熒光壽命成像技術及其在生物醫(yī)學中的應用：熒光分子的壽命就像熒光分子的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜一樣是熒光分子的固有特性，隨著近年來對蛋白及分子功能研究的不斷深入，科研工作者除對多色成像、鈣成像等功能成像的需求日漸增多之外，對熒光壽命成像的需求也逐漸增加，而熒光壽命成像能提供除熒光強度、熒光光譜信息之外的熒光分子的壽命信息，可用于分子間相互作用（FRET）、分子所處微環(huán)境的離子濃度（如Ca2+、pH）及細胞代謝水平的改變等測量，并可拆分光譜重疊的熒光染料及染料和自發(fā)熒光，還可以結合熒光相關光譜對單分子實現(xiàn)熒光壽命相關光譜FLCS的測量。熒光壽命成像擴展了傳統(tǒng)熒光成像的維度，是功能成像的理想工具，在生物醫(yī)學領域有廣闊的應用前景。由于熒光壽命成像不受樣品濃度影響，具有其他熒光成像技術無法代替的優(yōu)異性能。遼寧顯微熒光壽命成像售價

作為熒光成像中除光譜和強度之外的新維度，當前，熒光壽命成像主要應用領域包括：用于樣品分離，如利用不同染料熒光壽命的差異將不同組織、正常與病變細胞等有效分離。熒光壽命成像可以提供熒光強度（光子數(shù)）和光子壽命的空間分布，具有200 nm的空間分辨率和皮秒量級的時間分辨率。通過雙光子激發(fā)可以直接檢測熒光和時間分辨的熒光壽命。這種無損檢測技術，無需解剖或專門制造分層樣品，不但可在樣品表面，還可在樣品表面以下實現(xiàn)深度解析測量。特別適用于新材料、光子學、光伏、光催化、生物材料、納米材料和納米復合材料以及其相關的原理探究和設計優(yōu)化。湖北紅外熒光壽命成像研發(fā)熒光壽命顯微成像，可以定位不同的分子及濃度分布，在生物，材料，半導體領域具有重要的應用價值。

熒光壽命成像FLIM所面臨的挑戰(zhàn)：在數(shù)據(jù)處理上，由于曲線擬合迭代過程的需求，計算成本較其他成像方案更高。在成像原理上，熒光壽命受多種外界因素影響，這些因素包括分子相互作用、pH值、溫度和粘滯阻力等，很難對這些參數(shù)控制變量，使得測量熒光壽命存在交叉干擾問題。此外，與普通光學顯微技術類似，介質光散射影響成像信噪比及空間分辨率，成像深度受到限制。FLIM已經(jīng)在系統(tǒng)裝置、熒光探針和數(shù)據(jù)處理算法等方面得到了較快的發(fā)展，這也使得熒光壽命成像FLIM在對細胞微環(huán)境成像和生物代謝監(jiān)測發(fā)揮出不可替代的作用。結合多種先進成像系統(tǒng)，如雙光子成像、結構光照明等，可進一步提升熒光壽命成像FLIM的分辨率和測量精度。另一方面，提升熒光壽命解調的算法性能，將壓縮感知、深度學習等熱點算法與FLIM結合，也同樣對FLIM的發(fā)展起著至關重要的作用?？偟膩碚f，熒光壽命成像FLIM的發(fā)展很好地彌補了基于強度成像的問題，對生物醫(yī)學檢測有著重要的意義。

在使用TCSPC測量熒光壽命的過程中，需要調節(jié)樣品的熒光強度，確保每次激發(fā)后較多只有一個熒光光子到達終止光電倍增管。TCSPC方法的突出優(yōu)點是靈敏度高、測量結果準確、系統(tǒng)誤差小。采用該技術對樣品進行熒光壽命成像時，必須逐點測量樣品的熒光壽命，而每一點的測量時間又比較長，因此，通常認為該技術不太適合熒光壽命測量。不過，近年來，隨著TCSPC技術和固體超快激光技術的發(fā)展，TCSPC技術已具備快速測量熒光壽命的條件。通過與激光共聚焦顯微鏡的結合，可以對樣品進行熒光壽命成像的測量。熒光壽命成像主要應用領域包括：用于樣品分離。

熒光壽命成像可以提供熒光強度（光子數(shù)）和光子壽命的空間分布，具有200 nm的空間分辨率和皮秒量級的時間分辨率。通過雙光子激發(fā)（結合飛秒脈沖和共焦顯微鏡）可以直接檢測熒光和時間分辨的熒光壽命。這種無損檢測技術，無需解剖或專門制造分層樣品，不但可在樣品表面，還可在樣品表面以下實現(xiàn)深度解析測量。特別適用于新材料、光子學、光伏、光催化、生物材料、納米材料和納米復合材料以及其相關的原理探究和設計優(yōu)化。熒光壽命成像圖像中每一個像素點在phasor圖上都有一個對應的點。因此我們可以獲取每個像素點的壽命信息，也可以獲知每一壽命所對應的圖像區(qū)域。熒光壽命是用于幾種生物測定的穩(wěn)健參數(shù)。上海分子熒光壽命成像報價

熒光壽命成像有潛力應用于瘤識別，病變診斷等領域。遼寧顯微熒光壽命成像售價

市場上熒光壽命的測量方式可分為時域法和頻域法，兩者在本質上是相通的，測量精度相近，頻域技術是時域法的傅里葉變換的延伸。時域和頻域技術在各種顯微壽命成像平臺中都有應用，時間相關單光子計數(shù)方法（TCSPC )是常見的時域技術，而新興的數(shù)字頻域技術（FastFLIM? )則取代了傳統(tǒng)的模擬頻域技術，憑借其獨恃的優(yōu)勢成為應用廣的頻域技術。熒光壽命成像主要通過TCSPC技術（Time-Correlated Single Photon Counting）實現(xiàn)。由于TCSPC系統(tǒng)，一個激光脈沖只采集一個光子信號，所以激光器的重復頻率決定了系統(tǒng)的數(shù)據(jù)采集速度。重頻越高，采集速度越快，數(shù)據(jù)信噪比越好。遼寧顯微熒光壽命成像售價

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