熒光分子受激發(fā)后發(fā)光,熒光壽命量化了發(fā)光的衰減率。該特征時(shí)間不但取決于特定的熒光團(tuán),還取決于其環(huán)境,分子相互作用影響弛豫過(guò)程并改變熒光團(tuán)的壽命。熒光壽命是微環(huán)境的相對(duì)參數(shù),不受環(huán)境吸收、樣本濃度等因素影響,因此能夠?qū)ι锝M織環(huán)境中的 p H 值水平、離子濃度、氧分子濃度等微環(huán)境狀態(tài)進(jìn)行高精度檢測(cè)。熒光壽命顯微成像(FLIM),可以定位不同的分子及濃度分布,在生物,材料,半導(dǎo)體領(lǐng)域具有重要的應(yīng)用價(jià)值。熒光壽命成像原理及應(yīng)用說(shuō)明:熒光壽命是指分子受到光脈沖激發(fā)后返回基態(tài)之前在激發(fā)平均停留的時(shí)間,處于激發(fā)態(tài)的熒光分子在從激發(fā)到基態(tài)的過(guò)程中發(fā)射熒光釋放能量。熒光壽命取決于熒光分子所處的微環(huán)境,通過(guò)對(duì)樣品熒光壽命的測(cè)量和成像可以定量獲取樣品的功能信息。熒光壽命(FLT)是熒光團(tuán)在發(fā)射光子并返回基態(tài)之前花費(fèi)在激發(fā)態(tài)的時(shí)間。深圳顯微熒光壽命成像哪家實(shí)惠
熒光壽命成像或FLIM是基于熒光樣品中不同區(qū)域的熒光的指數(shù)衰減速率的差異。由τ決定熒光壽命成像的每個(gè)像素的強(qiáng)度,這使研究人員可以查看具有不同熒光衰減率的材料之間的對(duì)比度,還可以產(chǎn)生顯示其他衰減路徑變化的圖像。可以通過(guò)使用脈沖源在時(shí)域中確定熒光壽命。當(dāng)熒光物質(zhì)被超短脈沖激發(fā)時(shí),時(shí)間分辨的熒光將呈指數(shù)衰減。時(shí)間相關(guān)單光子計(jì)數(shù)(tcspc)通常被用作熒光壽命的測(cè)量方法,因?yàn)樗a(bǔ)償了在源強(qiáng)度和單光子的脈沖幅度的變化。更具體地說(shuō),TCSPC由單個(gè)光子雪崩光電二極管(SPAD)記錄相對(duì)于激發(fā)激光脈沖的單個(gè)光子的壽命。重復(fù)記錄多個(gè)激光脈沖,并在記錄了足夠多的事件后,研究人員能夠建立所有這些記錄的時(shí)間點(diǎn)上事件數(shù)量的直方圖。然后,可以將該直方圖擬合到的指數(shù)壽命衰減函數(shù)的指數(shù)函數(shù),并且可以相應(yīng)地提取壽命參數(shù)。浙江開(kāi)放式熒光壽命成像要多少錢(qián)熒光壽命成像使用簡(jiǎn)單,方便快捷,不需要進(jìn)行參數(shù)調(diào)節(jié)。
熒光壽命成像:作為熒光成像中除光譜和強(qiáng)度之外的新維度,當(dāng)前,熒光壽命成像主要應(yīng)用領(lǐng)域包括:用于樣品分離,如利用不同染料熒光壽命的差異將不同組織、正常與病變細(xì)胞等有效分離。熒光團(tuán)在光譜上非常相似(max 580 vs 573)無(wú)法分離,但它們?cè)跓晒鈮勖喜町惷黠@。作為生物傳感器,如評(píng)價(jià)藥物/理化條件對(duì)細(xì)胞的影響、Ca+震蕩等。充分拓展了壽光命成像的使用范圍,實(shí)現(xiàn)可相互驗(yàn)證的多維度樣品成像。實(shí)現(xiàn)真正的生物動(dòng)力學(xué)分析和功能成像。
熒光壽命成像系統(tǒng)是一種用于化學(xué)領(lǐng)域的分析儀器,熒光壽命成像可以在體現(xiàn)熒光物質(zhì)形貌信息之外,還能夠靈敏地反應(yīng)熒光基團(tuán)生化特性以及周?chē)h(huán)境的變化情況。將熒光壽命成像與共聚焦成像技術(shù)結(jié)合起來(lái),實(shí)現(xiàn)人體三維熒光壽命成像,進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)人體三維功能成像奠定基礎(chǔ),有潛力應(yīng)用于瘤識(shí)別,病變?cè)\斷等領(lǐng)域。熒光壽命是熒光基團(tuán)在通過(guò)發(fā)射熒光光子返回基態(tài)之前在其激發(fā)態(tài)下保持平均多長(zhǎng)時(shí)間的量度。不同熒光基團(tuán)激發(fā)態(tài)停時(shí)間不同,大多數(shù)生物熒光素的熒光壽命時(shí)間在 0.2 - 20 ns。熒光壽命檢測(cè)經(jīng)典方法為點(diǎn)對(duì)點(diǎn)的時(shí)間相關(guān)單光子計(jì)數(shù)(TCSPC),但由于過(guò)去檢測(cè)硬件的局限和復(fù)雜的使用而沒(méi)有被普遍地應(yīng)用于科學(xué)研究。隨著技術(shù)的發(fā)展,在顯微鏡視野內(nèi)進(jìn)行超快速全像素?zé)晒鈮勖盘?hào)采集的熒光壽命成像成為可能。熒光壽命成像系統(tǒng)是一種用于化學(xué)領(lǐng)域的分析儀器。
熒光壽命成像和生物發(fā)光的異同點(diǎn)是什么?生物發(fā)光與熒光壽命成像不同點(diǎn):產(chǎn)生光子的原理不同,類(lèi)似于我們都是通過(guò)肉眼去觀察螢火蟲(chóng)和發(fā)光水母一樣,生物發(fā)光與熒光成像在本質(zhì)上,都是機(jī)體中特定的細(xì)胞或材料發(fā)出光子,被高靈敏度的CCD檢測(cè)到形成圖像,但是生物發(fā)光與熒光壽命成像產(chǎn)生光子的過(guò)程和機(jī)制是完全不同的。生物發(fā)光與熒光成像相同點(diǎn):都需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記。生物發(fā)光產(chǎn)生的光子和熒光壽命成像產(chǎn)生的光子都可以被高靈敏的CCD檢測(cè)并形成圖像,就像一個(gè)人的眼睛就可以既看到螢火蟲(chóng)又可以看到發(fā)光水母一樣。除此之外,生物發(fā)光和熒光壽命成像都需要對(duì)目標(biāo)細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記,讓細(xì)胞產(chǎn)生熒光素酶或者熒光蛋白。熒光壽命成像技術(shù)有兩種:時(shí)間域和頻率域。浙江開(kāi)放式熒光壽命成像要多少錢(qián)
熒光壽命成像這種技術(shù)相對(duì)較新,涉及到同時(shí)在圖像的每個(gè)像素處確定熒光衰減時(shí)間的空間分布。深圳顯微熒光壽命成像哪家實(shí)惠
熒光壽命成像裝置通常由激發(fā)光源、光電探測(cè)器、延遲儀器及圖像處理設(shè)備組成。門(mén)控儀器的光源通常為短脈沖的超快激光器,常見(jiàn)的成像設(shè)備是CCD,延遲儀器提供FLIM的控制信號(hào)。由于光電探測(cè)器和CCD等器件輸出的是光強(qiáng)度信息,熒光壽命圖像可以通過(guò)Rapid Lifetime Determination (RLD)和Weighted Nonlinear Least Square (WNLLS)兩種處理方法利用熒光強(qiáng)度圖像通過(guò)反演得出。熒光壽命成像(FLIM)有時(shí)域和頻域測(cè)量法,時(shí)域測(cè)量中主要有TCSPC技術(shù)、門(mén)控探測(cè)技術(shù)、條紋相機(jī)探測(cè)技術(shù)和頻閃技術(shù);頻域測(cè)量法中主要是調(diào)制技術(shù)。每一種測(cè)量技術(shù)在測(cè)量樣品成像的過(guò)程中都有優(yōu)勢(shì)和劣勢(shì),在實(shí)際測(cè)量樣品的熒光壽命時(shí),需要根據(jù)實(shí)際的樣品裝填而綜合考慮選擇合適的熒光壽命測(cè)量技術(shù)。深圳顯微熒光壽命成像哪家實(shí)惠
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