個(gè)研究方向是，發(fā)展光譜分辨率高、成像速度快、價(jià)格低廉的多光譜分辨熒光壽命成像顯微技術(shù)。

熒光壽命成像中的熒光壽命及其含義：假定一個(gè)無限窄的脈沖光(δ函數(shù))激發(fā)n0個(gè)熒光分子到其激發(fā)態(tài)，處于激發(fā)態(tài)的分子將通過輻射或非輻射躍遷返回基態(tài)。假定兩種衰減躍遷速率分別為Γ和knr，則激發(fā)態(tài)衰減速率可表示為：其中n(t)表示時(shí)間t時(shí)激發(fā)態(tài)分子的數(shù)目，由此可得到激發(fā)態(tài)物種的單指數(shù)衰減方程。熒光壽命定義為衰減總速率的倒數(shù)：熒光強(qiáng)度正比于衰減的激發(fā)態(tài)分子數(shù)，因此可將上式改寫為：其中I0是時(shí)間為零時(shí)的熒光強(qiáng)度，τ為熒光壽命。也就是說熒光強(qiáng)度衰減到初始強(qiáng)度的1/e時(shí)所需要的時(shí)間就是該熒光物種在測定條件下的熒光壽命。實(shí)際上用熒光強(qiáng)度的對(duì)數(shù)對(duì)時(shí)間作圖，直線斜率即為熒光壽命倒數(shù)的負(fù)值。熒光壽命也可以理解為熒光物種在激發(fā)態(tài)的統(tǒng)計(jì)平均停留時(shí)間。事實(shí)上當(dāng)熒光物質(zhì)被激發(fā)后有些激發(fā)態(tài)分子立即返回基態(tài)，有的甚至可以延遲到5倍于熒光壽命時(shí)才返回基態(tài)，這樣就形成了實(shí)驗(yàn)測定的熒光強(qiáng)度衰減曲線。熒光壽命成像通常用于研究生物分子間相互作用、細(xì)胞中的信號(hào)事件或區(qū)分光譜重疊的熒光團(tuán)。

熒光壽命成像（FLI）：這種技術(shù)相對(duì)較新，涉及到同時(shí)在圖像的每個(gè)像素處確定熒光衰減時(shí)間的空間分布。它基于熒光團(tuán)的熒光壽命取決于其分子環(huán)境而并非濃度的事實(shí)。它可以用于無法控制局部探針濃度的熒光顯微鏡中。熒光壽命成像(FLIM)可用于測量分子環(huán)境參數(shù)，通過熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)進(jìn)行的蛋白質(zhì)相互作用，并可以通過細(xì)胞和組織的自發(fā)熒光來測量其代謝狀態(tài)。分子環(huán)境參數(shù)可以通過因熒光淬滅或熒光團(tuán)的構(gòu)象變化而引起的壽命變化來測量。FLIM可用于多種生物應(yīng)用，包括組織表面掃描、組織類型繪圖、光動(dòng)力治理、DNA芯片分析、皮膚成像等。熒光壽命成像具有不同于熒光強(qiáng)度成像的眾多優(yōu)點(diǎn)；重慶分子熒光壽命成像好不好

熒光壽命成像可用于多種生物應(yīng)用，包括組織表面掃描、組織類型繪圖、光動(dòng)力治理、皮膚成像等。深圳熒光壽命成像哪里買

顯微熒光壽命成像應(yīng)用：材料科學(xué)領(lǐng)域：寬禁帶半導(dǎo)體等體系的少子壽命mapping 測量；量子點(diǎn)等用作熒光壽命成像顯微鏡探針；鈣鈦礦電池/LED 薄膜的組分分析、缺陷檢測；銅銦鎵硒CIGS，銅鋅錫硫CZTS 薄膜太陽能電池的組分、缺陷檢測；鑭系上轉(zhuǎn)換納米顆粒；GaAs 或GaAsP 量子阱的載流子擴(kuò)散研究；生命科學(xué)領(lǐng)域：細(xì)胞體自身熒光壽命分析；自身熒光相對(duì)熒光標(biāo)記的有效區(qū)分；活細(xì)胞內(nèi)水介質(zhì)的PH 值測量；局部氧氣濃度測量；具有相同頻譜性質(zhì)的不同熒光標(biāo)記的區(qū)分；活細(xì)胞內(nèi)鈣濃度測量；時(shí)間分辨共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）：納米級(jí)尺度上的遠(yuǎn)差測量，環(huán)境敏感的FRET 探針定量測量；代謝成像：NAD(P)H 和FAD 胞質(zhì)體的熒光壽命成像。深圳熒光壽命成像哪里買

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