熒光壽命成像技術(shù)（Fluorescence Lifetime ImagingMicroscopy，F(xiàn)LIM）是一種在顯微尺度下展現(xiàn)熒光壽命空間分布的技術(shù)，由于其不受樣品濃度影響，具有其他熒光成像技術(shù)無法代替的優(yōu)異性能，目前在生物醫(yī)學(xué)工程、光電半導(dǎo)體材料等領(lǐng)域是一種重要的表征測量手段。熒光和熒光壽命：分子包含多個(gè)單能態(tài)S0、S1、S2…和三重態(tài)T1…，每個(gè)能態(tài)都包含多個(gè)精細(xì)的能級(jí)。正常情況下，大部分電子處在*低能態(tài)即基態(tài)S0 的*低能級(jí)上，當(dāng)分子被光束照射，會(huì)吸收光子能量，電子被激發(fā)到更高的能態(tài)S1 或S2 上，在S2 能態(tài)上的電子只能存在很短暫的時(shí)間，便會(huì)通過內(nèi)轉(zhuǎn)換過程躍遷到S1 上，而S1 能態(tài)上的電子亦會(huì)在極短時(shí)間內(nèi)躍遷到S1 的*低能級(jí)上，而這些電子會(huì)存在一段時(shí)間后通過震蕩弛豫輻射躍遷到基態(tài)，這個(gè)過程會(huì)釋放一個(gè)光子，即熒光。此外，亦會(huì)有電子躍遷至三重態(tài)T1 上，再由T1 躍遷至基態(tài)，我們稱之為磷光。影響熒光壽命成像測量的因素有哪些？江蘇三維熒光壽命成像好不好

市場上熒光壽命的測量方式可分為時(shí)域法和頻域法，兩者在本質(zhì)上是相通的，測量精度相近，頻域技術(shù)是時(shí)域法的傅里葉變換的延伸。時(shí)域和頻域技術(shù)在各種顯微壽命成像平臺(tái)中都有應(yīng)用，時(shí)間相關(guān)單光子計(jì)數(shù)方法（TCSPC )是常見的時(shí)域技術(shù)，而新興的數(shù)字頻域技術(shù)（FastFLIM? )則取代了傳統(tǒng)的模擬頻域技術(shù)，憑借其獨(dú)恃的優(yōu)勢成為應(yīng)用廣的頻域技術(shù)。熒光壽命成像主要通過TCSPC技術(shù)（Time-Correlated Single Photon Counting）實(shí)現(xiàn)。由于TCSPC系統(tǒng)，一個(gè)激光脈沖只采集一個(gè)光子信號(hào)，所以激光器的重復(fù)頻率決定了系統(tǒng)的數(shù)據(jù)采集速度。重頻越高，采集速度越快，數(shù)據(jù)信噪比越好。上海單分子熒光壽命成像大概多少錢在種類繁多的顯微技術(shù)中，熒光壽命顯微成像技術(shù)被普遍地應(yīng)用于生物學(xué)研究及臨床診斷等領(lǐng)域。

熒光分子受激發(fā)后發(fā)光，熒光壽命量化了發(fā)光的衰減率。該特征時(shí)間不但取決于特定的熒光團(tuán)，還取決于其環(huán)境，分子相互作用影響弛豫過程并改變熒光團(tuán)的壽命。熒光壽命是微環(huán)境的相對(duì)參數(shù)，不受環(huán)境吸收、樣本濃度等因素影響，因此能夠?qū)ι锝M織環(huán)境中的 p H 值水平、離子濃度、氧分子濃度等微環(huán)境狀態(tài)進(jìn)行高精度檢測。熒光壽命顯微成像（FLIM），可以定位不同的分子及濃度分布，在生物，材料，半導(dǎo)體領(lǐng)域具有重要的應(yīng)用價(jià)值。熒光壽命成像原理及應(yīng)用說明：熒光壽命是指分子受到光脈沖激發(fā)后返回基態(tài)之前在激發(fā)平均停留的時(shí)間，處于激發(fā)態(tài)的熒光分子在從激發(fā)到基態(tài)的過程中發(fā)射熒光釋放能量。熒光壽命取決于熒光分子所處的微環(huán)境，通過對(duì)樣品熒光壽命的測量和成像可以定量獲取樣品的功能信息。

顯微熒光壽命成像應(yīng)用：材料科學(xué)領(lǐng)域：寬禁帶半導(dǎo)體等體系的少子壽命mapping 測量；量子點(diǎn)等用作熒光壽命成像顯微鏡探針；鈣鈦礦電池/LED 薄膜的組分分析、缺陷檢測；銅銦鎵硒CIGS，銅鋅錫硫CZTS 薄膜太陽能電池的組分、缺陷檢測；鑭系上轉(zhuǎn)換納米顆粒；GaAs 或GaAsP 量子阱的載流子擴(kuò)散研究；生命科學(xué)領(lǐng)域：細(xì)胞體自身熒光壽命分析；自身熒光相對(duì)熒光標(biāo)記的有效區(qū)分；活細(xì)胞內(nèi)水介質(zhì)的PH 值測量；局部氧氣濃度測量；具有相同頻譜性質(zhì)的不同熒光標(biāo)記的區(qū)分；活細(xì)胞內(nèi)鈣濃度測量；時(shí)間分辨共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）：納米級(jí)尺度上的遠(yuǎn)差測量，環(huán)境敏感的FRET 探針定量測量；代謝成像：NAD(P)H 和FAD 胞質(zhì)體的熒光壽命成像。熒光壽命是微環(huán)境的相對(duì)參數(shù)，不受環(huán)境吸收、樣本濃度等因素影響。

新技術(shù)和新概念的發(fā)展促進(jìn)了數(shù)據(jù)評(píng)估，意味著熒光壽命成像(FLIM)的速度提高了10倍，可以媲美標(biāo)準(zhǔn)共聚焦成像，且操作簡單。熒光過程提供了兩個(gè)用于成像的測量參數(shù)：強(qiáng)度和熒光壽命。熒光壽命是指分子停留在激發(fā)態(tài)的時(shí)間?？梢酝ㄟ^觀察足夠大量的激發(fā)-發(fā)射事件集中來測量熒光染料的典型壽命。我們可以測量圖像中所有像素的典型壽命，并將這些數(shù)字記入數(shù)組元素。那就是熒光壽命成像。典型的熒光壽命范圍在0.2到20納秒之間。熒光壽命與熒光染料的濃度無關(guān)。無論樣品結(jié)構(gòu)只有零星熒光染料還是載滿熒光染料：壽命信號(hào)始終相同，并表明在同一環(huán)境中存在相同的熒光染料。因此，熒光壽命不受光漂白的影響。樣品深處的圖像將比表面圖像暗得多——但壽命并沒有改變。這是壽命測定的主要優(yōu)勢。熒光壽命成像通常用于研究生物分子間相互作用、細(xì)胞中的信號(hào)事件或區(qū)分光譜重疊的熒光團(tuán)。上海熒光壽命成像供應(yīng)

熒光壽命成像基于熒光團(tuán)的熒光壽命取決于其分子環(huán)境而并非濃度的事實(shí)。江蘇三維熒光壽命成像好不好

熒光壽命成像（FLI）：這種技術(shù)相對(duì)較新，涉及到同時(shí)在圖像的每個(gè)像素處確定熒光衰減時(shí)間的空間分布。它基于熒光團(tuán)的熒光壽命取決于其分子環(huán)境而并非濃度的事實(shí)。它可以用于無法控制局部探針濃度的熒光顯微鏡中。熒光壽命成像(FLIM)可用于測量分子環(huán)境參數(shù)，通過熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)進(jìn)行的蛋白質(zhì)相互作用，并可以通過細(xì)胞和組織的自發(fā)熒光來測量其代謝狀態(tài)。分子環(huán)境參數(shù)可以通過因熒光淬滅或熒光團(tuán)的構(gòu)象變化而引起的壽命變化來測量。FLIM可用于多種生物應(yīng)用，包括組織表面掃描、組織類型繪圖、光動(dòng)力治理、DNA芯片分析、皮膚成像等。江蘇三維熒光壽命成像好不好

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