與熒光光譜一樣，熒光壽命也是熒光物質(zhì)的一種內(nèi)在特有性質(zhì)，不受熒光物質(zhì)濃度、激發(fā)光強度等因素的影響。熒光壽命成像能在不受熒光強度影響因素影響的條件下，在納米分辨率水平對蛋白互作進行研究，或者通過 FRET 探針研究分子環(huán)境變化，更重要的是其測量數(shù)據(jù)準確性高、易重復。通過熒光壽命成像還可以對樣本所處的微環(huán)境進行檢測、對樣品組份進行分離等等。在傳統(tǒng)的熒光強度和熒光光譜兩個維度的基礎(chǔ)上，又增加了熒光壽命這一新的成像維度，大幅度拓展了該系統(tǒng)的應用范圍。熒光壽命成像技術(shù)有兩種：時間域和頻率域。廣東分子熒光壽命成像怎么用

熒光壽命成像開始用于組織體的在體成像，與傳統(tǒng)的使用熒光強度和光譜信息作為鑒別組織異常的成像方式相比，壽命成像提供了更多的生化診斷信息。熒光壽命成像已用于骨骼和牙齒的診斷。另外，采用多光子激發(fā)可顯著提高組織體的成像深度，如對人體皮膚自體熒光進行多光子激發(fā)熒光壽命成像,成像深度達200 um，組織體的熒光壽命分布揭示了細胞代謝狀態(tài)的變化，可用于對皮膚病的診斷。對腔體中瘤的早期臨床診斷，已開發(fā)出具有實時及壽命分辨功能的內(nèi)窺鏡,并對離體膀胱樣品進行測試，得到了黃素分子的自體熒光壽命圖像。江蘇紅外熒光壽命成像要多少錢熒光壽命成像可以提供有關(guān)電信號變化、離子和氧含量、溫度、細胞或其環(huán)境中的 pH 值的定量信息。

時域法熒光壽命的測量和熒光壽命成像主要有時間相關(guān)單光子計數(shù)法（time correlated single photon counting, TCSPC）、門控探測法（time-gated detection）、條紋相機測量法（streak-FLIM）、頻閃技術(shù)等四種常見的方法。TCSPC是目前測量熒光壽命的主要技術(shù)，同軸脈沖光源發(fā)出的脈沖光引起起始光電倍增管產(chǎn)生電信號，該信號通過恒分信號甄別器1啟動時幅轉(zhuǎn)換器（time-amplitude converter，TAC），時幅轉(zhuǎn)換器產(chǎn)生一個隨時間線性增長的電壓信號。此外，同軸脈沖光源發(fā)出的脈沖光通過激發(fā)單色器后到達樣品池，樣品產(chǎn)生的熒光信號再經(jīng)過發(fā)射單色器到達終止光電倍增管，由此產(chǎn)生的電信號經(jīng)由恒分信號甄別器2到達時幅轉(zhuǎn)換器并使其停止工作。此時，時幅轉(zhuǎn)換器根據(jù)累積電壓輸出一個數(shù)字信號并在多通道分析儀（multi-channel analyzer）的相應時間通道計入一個信號，表明檢測到壽命為該時間的一個光子。經(jīng)過幾十萬次的重復后，不同的時間通道累積下來的光子數(shù)目不相同。

市場上熒光壽命的測量方式可分為時域法和頻域法，兩者在本質(zhì)上是相通的，測量精度相近，頻域技術(shù)是時域法的傅里葉變換的延伸。時域和頻域技術(shù)在各種顯微壽命成像平臺中都有應用，時間相關(guān)單光子計數(shù)方法（TCSPC )是常見的時域技術(shù)，而新興的數(shù)字頻域技術(shù)（FastFLIM? )則取代了傳統(tǒng)的模擬頻域技術(shù)，憑借其獨恃的優(yōu)勢成為應用廣的頻域技術(shù)。熒光壽命成像主要通過TCSPC技術(shù)（Time-Correlated Single Photon Counting）實現(xiàn)。由于TCSPC系統(tǒng)，一個激光脈沖只采集一個光子信號，所以激光器的重復頻率決定了系統(tǒng)的數(shù)據(jù)采集速度。重頻越高，采集速度越快，數(shù)據(jù)信噪比越好。熒光壽命成像主要應用領(lǐng)域包括：用于樣品分離。

熒光顯微技術(shù)具有無損、非接觸、高特異性、高靈敏、高體友好以及能夠提供功能信息等突出優(yōu)點，一直是生命科學，尤其是細胞生物學研究的重要工具。近年來，隨著生命科學的發(fā)展，對熒光顯微技術(shù)也提出了越來越高的要求，激光技術(shù)、熒光探針標記技術(shù)、新型熒光探測技術(shù)和成像手段的不斷發(fā)展，極大地促進了熒光顯微技術(shù)的發(fā)展，成為推動生命科學發(fā)展的重要動力。此外，熒光顯微技術(shù)也在成像的對比機制方面獲得了很大的進展。超分辨(SR)成像技術(shù)的發(fā)展，也為熒光壽命成像(FLIM)的新發(fā)展提供了巨大的機遇。熒光壽命是熒光基團在通過發(fā)射熒光光子返回基態(tài)之前在其激發(fā)態(tài)下保持平均多長時間的量度。廣東分子熒光壽命成像怎么用

熒光壽命成像(FLIM)可用于測量分子環(huán)境參數(shù)。廣東分子熒光壽命成像怎么用

熒光壽命成像技術(shù)實時監(jiān)控納米顆粒在細胞內(nèi)的穩(wěn)定性：利用熒光壽命成像顯微鏡技術(shù)可實現(xiàn)可以實時監(jiān)控發(fā)光納米顆粒在活細胞內(nèi)的穩(wěn)定性。熒光壽命成像不但具有其它熒光顯微鏡所具有的高靈敏度、可檢測人體生物樣品等優(yōu)點，它在監(jiān)控熒光納米材料的穩(wěn)定性上還具有以下幾個優(yōu)勢：（1）熒光壽命不受熒光探針的濃度的影響，可排除納米材料的胞吐及細胞分化導致的納米顆粒的稀釋等對測量的影響；（2）很多常見的發(fā)光材料的熒光壽命都遠遠大于細胞的自熒光的壽命，很易去除生物自熒光對熒光成像的干擾；（3）發(fā)光材料的熒光壽命和其材料的穩(wěn)定性密切相關(guān)，熒光壽命的改變可以靈敏地反映相應材料的化學穩(wěn)定性。廣東分子熒光壽命成像怎么用

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