ELISA法是免疫診斷中的一項新技術,現(xiàn)已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據(jù)已經(jīng)使用的結果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于幾天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標本,因此,也適合于血清流行病學調(diào)查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學各領域的應用范圍日益擴大,可概括四個方面:1、免疫酶染色各種細胞內(nèi)成份的定位。2、研究抗酶抗體的合成。3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應。4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。ELISA試劑盒在樣品分析過程中的損失的程度。揭陽ELISA試劑盒價錢
先將抗原結合到ELISA板上,隨后分兩步進行檢測:首先加入檢測抗體與抗原特異性結合,隨后加入酶標二抗檢測并利用底物顯色。與直接ELISA相比,間接ELISA用到酶標二抗,具有更高的靈敏度,也需要更少的標記抗體,更經(jīng)濟。間接ELISA還提供了更大的靈活性,因為不同的一抗能夠與單一標記的二抗一同使用。間接ELISA實驗的缺點是存在交叉反應的可能性(酶標二抗直接與抗原結合),可能會增加背景,同時與直接ELISA相比,間接ELISA實驗多了二抗孵育的步驟,實驗周期延長。珠海ELISA試劑盒多少錢ELISA試劑盒應該保證實驗結果的重復性。
ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,得到全世界科研工作者的認可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內(nèi)生化領域的長足發(fā)展。Elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。
ELISA試劑盒在盒底墊濕的紗布,后將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應先放在保溫箱中預溫至規(guī)則的溫度,特別是在氣溫較低的時候更應如此。 無論是水浴仍是濕盒溫育,反響板均不宜疊放,以確保各板的溫度都能敏捷平衡。室溫溫育的反響,操作時的室溫應嚴厲限制在規(guī)則的范圍內(nèi),規(guī)范室溫溫度是指20~25℃,但具體操作時可根據(jù)說明書的要求控制溫育。室溫溫育時,ELISA試劑盒只需平置于操作臺上即可。應留意溫育的溫度和時刻應按規(guī)則力求準確。為確保這一點,一個人操作時,一次不宜多于兩塊板一起測定。ELISA試劑盒產(chǎn)物的量與標本中受檢物質的量直接相關。
ELISA試劑盒可用于測定抗原,也可用于測定抗體。根據(jù)試劑的來源和標本的情況以及檢測的具體條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。ELISA試劑盒再加入酶標記的抗原或者抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或者定量分析。1.每個標本量收集體積=100ul×檢測種類,如要做復孔,標本量收集體積=100ul×檢測種類×2。2.對于作某一個具體指標來說,較好是先用一系列稀釋度作一批標本測定,得出對實驗有意義的一個稀釋度(即測定劑量反應曲線),然后用一個較為適稀釋度測定即可。3.ELISA試劑盒收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。4.對收集后當天進行檢測的標本,儲存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集標本,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。ELISA試劑盒酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。江西ELISA試劑盒價錢
試劑盒用于盛放檢測化學成分、藥物殘留、病毒種類等化學試劑的盒子。揭陽ELISA試劑盒價錢
ELISA試劑盒可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在ELISA實驗過程中處理血清樣本時有哪些注意事項呢?1、要注意避免出現(xiàn)嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標記酶的ELISA測定中,如血清樣本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應顯色。2、樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染,一則細菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應酶作標記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。3、血清樣本如是以無菌操作分離,則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應在-70℃以下。4、冰凍保存的血清樣本須注意避免因停電等造成的反復凍融。樣本的反復凍融所產(chǎn)生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用,從而引起假陰性結果。此外,凍融樣本的混勻亦應注意,不要進行劇烈振蕩,反復顛倒混勻即可。5、樣本在保存中如出現(xiàn)細菌污染所致的混濁或絮狀物時,應離心沉淀后取上清檢測。揭陽ELISA試劑盒價錢
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