熒光壽命成像顯微術(shù)(FLIM)是一種利用熒光染料固有特性的成像技術(shù)。除了具有特有的發(fā)射光譜外，每個熒光分子還有特有的壽命，它反映了熒光基團在發(fā)射光子之前處于激發(fā)態(tài)的時間。除了標準的熒光強度測量外，壽命分析還可以提供其他信息。過去，壽命成像一直是一種緩慢、復(fù)雜的專業(yè)化技術(shù)。只有經(jīng)驗豐富的顯微鏡**或物理學(xué)家才會使用這種技術(shù)。熒光壽命成像提供了額外的信息，有助提高共聚焦成像的質(zhì)量。它非常適合用于區(qū)分熒光發(fā)射光譜重疊的熒光探針，或消除不需要的背景熒光信號。熒光壽命成像可用于多種生物應(yīng)用，包括組織表面掃描、組織類型繪圖、光動力治理、皮膚成像等。湖南單分子熒光壽命成像原理

熒光分子受激發(fā)后發(fā)光，熒光壽命量化了發(fā)光的衰減率。該特征時間不但取決于特定的熒光團，還取決于其環(huán)境，分子相互作用影響弛豫過程并改變熒光團的壽命。熒光壽命是微環(huán)境的相對參數(shù)，不受環(huán)境吸收、樣本濃度等因素影響，因此能夠?qū)ι锝M織環(huán)境中的 p H 值水平、離子濃度、氧分子濃度等微環(huán)境狀態(tài)進行高精度檢測。熒光壽命顯微成像（FLIM），可以定位不同的分子及濃度分布，在生物，材料，半導(dǎo)體領(lǐng)域具有重要的應(yīng)用價值。熒光壽命成像原理及應(yīng)用說明：熒光壽命是指分子受到光脈沖激發(fā)后返回基態(tài)之前在激發(fā)平均停留的時間，處于激發(fā)態(tài)的熒光分子在從激發(fā)到基態(tài)的過程中發(fā)射熒光釋放能量。熒光壽命取決于熒光分子所處的微環(huán)境，通過對樣品熒光壽命的測量和成像可以定量獲取樣品的功能信息。湖南單分子熒光壽命成像原理由于熒光壽命成像不受樣品濃度影響，具有其他熒光成像技術(shù)無法代替的優(yōu)異性能。

熒光顯微技術(shù)具有無損、非接觸、高特異性、高靈敏、高體友好以及能夠提供功能信息等突出優(yōu)點，一直是生命科學(xué)，尤其是細胞生物學(xué)研究的重要工具。近年來，隨著生命科學(xué)的發(fā)展，對熒光顯微技術(shù)也提出了越來越高的要求，激光技術(shù)、熒光探針標記技術(shù)、新型熒光探測技術(shù)和成像手段的不斷發(fā)展，極大地促進了熒光顯微技術(shù)的發(fā)展，成為推動生命科學(xué)發(fā)展的重要動力。此外，熒光顯微技術(shù)也在成像的對比機制方面獲得了很大的進展。超分辨(SR)成像技術(shù)的發(fā)展，也為熒光壽命成像(FLIM)的新發(fā)展提供了巨大的機遇。

時域法熒光壽命的測量和熒光壽命成像主要有時間相關(guān)單光子計數(shù)法（time correlated single photon counting, TCSPC）、門控探測法（time-gated detection）、條紋相機測量法（streak-FLIM）、頻閃技術(shù)等四種常見的方法。TCSPC是目前測量熒光壽命的主要技術(shù)，同軸脈沖光源發(fā)出的脈沖光引起起始光電倍增管產(chǎn)生電信號，該信號通過恒分信號甄別器1啟動時幅轉(zhuǎn)換器（time-amplitude converter，TAC），時幅轉(zhuǎn)換器產(chǎn)生一個隨時間線性增長的電壓信號。此外，同軸脈沖光源發(fā)出的脈沖光通過激發(fā)單色器后到達樣品池，樣品產(chǎn)生的熒光信號再經(jīng)過發(fā)射單色器到達終止光電倍增管，由此產(chǎn)生的電信號經(jīng)由恒分信號甄別器2到達時幅轉(zhuǎn)換器并使其停止工作。此時，時幅轉(zhuǎn)換器根據(jù)累積電壓輸出一個數(shù)字信號并在多通道分析儀（multi-channel analyzer）的相應(yīng)時間通道計入一個信號，表明檢測到壽命為該時間的一個光子。經(jīng)過幾十萬次的重復(fù)后，不同的時間通道累積下來的光子數(shù)目不相同。時域和頻域技術(shù)在各種熒光顯微壽命成像平臺中都有應(yīng)用。

熒光壽命成像開始用于組織體的在體成像，與傳統(tǒng)的使用熒光強度和光譜信息作為鑒別組織異常的成像方式相比，壽命成像提供了更多的生化診斷信息。熒光壽命成像已用于骨骼和牙齒的診斷。另外，采用多光子激發(fā)可顯著提高組織體的成像深度，如對人體皮膚自體熒光進行多光子激發(fā)熒光壽命成像,成像深度達200 um，組織體的熒光壽命分布揭示了細胞代謝狀態(tài)的變化，可用于對皮膚病的診斷。對腔體中瘤的早期臨床診斷，已開發(fā)出具有實時及壽命分辨功能的內(nèi)窺鏡,并對離體膀胱樣品進行測試，得到了黃素分子的自體熒光壽命圖像。熒光壽命成像是一種重要的熒光顯微鏡技術(shù)。福建多色熒光壽命成像哪家好

市場上熒光壽命的測量方式可分為時域法和頻域法。湖南單分子熒光壽命成像原理

熒光壽命可以在頻域或者時間域測量。時間域測量方法涉及用短光脈沖照射樣品（比色皿、細胞或組織），然后隨時間測量發(fā)射強度。FLT由衰減曲線的斜率確定。有幾種熒光檢測方法可用于壽命測量，其中時間相關(guān)單光子計數(shù)（TCSPC）可實現(xiàn)簡單的數(shù)據(jù)收集和增強的定量光子計數(shù)。頻域方法涉及高頻率入射光的正弦調(diào)制。在該方法中，發(fā)射發(fā)生在與入射光相同的頻率處，并且隨著激發(fā)光兼有相位延遲和振幅的變化（解調(diào)）。壽命測量不需要波長比率探針來提供眾多分析物的定量測定。壽命法通過使用光譜位移探針擴展了分析物濃度范圍的靈敏度。壽命測量可用于沒有直接探針的分析物。包括葡萄糖、抗原或基于熒光能量轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)導(dǎo)機制的任何親和力或免疫測定。湖南單分子熒光壽命成像原理

上海波銘科學(xué)儀器有限公司專注技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)品研發(fā)，發(fā)展規(guī)模團隊不斷壯大。一批專業(yè)的技術(shù)團隊，是實現(xiàn)企業(yè)戰(zhàn)略目標的基礎(chǔ)，是企業(yè)持續(xù)發(fā)展的動力。公司業(yè)務(wù)范圍主要包括：拉曼光譜儀，電動位移臺，激光器，光電探測器等。公司奉行顧客至上、質(zhì)量為本的經(jīng)營宗旨，深受客戶好評。公司力求給客戶提供全數(shù)良好服務(wù)，我們相信誠實正直、開拓進取地為公司發(fā)展做正確的事情，將為公司和個人帶來共同的利益和進步。經(jīng)過幾年的發(fā)展，已成為拉曼光譜儀，電動位移臺，激光器，光電探測器行業(yè)出名企業(yè)。