熒光壽命成像(FLIM)的方法特別適合于體內(nèi)診斷,因為它們是無創(chuàng)且無損的。因此,它們被普遍用于受試者的臨床研究和醫(yī)學(xué)檢查。例如,該技術(shù)可以用于以下領(lǐng)域:皮膚的體內(nèi)診斷:人類皮膚的多光子擴散層析成像結(jié)合了雙光子激發(fā)和非解掃檢測,因此,多光子FLIM可以提供組織層的光學(xué)切片圖像,深度可達100 μm。人皮膚細胞的體內(nèi)雙光子成像是可能的,而不會損害組織的活力,可以從亞細胞分辨率重建三維結(jié)構(gòu)。眼科檢查:眼科FLIM結(jié)合了快速光束掃描和皮秒二極管激光器激發(fā)的功能。該方法非常靈敏,可以記錄人眼眼底(背景)的壽命圖像。通過這種方式,有可能及早發(fā)現(xiàn)眼部疾病,因為這些疾病通常伴隨著眼底的代謝變化。反過來,這些引起內(nèi)源性熒光團的熒光衰減參數(shù)的變化。熒光壽命成像不受光漂白的影響。上海動物熒光壽命成像哪家便宜
熒光壽命成像可以應(yīng)用到個性化化療:要針對患者所患的特殊病癥,找到較有效的抗病藥物至關(guān)重要。但是,病細胞對不同類型藥物的反應(yīng)并不是完全可預(yù)測的。因此,進行活檢,將細胞培養(yǎng)并用不同的藥物處理。同時,它們被FLIM重復(fù)成像。熒光壽命表明治理后細胞代謝狀態(tài)的早期改變。因此,通過這些測量,只需幾天即可確定較有效的藥物。熒光壽命成像將時域多指數(shù)衰減分析與相量圖相結(jié)合。時域中熒光衰減的測量需要短的激發(fā)脈沖和快速的檢測電路。樣品中的每個點都被依次激勵。使用時域方法,壽命是從對衰減數(shù)據(jù)的指數(shù)擬合得出的。廣州顯微熒光壽命成像供應(yīng)熒光壽命成像具有其它熒光顯微鏡所具有的高靈敏度、可檢測人體生物樣品等優(yōu)點。
顯微熒光壽命成像應(yīng)用:材料科學(xué)領(lǐng)域:寬禁帶半導(dǎo)體等體系的少子壽命mapping 測量;量子點等用作熒光壽命成像顯微鏡探針;鈣鈦礦電池/LED 薄膜的組分分析、缺陷檢測;銅銦鎵硒CIGS,銅鋅錫硫CZTS 薄膜太陽能電池的組分、缺陷檢測;鑭系上轉(zhuǎn)換納米顆粒;GaAs 或GaAsP 量子阱的載流子擴散研究;生命科學(xué)領(lǐng)域:細胞體自身熒光壽命分析;自身熒光相對熒光標記的有效區(qū)分;活細胞內(nèi)水介質(zhì)的PH 值測量;局部氧氣濃度測量;具有相同頻譜性質(zhì)的不同熒光標記的區(qū)分;活細胞內(nèi)鈣濃度測量;時間分辨共振能量轉(zhuǎn)移(FRET):納米級尺度上的遠差測量,環(huán)境敏感的FRET 探針定量測量;代謝成像:NAD(P)H 和FAD 胞質(zhì)體的熒光壽命成像。
熒光壽命成像(FLI):這種技術(shù)相對較新,涉及到同時在圖像的每個像素處確定熒光衰減時間的空間分布。它基于熒光團的熒光壽命取決于其分子環(huán)境而并非濃度的事實。它可以用于無法控制局部探針濃度的熒光顯微鏡中。熒光壽命成像(FLIM)可用于測量分子環(huán)境參數(shù),通過熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)進行的蛋白質(zhì)相互作用,并可以通過細胞和組織的自發(fā)熒光來測量其代謝狀態(tài)。分子環(huán)境參數(shù)可以通過因熒光淬滅或熒光團的構(gòu)象變化而引起的壽命變化來測量。FLIM可用于多種生物應(yīng)用,包括組織表面掃描、組織類型繪圖、光動力治理、DNA芯片分析、皮膚成像等。熒光壽命成像可用于多種生物應(yīng)用,包括組織表面掃描、組織類型繪圖、光動力治理、皮膚成像等。
影響熒光壽命成像測量的因素有哪些?散射光的影響: 主要是瑞利散射光和拉曼散射光的影響較大。校正辦法:先用短的激發(fā)光激發(fā),檢出溶液的拉曼峰,然后進行熒光光譜校正。因為熒光光譜不隨激發(fā)光波長的改變而改變,而拉曼光卻隨之改變。高濃度樣品的影響:1)當(dāng)激發(fā)光照射高濃度樣品時,在激發(fā)光入口附近產(chǎn)生熒光,但這些熒光并不能進入熒光檢測器。2)高濃度的分子之間相互作用而發(fā)生活性阻礙現(xiàn)象。3)熒光的再吸收:即熒光光譜的短波長端和激發(fā)光譜的長波長端如果相互重疊,則發(fā)生熒光再吸收。將熒光壽命成像與共聚焦成像技術(shù)結(jié)合起來,實現(xiàn)人體三維熒光壽命成像,實現(xiàn)人體三維功能成像奠定基礎(chǔ)。天津化學(xué)熒光壽命成像供貨商
熒光壽命取決于熒光分子所處的微環(huán)境,通過對樣品熒光壽命的測量和成像可以定量獲取樣品的功能信息。上海動物熒光壽命成像哪家便宜
熒光壽命成像裝置通常由激發(fā)光源、光電探測器、延遲儀器及圖像處理設(shè)備組成。門控儀器的光源通常為短脈沖的超快激光器,常見的成像設(shè)備是CCD,延遲儀器提供FLIM的控制信號。由于光電探測器和CCD等器件輸出的是光強度信息,熒光壽命圖像可以通過Rapid Lifetime Determination (RLD)和Weighted Nonlinear Least Square (WNLLS)兩種處理方法利用熒光強度圖像通過反演得出。熒光壽命成像(FLIM)有時域和頻域測量法,時域測量中主要有TCSPC技術(shù)、門控探測技術(shù)、條紋相機探測技術(shù)和頻閃技術(shù);頻域測量法中主要是調(diào)制技術(shù)。每一種測量技術(shù)在測量樣品成像的過程中都有優(yōu)勢和劣勢,在實際測量樣品的熒光壽命時,需要根據(jù)實際的樣品裝填而綜合考慮選擇合適的熒光壽命測量技術(shù)。上海動物熒光壽命成像哪家便宜
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