熒光壽命是熒光分子在激發(fā)態(tài)停留的時間，這個時間可以反映熒光分子的內在屬性和所處的微環(huán)境，是一個很有用的工具。以往，熒光壽命的測量和計算是件非常復雜和耗時的工作，只有少數(shù)專業(yè)的科學家關注和使用該工具。傳統(tǒng)的多色成像實驗根據(jù)光譜差異來設計，會有串色等限制，而且需要多次采集圖像，會造成樣品的光損傷。通過熒光壽命來進行成像，只需要拍攝一次就完成圖像采集，不但減少了成像時間，而且降低了激光對樣品的損傷。熒光壽命成像使用簡單，方便快捷，不需要進行參數(shù)調節(jié)。熒光壽命成像可以用于無法控制局部探針濃度的熒光顯微鏡中。北京顯微熒光壽命成像售價

熒光壽命成像中的熒光壽命及其含義：假定一個無限窄的脈沖光(δ函數(shù))激發(fā)n0個熒光分子到其激發(fā)態(tài)，處于激發(fā)態(tài)的分子將通過輻射或非輻射躍遷返回基態(tài)。假定兩種衰減躍遷速率分別為Γ和knr，則激發(fā)態(tài)衰減速率可表示為：其中n(t)表示時間t時激發(fā)態(tài)分子的數(shù)目，由此可得到激發(fā)態(tài)物種的單指數(shù)衰減方程。熒光壽命定義為衰減總速率的倒數(shù)：熒光強度正比于衰減的激發(fā)態(tài)分子數(shù)，因此可將上式改寫為：其中I0是時間為零時的熒光強度，τ為熒光壽命。也就是說熒光強度衰減到初始強度的1/e時所需要的時間就是該熒光物種在測定條件下的熒光壽命。實際上用熒光強度的對數(shù)對時間作圖，直線斜率即為熒光壽命倒數(shù)的負值。熒光壽命也可以理解為熒光物種在激發(fā)態(tài)的統(tǒng)計平均停留時間。事實上當熒光物質被激發(fā)后有些激發(fā)態(tài)分子立即返回基態(tài)，有的甚至可以延遲到5倍于熒光壽命時才返回基態(tài)，這樣就形成了實驗測定的熒光強度衰減曲線。北京顯微熒光壽命成像售價熒光壽命成像可用于多種生物應用，包括組織表面掃描、組織類型繪圖、光動力治理、皮膚成像等。

熒光壽命成像在生物醫(yī)學研究和臨床診斷應用中的許多場合都對多光譜分辨提出特殊要求，如在FRET測量中，要求能同時測量供體和受體的熒光強度隨時間的衰減，多光譜分辨的熒光壽命成像提供了一種新的定量研究手段．目前，基于門控像增強器的多光譜寬場FLIM 技術一次只能獲得至多兩個譜段的熒光壽命圖像，而基于TCSPC的多光譜分辨FLIM的成像速度又很低，這些都限制了其應用范圍．目前的一個研究方向是，發(fā)展光譜分辨率高、成像速度快、價格低廉的多光譜分辨熒光壽命成像顯微技術。

熒光壽命成像裝置通常由激發(fā)光源、光電探測器、延遲儀器及圖像處理設備組成。門控儀器的光源通常為短脈沖的超快激光器，常見的成像設備是CCD，延遲儀器提供FLIM的控制信號。由于光電探測器和CCD等器件輸出的是光強度信息，熒光壽命圖像可以通過Rapid Lifetime Determination （RLD）和Weighted Nonlinear Least Square （WNLLS）兩種處理方法利用熒光強度圖像通過反演得出。熒光壽命成像（FLIM）有時域和頻域測量法，時域測量中主要有TCSPC技術、門控探測技術、條紋相機探測技術和頻閃技術；頻域測量法中主要是調制技術。每一種測量技術在測量樣品成像的過程中都有優(yōu)勢和劣勢，在實際測量樣品的熒光壽命時，需要根據(jù)實際的樣品裝填而綜合考慮選擇合適的熒光壽命測量技術。熒光壽命(FLT)是熒光團在發(fā)射光子并返回基態(tài)之前花費在激發(fā)態(tài)的時間。

熒光壽命成像FLIM在生物學上的應用根據(jù)熒光分子種類可以分為三種：分別為自發(fā)熒光FLIM、外源分子探針FLIM和FRET-FLIM。自發(fā)熒光FLIM被普遍應用于非標記生物成像領域。所謂自發(fā)熒光，即生物細胞本身便包含熒光分子，稱為內源性熒光分子團。FLIM通過對自發(fā)熒光分子團（如NAD(P)H和FAD）熒光壽命的考察，可以實現(xiàn)細胞代謝的監(jiān)測。這種方案無需人為對樣品加入熒光試劑便可以發(fā)射熒光，有效減少了熒光染料對樣品的毒性、熒光分子與樣品的非特異性結合及染料對生理性能的干擾影響。熒光壽命可以在頻域或者時間域測量。江蘇分子熒光壽命成像

隨著技術的發(fā)展，在顯微鏡視野內進行超快速全像素熒光壽命信號采集的熒光壽命成像成為可能。北京顯微熒光壽命成像售價

熒光分析和成像技術因具有非常高的靈敏度和分子特異性而普遍的應用于生物物理、生物化學、醫(yī)學、物理、化學等領域，利用熒光光譜技術和熒光顯微技術可以分析樣品中熒光團的組分和分布。不過，由于熒光分析技術大多是基于熒光強度的測量，容易受到激發(fā)光強度、樣品濃度淬滅、熒光染料的分布濃度等因素的影響。熒光壽命通常來講是一定的，不受激發(fā)光強度、熒光團濃度等因素的影響，只只與熒光團所處的微環(huán)境有關，因此，利用熒光壽命顯微鏡（Fluorescence lifetime imaging microscopy, FLIM）對樣品進行熒光壽命成像，可以對樣品所在的微環(huán)境中的許多物理參數(shù)如氧壓、溶液疏水性等及生物化學參數(shù)如pH值、離子濃度等進行定量測量。此外，熒光壽命成像技術還可以同時獲得分子狀態(tài)和空間分布的信息。北京顯微熒光壽命成像售價

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